论文摘要
叶酸（F）又名维生素B11，它可还原为四氢叶酸，后者是一碳单位转移酶的辅酶，参与一碳单位代谢和嘌呤、胸腺嘧啶的从头合成。鉴于叶酸受体在正常组织中的表达高度保守，而在大部分恶性肿瘤组织中的高度表达，利用F作为载体进行肿瘤靶向治疗受到人们的关注。目的：验证叶酸的亲肿瘤特性，合成以葡聚糖（DEX）为载体的叶酸-吡柔比星（THP）靶向药物，在体外及动物体内了解其抗肿瘤活性，探讨叶酸受体介导的肿瘤药物对表面高表达叶酸受体的SGC-7901细胞株是否具有一定的靶向性。方法：1．应用过碘酸钠（NaIO4）引发的氧化反应，DEX被氧化产生多醛，F及THP的游离功能氨基通过雪夫式碱（Schiff bases）结合到DEX的多醛基上，合成F-DEX-THP．为控制F-DEX-THP质量，建立了测定偶合物中F及THP的透析法—紫外分光光度法，该方法能准确测定偶合物中F及THP的含量和偶合物的载药量。2．MTT法在体外检测THP、F-DEX-THP对人胃癌细胞株SGC-7901的4h生长抑制率及THP、F-DEX-THP、F-DEX-THP+F（1mmol／L）、F-DEX-THP+F（10mmol／L）对人胃癌细胞株SGC-7901的48h生长抑制率，并推算各自IC50。3．体内抑瘤试验采用动物移植性肿瘤试验法，用人胃癌SGC-7901细胞株接种于裸小鼠腹腔形成腹水瘤，考察THP、F-DEX-THP、F-DEX-THP+F（1mmol／L）给药后对腹水的体积变化，以相同体积生理盐水为阴性对照。结果：1．应用紫外分光光度法测定偶合物中F及THP的含量和偶合物的载药量，分别选定250nm、363nm为检测波长，制定标准曲线A=0.0313C-0.0212，r2=0.9991、A=0.0397C+9E-05，r2=0.9999，用上述方法测得偶合物F-DEX-THP的载药量为3.1％。2．体外MTT法结果显示F-DEX-THP对人胃癌细胞株SGC-7901生长抑制作用呈现剂量效应关系，作用4h、48h其IC50均低于THP（P＜0.001）；作用48h组其IC50亦低于F-DEX-THP+F（1mmol／L）（P＜0.05），F-DEX-THP+F（1mmol／L）与F-DEX-THP+F（10mmol／L）的IC50间差别无显著性（P＞0.05）。3．体内抑瘤试验结果显示给药后F-DEX-THP组小鼠平均腹水量为2.24±0.18 ml，肿瘤抑制率为54.84％。给药后F-DEX-THP组小鼠腹水量少于其他三组（P＜0.001），THP组、F-DEX-THP+F（1mmol／L）组间小鼠腹水量差别有显著性（P＜0.001），且均少于生理盐水组（P＜0.001），两组肿瘤抑制率分别为48.99％、18.35％。结论：应用过碘酸钠（NaIO4）引发的氧化反应，DEX被氧化产生多醛，F及THP的游离功能氨基通过雪夫式碱（Schiff bases）结合到DEX的多醛基上，合成F-DEX-THP．F-DEX-THP在体内外对SGC-7901肿瘤细胞均显示具有一定的靶向性，且合成方法简单易于制备，为将药物导入肿瘤细胞内提供了一种较为实用的抗肿瘤药物靶向载体。下一步拟在此实验的基础上进一步考察F-DEX-THP在体内的药代动力学效应及临床前毒理学效应。