调肝方药对愤怒和郁怒情绪模型大鼠不同脑区5-HTR2C表达水平的影响

论文摘要

目的:观察愤怒、郁怒情绪模型大鼠不同脑区中5羟色胺2C受体（5-HTR2C） mRNA和蛋白表达变化及调肝方药（经前平颗粒和经前舒颗粒）对其表达水平的调节作用,探讨愤怒、郁怒的发病机理,并探究调肝方药对大鼠愤怒、郁怒情绪的干预作用。方法:采用居住入侵加社会隔离的方法复制愤怒、郁怒情绪反应大鼠模型,以旷场实验和攻击行为测试评价模型,并应用调肝方药经前平、经前舒颗粒进行药物干预。造模后,将各组大鼠断头处死,分离顶区皮质、额区皮质、下丘脑和海马四个脑区。采用PCR基因扩增技术和蛋白印迹技术（Western blot）分别检测大鼠顶区皮质、额区皮质、下丘脑和海马脑区5-HTR2C mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组大鼠相比,愤怒情绪模型组大鼠5-HTR2C mRNA和蛋白表达水平在额区皮质、海马脑区均极显著性增高（P<0.01）,在下丘脑脑区极显著性降低（P<0.01）。与愤怒模型组相比,经前平给药组大鼠5-HTR2C mRNA和蛋白表达水平在顶区皮质、额区皮质、海马脑区均极显著性降低（P<0.01）,在下丘脑脑区极显著性增高（P<0.01）。与正常组大鼠相比,郁怒情绪模型组大鼠5-HTR2C mRNA和蛋白表达水平在下丘脑脑区极显著性降低（P<0.01）,在海马脑区极显著性升高（P<0.01）,在额区皮质脑区无显著性改变。与郁怒模型组相比,经前舒给药组大鼠5-HTR2C mRNA和蛋白表达水平在海马脑区极显著性降低（P<0.01）,在额区皮质脑区无显著性改变。结论:大鼠不同脑区的5-HTR2C可能与大鼠愤怒、郁怒情绪密切相关,5-HTR2C表达变化可能是诱发大鼠愤怒、郁怒情绪的重要原因之一。调肝方药对愤怒、郁怒情绪大鼠不同脑区5-HTR2C有明显的调节作用,提示调肝方药对大鼠不同脑区5-HTR2C的调节作用可能是其干预大鼠愤怒、郁怒情绪的作用机制之一。

论文目录

• 提要
• Abstract
• 引言
• 材料与方法
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验试剂和药物
• 1.2.1 RT-PCR 试剂
• 1.2.2 Western blot试剂
• 1.2.3 实验药物
• 1.3 实验仪器
• 1.3.1 RT-PCR 仪器
• 1.3.2 Western blot仪器
• 1.4 实验溶液
• 1.4.1 存储液配制
• 1.4.2 使用液的配制
• 2 实验步骤及方法
• 2.1 动物模型制备
• 2.1.1 实验动物筛选
• 2.1.2 实验动物饲养
• 2.1.3 实验动物分组及给药方法
• 2.1.4 居住-入侵实验
• 2.1.5 造模结果评价及脑组织取材
• 2.2 5-HTR2C mRNA表达水平的检测
• 2.2.1 大鼠脑组织总RNA 的提取
• 2.2.2 RNA 反转录
• 2.2.3 PCR 扩增
• 2.2.4 琼脂糖凝胶电泳
• 2.2.5 检测分析
• 2.2.6 数据处理
• 2.3 5-HTR2C蛋白表达水平的检测
• 2.3.1 蛋白的提取
• 2.3.2 样品蛋白含量的测定
• 2.3.3 Western blot法检测5-HTR2C蛋白的表达
• 2.3.4 数据处理
• 结果
• 1 大鼠造模结果
• 1.1 攻击行为得分
• 1.1.1 混合攻击行为得分
• 1.1.2 攻击行为潜伏期
• 1.2 旷场实验得分
• 2 愤怒情绪模型大鼠不同脑区5-HTR2C mRNA表达水平检测结果
• 2.1 大鼠顶区皮质、额区皮质5-HTR2C mRNA表达及经前平干预
• 2.2 大鼠下丘脑、海马5-HTR2C mRNA表达及经前平干预
• 3 愤怒情绪模型大鼠不同脑区5-HTR2C蛋白表达水平检测结果
• 3.1 大鼠顶区皮质、额区皮质5-HTR2C蛋白表达及经前平干预
• 3.2 大鼠下丘脑、海马5-HTR2C蛋白表达及经前平干预
• 4 郁怒情绪模型大鼠不同脑区5-HTR2C mRNA表达水平检测结果
• 4.1 大鼠顶区皮质、额区皮质5-HTR2C mRNA表达及经前舒干预
• 4.2 大鼠下丘脑、海马5-HTR2C mRNA表达及经前舒干预
• 5 郁怒情绪模型大鼠不同脑区5-HTR2C蛋白表达水平检测结果
• 5.1 大鼠顶区皮质、额区皮质5-HTR2C蛋白表达及经前舒干预
• 5.2 大鼠下丘脑、海马5-HTR2C蛋白表达及经前舒干预
• 讨论
• 1 怒与肝脏的关系
• 1.1 中医对怒与肝脏的认识
• 1.2 现代医学对怒的认识
• 2 不同脑区与愤怒、郁怒情绪的相关性
• 2.1 大脑皮层与情绪的相关性
• 2.2 下丘脑与情绪的相关性
• 2.3 海马与情绪的相关性
• 3 5-HTR2C 与愤怒、郁怒情绪的关系
• 3.1 5-HTR2C
• 3.2 5-HTR2C 与愤怒、郁怒情绪相关性
• 4 调肝方药与愤怒、郁怒情绪的关系
• 4.1 经前平颗粒与愤怒情绪的关系
• 4.2 经前舒颗粒与郁怒情绪的关系
• 5 问题与展望
• 结语
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 附录
• 缩写词表
• 致谢
• 论文著作
• 详细摘要