论文摘要
目的：肥大细胞浸润至气道平滑肌束是支气管哮喘关键的病理特征之一。而哮喘时气道内胞外ATP浓度上调也在炎症反应等过程中具有重要作用。已经证实胞外ATP对树突状细胞具有活化以及趋化作用,然而其对人肥大细胞系（HMC-1）是否具有趋化作用尚不得而知。因此我们在Th2细胞因子刺激气道平滑肌细胞模拟体外哮喘环境条件下对ATP在肥大细胞趋化活性以及部分趋化因子途径中的作用进行探讨。方法：体外培养OVA-致敏激发的哮喘小鼠的气道平滑肌细胞（ASMC）。用Th2细胞因子IL-4以及IL-13刺激模拟体外哮喘环境。检测此时ASMC细胞上清中的ATP浓度。用Transwell系统检测以上上清以及ATP对HMC-1细胞的趋化作用。用流式细胞术检测HMC-1细胞表面趋化因子受体CXCR3,CXCR4的表达水平。用ELISA法检测ASMC上清内趋化因子CXCL10的分泌水平。Realtime-PCR测定上述趋化因子及其受体的mRNA表达水平。结果：IL-4以及IL-13刺激可以上调体外培养的ASMC上清中ATP的分泌水平。而ATP水解酶CD39可以拮抗这一作用,ATP酶抑制剂ARL67156可以进一步上调这一作用。ATP在10μM浓度时对HMC-1对趋化诱导作用最为显著。而IL-4+IL-13刺激的ASMC上清对肥大细胞有趋化作用,且这一作用能被CD39拮抗。ATP以及IL-4+IL-13处理的ASMC上清刺激HMC-1后，可上调HMC-1细胞CXCR3的蛋白以及mRNA水平表达。且IL-4+IL-13处理后,ASMC上清中CXCL10的表达水平亦增加。结论：Th2细胞因子刺激ASMC使其分泌更多ATP,从而上调HMC-1细胞的趋化水平。ATP可以增强HMC-1细胞表面趋化因子受体CXCR3的表达。同时Th2细胞因子刺激可增强其趋化因子配体CXCL10的分泌水平。这一ATP介导的效应可被CD39拮抗。可见,ATP在肥大细胞趋化过程中具有重要作用,而其水解酶CD39可通过酶解ATP参与调控肥大细胞浸润入气道平滑肌束的过程中。