真鲷鱼头制取鱼油及肽硒螯合物的研究

论文摘要

真鲷鱼的加工过程中产生大量下脚料,鱼头是其主要的副产物,且富含蛋白质和脂肪。本论文以真鲷鱼头为原料,通过酶法水解制备肽和鱼油,并以分子量小于3000Da的肽为原料与硒盐合成制备肽硒螯合物,为真鲷鱼头的开发利用提供技术支撑。不同酶的水解试验结果表明,胰蛋白酶水解度最大,通过正交试验得到,其最佳酶解条件为：酶添加量950 U/g、温度55℃、料液比1：4、pH值7.0、水解时间6 h。此条件下,蛋白水解度为61.15%,鱼油提取率为82.09%。高效液相色谱法分析表明,水解液中15种氨基酸总量达41909mg/100mL,必需氨基酸含量为241.24mg/100mL。利用活性炭对水解液脱腥,去腥条件为：温度45℃,活性炭用量0.5%,时间35min。经活性炭处理过的水解液腥味值为2.25,肽损失为4.09%。气相质谱联用法测定结果表明,粗鱼油含23种脂肪酸,主要为C13-C22脂肪酸,不饱和脂肪酸含量为71.45%,EPA及DHA的总量为19.52%。水解液的超滤分离研究表明,超滤条件为：压力0.08 MPa、温度30℃。收集分子量小于3000 Da的肽水解液备用。正交试验结果表明,螯合反应的最佳工艺为：温度80℃、质量比（肽：硒盐）3：1、pH 8.5、肽浓度3%、时问40 min。此条件下,螯合率为42.26%,产物得率36.19%。紫外光谱、红外图谱分析结果表明肽与硒豁之问生成了螯合盐。体外抗氧化试验结果表明,肽及肽硒螫合物对DPPH·自由基、·OH自由基和02。·自由基均具有一定的清除能力。对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑菌试验结果表明,在样品浓度范围内,肽对沙门氏菌和枯草芽孢柑菌均表现出一定的抑制作用；肽硒螯合物对沙门氏菌表现出一定的抑制作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 前言
• 1.1 鱼类下脚料综合利用的研究现状
• 1.1.1 真鲷鱼简介
• 1.1.2 鱼头的综合利用研究进展
• 1.2 水解蛋白的研究进展
• 1.2.1 蛋白质的水解方法
• 1.2.2 水解蛋白产物活性肽的研究现状
• 1.2.3 酶解蛋白的局限性
• 1.3 微量元素多肽螯合盐的研究进展
• 1.3.1 微量元素硒的生理功能
• 1.3.2 多肽螯合物的制备方法
• 1.3.3 多肽螯合物的研究
• 1.4 本课题研究的目的及内容
• 1.4.1 本课题研究的目的和意义
• 1.4.2 本课题研究的主要内容
• 2 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 原料
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 主要设备
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 真鲷鱼头基本成分的测定方法
• 2.2.2 粗鱼油提取率的测定
• 2.2.3 水解度的测定
• 2.2.4 蛋白酶活力的测定方法
• 2.2.5 真鲷鱼头酶解工艺的确定
• 2.2.6 蛋白水解液的氨基酸组成
• 2.2.7 蛋白水解液去腥条件研究
• 2.2.8 粗鱼油脂肪酸组成的测定
• 2.2.9 蛋白水解液超滤分离条件的研究
• 2.2.10 肽硒螯合物的合成工艺研究
• 2.2.11 肽硒螯合物的结构表征
• 2.2.12 肽硒螯合物的抗氧化性质的研究
• 2.2.13 肽硒螯合物的抑菌能力测定
• 3 结果与讨论
• 3.1 真鲷鱼头基本成分的测定
• 3.2 蛋白酶活力的测定
• 3.3 真鲷鱼头酶解工艺的优化
• 3.3.1 蛋白酶种类的选择
• 3.3.2 胰蛋白酶水解工艺条件的单因素实验
• 3.3.3 真鲷鱼头酶解正交实验
• 3.4 蛋白水解液的氨基酸组成分析
• 3.4.1 15种氨基酸标准曲线
• 3.4.2 蛋白水解液中的氨基酸含量
• 3.5 蛋白水解液去腥条件研究
• 3.5.1 BSA标准曲线
• 3.5.2 活性炭去腥的单因素实验
• 3.5.3 活性炭去腥正交试验
• 3.6 粗鱼油脂肪酸组成的分析
• 3.7 蛋白水解液超滤分离条件的研究
• 3.7.1 不同压力下的膜通量和膜效能的测定结果
• 3.7.2 不同温度下的膜通量和膜效能的测定结果
• 3.8 肽硒螯合物的合成工艺研究
• 3.8.1 硒标准曲线的绘制
• 3.8.2 肽硒螯合物制备的单因素实验
• 3.8.3 肽硒螫合物制备的正交实验结果
• 3.9 肽硒螫合物的结构表征
• 3.9.1 紫外扫描结果
• 3.9.2 红外光谱分析
• 3.10 肽硒螯合物的抗氧化结果
• 3.10.1 清除DPPH·自由基能力
• 3.10.2 清除羟自由基（·OH）能力
• 2^-·）能力'>3.10.3 清除超氧阴离子（O₂^-·）能力
• 3.11 肽硒螯合物的抑菌活性研究
• 4 结论
• 5 展望
• 6 参考文献
• 7 攻读硕士学位期间发表论文情况
• 8 致谢