深低温冻存对大月龄胎儿带瓣血管材料免疫原性的影响

论文摘要

目的:通过研究深低温保存前后大月龄胎儿主、肺动脉带瓣血管组织相容性白细胞抗原（HLA）的表达情况,了解HLA抗原的表达位置以及深低温保存过程对HLA抗原表达的影响。 方法:取脑死亡胎儿（胎龄28周以上）主、肺动脉带辦血管10例,热缺血时间要求在12小时之内。每例标本分成两部分,一部分新鲜者作为对照组;另一部分为实验组经M199原液与二甲基亚砜（DMSO）处理后浸入液氮中深低温冻存。所有标本用冰冻切片包埋剂（ZLI-9302）放在不锈钢包埋模具上快速冷冻。它们被储存在—20℃冰箱,然后用恒冷箱切片机（Leica CM 1900）切片。所有切片包在银箔中储存在—20℃冰箱中直到被染色,用免疫组化的方法利用鼠抗人单克隆抗体:HLA-ABC（0736）、HLA-DR（ZM-0136）,CD45RO（ZM-0055）,CD34（ZM-0046）,检测冷冻前后人组织相容性白细胞抗原Ⅰ类（HLA ABC）、Ⅱ类（HLADR,DP,DQ）和内皮细胞的变化情况,并将检测结果作图像分析。 结果:新鲜的血管壁和瓣膜内皮表面均表达Ⅰ类抗原（+++）一（++++）,而Ⅱ类抗原在血管壁内皮下层和辦膜基质中表达。低温冻存复温后:Ⅰ类抗原在血管壁和辦膜内皮表面消失（-）。Ⅱ类抗原在动脉内皮下层和辦膜基质中表达减弱（+-）-（+）。动脉内皮下层和瓣膜基

论文目录

• 引言
• 第一章 实验材料和方法
• 1.1 标本制备
• 1.2 主要试剂及配制
• 1.3 研究中使用的抗体
• 1.4 主要仪器、设备和用品
• 1.5 实验方法
• 1.6 实验操作流程
• 第二章 实验结果
• 第三章 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 学位论文独创性声明、学位论文知识产权权属声明