论文摘要
目的:镉是环境中广泛存在的有毒重金属之一,也是一种高度可疑的环境内分泌干扰物质;主要经消化道或呼吸道进入动物和人体内,引起多种器官组织和细胞毒性损伤。其中对生殖系统的毒性较为敏感且影响深远,已受到国内外许多学者的普遍关注,并进行了大量的动物实验研究,但对镉的雌性性腺生殖毒性的系统干预研究报道甚少。本文旨在探讨α-硫辛酸对镉致雌性大鼠生殖系统损害的保护作用及其相关机制,为镉中毒的预防和治疗提供科学依据。方法:1 40只雌性成年SD大鼠按体重随机分为4组,每组10只,包括对照组、单纯染镉组、镉+低剂量α-硫辛酸（Low-dose LA）、镉+高剂量α-硫辛酸组（High-dose LA）。给3个实验组大鼠腹腔注射1.0mg/kg Cdcl2溶液,每天1次,每周5天,连续6周;对照组大鼠在相应时间腹腔注射等量生理盐水;于第7周、第8周两干预组大鼠分别腹腔注射20mg/kg、100 mg/kgα-硫辛酸溶液,对照组与单纯染镉组在相应时间内腹腔注射生理盐水,注射容量均为5ml/kg,每周5次。2染毒第20天起每12h用阴道脱落细胞涂片法连续观察并记录动情周期。3干预结束后心脏取血制备血清,用放射免疫分析法（RIA）测定各组促卵泡生成激素（FSH）、黄体生成激素（LH）、雌二醇（E2）、孕酮（P）的含量。4剖腹取子宫、卵巢连同上述所得部分血清经消化后用原子吸收光谱法测定镉含量。5用二巯双硝基苯甲酸法测定卵巢谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性;用黄嘌呤氧化酶法测定卵巢超氧化物歧化酶（SOD）活性。6卵巢连续切片在电镜下观察其病理形态学改变。7使用SPSS12.0软件中的卡方检验、Q检验、方差分析对所得数据进行统计处理。结果:1各组大鼠一般情况:单纯染镉组大鼠出现不同程度的精神委靡、食欲减退、被毛光泽度下降、腹泻,解剖发现3只大鼠有不同程度的腹水和脏器粘连;α-硫辛酸干预组精神状况、食欲与对照组相比无明显差异。2大鼠动情周期的观察:与对照组相比,单纯染镉组大鼠动情周期和动情间期异常率（动情周期和动情间期延长）均明显升高,有统计学意义（P<0.05）;与单纯染镉组相比,高、低剂量α-硫辛酸组动情周期和动情间期异常率有所下降,但差异不明显（P>0.05）;其它动情时期在各剂量组间无明显差异,无统计学意义（P>0.05）。3血清性激素含量的测定:单纯染镉组血清中E2、P含量较对照组明显下降,有统计学意义（P<0.01）;与单纯染镉组比,低剂量α-硫辛酸组血清中P含量升高（P<0.05）,E2含量有所升高但差异不明显,无统计学意义（P>0.05）,高剂量α-硫辛酸组血清中E2、P含量明显升高,有统计学意义（P<0.01）;血清中FSH、LH含量各剂量组间无明显差异,无统计学意义（P>0.05）。4血清镉含量的测定:与对照组比,单纯染镉组血清镉含量明显升高,有统计学意义（P<0.01）;与单纯染镉组比,低剂量α-硫辛酸组血清镉含量下降（P<0.05）,高剂量α-硫辛酸组血清镉含量明显下降（P<0.01）;且与对照组比,高剂量α-硫辛酸组血清镉含量无明显差异,无统计学意义（P>0.05）。5子宫镉含量的测定:与对照组比,单纯染镉组子宫镉含量明显升高,有统计学意义（P<0.01）;与单纯染镉组比,低剂量α-硫辛酸组子宫镉含量下降不明显,无统计学意义（P>0.05）,高剂量α-硫辛酸组子宫镉含量明显下降,有统计学意义（P<0.01）。6卵巢镉含量的测定:与对照组比,单纯染镉组卵巢镉含量明显升高,有统计学意义（P<0.01）;与单纯染镉组比,低剂量α-硫辛酸组卵巢镉含量下降（P<0.05）,高剂量α-硫辛酸组卵巢镉含量明显下降,有统计学意义（P<0.01）。7卵巢酶活性的测定:与对照组比,单纯染镉组GSH-Px、SOD活性明显下降,有统计学意义（P<0.01）;与单纯染镉组比,低剂量α-硫辛酸组可使卵巢中SOD活性升高（P<0.05）,高剂量α-硫辛酸组可使卵巢中GSH-Px、SOD活性明显升高,有统计学意义（P<0.01）。8卵巢电镜形态学观察:与对照组相比,单纯染镉组初级卵泡内有大量脂滴、少量空泡变,细胞核不规则、核仁消失,粗面内质网扩张、脱颗粒,线粒体水肿、嵴数量减少,部分嵴排列紊乱、甚至融合消失,部分膜融合消失等表现;高、低剂量α-硫辛酸组可使以上现象有所缓解。结论:1本研究成功制作大鼠亚慢性镉中毒模型,进一步明确镉对大鼠的雌性性腺生殖毒性。2α-硫辛酸可使大鼠动情周期和动情间期异常率以及血清、子宫、卵巢中镉含量下降;使血清中E2、P水平及卵巢中SOD、GSH-Px酶活性升高,从而说明α-硫辛酸对镉致大鼠的雌性性腺生殖毒性有良好的保护作用。3α-硫辛酸拮抗镉毒性的机制可能与增强机体抗氧化防御体系、促进镉的排出、减少镉的蓄积以及提高卵巢组织的酶活性和促进雌、孕激素的合成和分泌有关。4综合分析本实验结果,高、低剂量α-硫辛酸组对镉致大鼠的雌性性腺生殖毒性有一定的保护作用,且随着α-硫辛酸剂量的增加这种保护作用更明显,这给我们临床用药和基础研究都带来新的启示,为镉中毒的防治提供新的途径,但其发挥保护作用的有效剂量尚待于进一步的研究。