甘蓝型黄籽油菜种质资源指纹图谱构建及利用评价

论文摘要

本研究以不同来源的甘蓝型黄籽油菜种质为材料，研究其基因组DNA水平上SSR分子标记多态性、种皮色素种类和含量、含油量、蛋白质、硫甙和芥酸含量等性状的材料间的遗传差异，分析甘蓝型黄籽油菜的遗传多样性及DNA指纹图谱的构建。1．对不同来源的甘蓝型黄籽油菜品种（品系）的千粒重测定结果表明：不同甘蓝型黄籽油菜种子千粒重差异较大，变幅在1.54g-4.76g之间，平均为3.65g，多数集中在3.4g-3.8g之间；且饱满程度差异也较大。通过观察试验材料种子的粒色具有金黄，纯黄、橙黄、青黄、淡黄、褐黄、黄褐、褐青、灰黄、暗黄、紫褐、黑褐等不同颜色，体现了油菜种子颜色的多样性。2．通过对51份不同遗传背景的甘蓝型黄籽油菜种子的种皮色素种类、含量和品质性状等的分析，结果表明：影响种皮色泽的色素主要为黑色素和花色素，根据其含量的不同，可分为高花色素类、高黑色素类和低色素类等3个类群。种子颜色等级与种子含油量呈极显著的正相关，种子颜色等级与种子蛋白质含量呈极显著的负相关。3．在51个供试材料中，含油量的变幅在31.8％-46.4％之间，其中高于40％的有29个材料，占56.9％。种子蛋白质含量为23-34.9％。其种子的含油量与蛋白质含量呈极显著负相关关系。芥酸含量的变幅为0.56-5.40％，硫甙含量变幅为6.95umol／g-76.43umol／g，芥酸与硫甙的相关系数达到极显著正相关水平。硫甙与含油量呈显著正相关系。4．对SSR扩增结果进行UPGMA分析，发现甘蓝型黄籽油菜DNA存在着丰富的多态性。遗传相似系数为0.12-0.68。52份甘蓝型油菜材料被划分为8个类群，其中51个甘蓝型黄籽油菜材料可被划分为7个类群，并且只需Na12C06，Na10D03，Ra2A05b，Ra2E07，0109A03a，0113D02Aa，Ra2F11d等7对多态性特高的引物就将这52个材料区分开来。并利用从指纹图谱中筛选出共显性标记引物Ra2A05b，对杂交油菜贵油519种子进行分子标记纯度鉴定，与大田生产纯度鉴定结果比较。分子标记纯度鉴定杂交种纯度为90.09％：大田鉴定为95.75％。结果表明，SSR标记鉴定可以识别更多的非杂交种单株。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1. 前言
• 1.1 中国油菜资源的概况
• 1.2 贵州油菜种质资源的概况
• 1.3 甘蓝型黄籽油菜的发现
• 1.3.1 甘蓝型黄籽油菜的选育的重要意义
• 1.3.2 甘蓝型黄籽油菜的来源
• 1.4 甘蓝型黄籽油菜的特点
• 1.4.1 甘蓝型黄籽油菜的籽粒色泽
• 1.4.2 黄籽种皮色泽的遗传
• 1.4.3 粒色与含油量的关系
• 1.5 分子标记及其在油菜育种中的应用
• 1.5.1 分子标记的种类及发展
• 1.5.2 分子标记在油菜遗传育种中的应用
• 1.5.2.1 遗传图谱的构建
• 1.5.2.2 遗传多样性研究
• 1.5.2.3 重要性状基因的图谱定位和标记辅助选择
• 1.6 本研究的目的和意义
• 1.6.1 研究的主要内容
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 主要仪器设备和试剂
• 2.3 方法
• 2.3.1 甘蓝型油菜种皮颜色和色素种类的多样性
• 2.3.2 甘蓝型黄籽油菜SSR遗传多样性试验方法
• 2.3.2.1 总DNA的提取
• 2.3.2.2 DNA的检测
• 2.3.2.3 SSR分析
• 2.3.3 种子品质性状的测定
• 3. 结果与分析
• 3.1 甘蓝型黄籽油菜颜色和千粒重的遗传多样性
• 3.1.1 不同材料的甘蓝型黄籽油菜种子大小和颜色的多样性
• 3.1.2 甘蓝型黄籽油菜种皮色素的遗传多样性
• 3.1.3 甘蓝型黄籽油菜种皮色素、颜色等级与含油量、蛋白质含量、芥酸含量和硫甙含量多样性及其相互间关系
• 3.2 甘蓝型黄籽油菜SSR多样性
• 3.2.1 引物筛选
• 3.2.2 甘蓝型黄籽油菜SSR多样性分析
• 3.2.3 甘蓝型黄籽材料的聚类及多样性分析
• 3.2.4 甘蓝型黄籽油菜材料的DNA指纹图谱构建
• 3.2.5 贵油519杂种纯度鉴定
• 3.2.5.1 以田间育性调查鉴定杂交种纯度
• 3.2.5.2 以SSR分子标记鉴定杂交种纯度
• 4. 结论与讨论
• 4.1 甘蓝型黄籽油菜重量和饱满度的遗传多样性
• 4.1.1 甘蓝型黄籽油菜种子大小和颜色的遗传多样性
• 4.1.2 甘蓝型黄籽油菜种子颇色、色素的遗传多样性
• 4.1.3 甘蓝型黄籽油菜种皮色素、颜色等级与含油量、蛋白质含量、芥酸含量和硫甙含量多样性及其相互间关系
• 4.2 甘蓝型黄籽油菜SSR多样性和指纹图谱的构建
• 4.3 杂交种纯度鉴定
• 4.4 小结
• 致谢
• 附录
• 参考文献
• 图版