论文摘要
目的 建立大鼠移植肾模型并观察含核因子-κ B（nuclear factor-kappa B,NF-κ B）诱捕物（decoy）寡聚核苷酸（Oligodeoxynucletides,ODN）脂质体复合物的ECs（Euro-Collins solution,ECs）器官保存液对大鼠肾脏保存的效果;观察在ECs中及低温缺氧保存条件下,脂质体介导诱捕物ODN对大鼠供肾的转染和NF-κ B诱捕物ODN对大鼠移植肾早期炎性损伤的保护作用。 方法 一、同种异体大鼠原位肾移植模型的建立:雄性Wister大鼠和SD大鼠各25只。供体切取范围包括腹主动脉（上至腹腔动脉以下,下至左肾动脉下方约0.8cm）、左肾、左肾动静脉、左输尿管,部分膀胱。受体手术,游离腹主动脉上至肠系膜前动脉,下至左肾动脉下方约1.0cm,肾静脉游离到距肾门约0.5cm,并在左肾下极水平切断输尿管,在肾被膜下游离肾脏并切除。利用显微缝合技术（三定点连续锁边缝合）吻合移植肾血管及输尿管膀胱。 将三只供体右肾切除后迅速固定于10%福尔马林作对照;将供肾游离后,用4℃的ECs灌注左肾,低温保存6h后,用10%福尔马林固定,用光镜观察保存效果;将供肾游离后,先用4℃的ECs灌注左肾,再用4℃的含1μM的NF-κ B诱捕物ODN脂质体复合物的ECs灌注,低温保存6h后,用10%福尔马林固定,用观察NF-κ B诱捕物ODN脂质体复合物对供肾保存的效果。 二、试验分四组:（1）Control组假手术组,Wister大鼠麻醉后,开腹后,即将伤口缝合,6h后切取左肾;（2）ECs组供肾经ECs（不含脂质体/ODN复合物）低温缺氧保存6h,移植到受体大鼠6h后切取移植肾;（3）decoy ODN组供肾经含1μM的decoy ODN脂质体复合物的ECs低温缺氧保存6h,移植到受体大鼠6h切取移植肾;（4）scram.ODN组供肾经含1μM的scrambled ODN脂质体复合物的ECs低温缺氧保存6h,移植到受体大鼠6h切取移植肾。 应用荧光显微镜和多光子共聚焦显微镜观察转染有FITC标记ODN的移植肾,在移植术后15min和6h时的荧光分布;应用EMSA（electrophoretic mobility shift assay,EMSA）方法检测经诱捕物ODN转染肾脏的NF-κ B DNA结合活性;用RT-PCR
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