益气敛阴固脱法对内毒素所致感染性休克大鼠的作用及机制研究

论文摘要

目的:观察以益气敛阴固脱、凉血化瘀解毒立法的临床验方（升压宁）对内毒素（LPS）所致感染性休克大鼠的作用,并通过观察其对TNF-α、iNOS、ET-1的影响,探讨该方治疗感染性休克的作用机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为空白对照组、休克模型组、升压宁组、生脉组、小蓟组、阳性对照组6组。采用尾静脉注射LPS复制感染性休克动物模型,运用BL-420E+生物机能实验系统监测MAP的变化,在注射LPS后2h采集标本,观察肺、肝组织的病理形态变化,用免疫组化法检测TNF-α、iNOS、ET-1在大鼠肺组织和肝组织中的表达。结果:1.注射内毒素后,休克模型组平均动脉压进行性下降。经治疗后,各用药组的平均动脉压下降幅度减轻,以升压宁组下降幅度最低。2.肺、肝组织病理形态显示,休克模型组大鼠肺、肝组织均发生明显的炎性病理改变,甚至出现淤血;而各治疗组用药后,肺、肝组织病理损伤较休克模型组有不同程度的减轻;其中升压宁组和阳性对照组的病理损伤减轻明显。3.与空白对照组比较,休克模型组大鼠肺、肝组织中TNF-α的表达均显著升高（P＜0.01）;治疗后,与休克模型组比较,各治疗组肺、肝组织中TNF-α的表达均显著降低（P＜0.01）,其中升压宁组TNF-α的表达最低。4.与空白对照组比较,休克模型组大鼠肺、肝组织中iNOS的表达均显著增强（P＜0.01）;治疗后,与休克模型组比较,各治疗组肺、肝组织中iNOS的表达均显著降低（P＜0.01）,其中升压宁组的iNOS表达最低。5.与空白对照组比较,休克模型组大鼠肺、肝组织中ET-1的表达均显著增强（P＜0.01）;治疗后,与休克模型组比较,各治疗组肺、肝组织中ET-1的表达均显著降低（P＜0.01）,其中升压宁组ET-1的表达最低。结论:1.升压宁可减缓LPS所致感染性休克大鼠的进行性血压下降;2.升压宁可减轻LPS所致感染性休克大鼠的肺脏和肝脏病理损伤;3.升压宁可抑制炎症介质TNF-α在肺脏和肝脏中的表达;4.升压宁可抑制iNOS在肺脏和肝脏中的表达;5.升压宁可抑制ET-1在肺脏和肝脏中的表达。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 第一部分 理论探讨
• 1 感染性休克的中医理论探讨
• 1.1 从“厥脱”认识感染性休克
• 1.1.1 “厥”
• 1.1.2 “脱”
• 1.1.3 厥脱证
• 1.1.4 温病厥脱
• 1.1.4.1 温病之厥
• 1.1.4.2 温病之脱
• 1.1.4.3 从温病厥脱认识感染性休克
• 1.2 感染性休克的辨证论治
• 1.3 升压宁针对的病机与组方思路
• 1.3.1 升压宁针对的病机
• 1.3.2 升压宁的组方思路
• 1.3.2.1 以生脉散“益气敛阴固脱”
• 1.3.2.2 以小蓟“凉血解毒化瘀”
• 2 感染性休克的现代机理研究
• 2.1 病因学
• 2.1.1 病原菌
• 2.1.2 宿主因素
• 2.2 发病机制
• 2.2.1 微循环障碍学说
• 2.2.2 炎症失控学说
• 2.2.2.1 内毒素与感染性休克
• 2.2.2.2 TNF与感染性休克
• 2.2.2.3 NO/iNOS与感染性休克
• 2.2.2.4 ET与感染性休克
• 2.3 休克时肺脏和肝脏的功能和结构改变
• 2.3.1 肺脏
• 2.3.2 肝脏
• 第二部分 动物实验
• 3 实验材料
• 3.1 实验动物
• 3.2 主要药物及试剂
• 3.2.1 主要药物
• 3.2.2 主要试剂
• 3.3 主要仪器
• 4 实验方法
• 4.1 动物分组
• 4.2 动物模型制作
• 4.3 给药方法
• 4.4 标本采集及制备
• 4.5 检测指标及方法
• 4.5.1 动物的一般状态
• 4.5.2 平均动脉压检测
• 4.5.3 肺、肝组织的病理形态观察
• 4.5.3.1 肺组织的病理形态观察
• 4.5.3.2 肝组织的病理形态观察
• 4.5.4 免疫组化法观察TNF-α、iNOS、ET-1在肺组织和肝组织中的表达和分布
• 4.6 统计学方法
• 5 实验结果
• 5.1 动物一般状态比较
• 5.2 平均动脉压变化
• 5.3 肺、肝组织病理形态观察
• 5.3.1 肺组织病理形态观察
• 5.3.2 肝组织病理形态观察
• 5.4 肺、肝组织中TNF-α、iNOS、ET-1的检测结果
• 5.4.1 肺、肝组织中TNF-α的检测结果
• 5.4.2 肺、肝组织中iNOS的检测结果
• 5.4.3 肺、肝组织中ET-1的检测结果
• 6 讨论
• 6.1 对升压宁中选用红参的讨论
• 6.2 感染性休克动物模型的选择
• 6.3 升压宁有稳定内毒素所致感染性休克大鼠平均动脉压的作用
• 6.4 升压宁抑制TNF-α的过度表达
• 6.5 升压宁调节NO/ET的平衡
• 6.5.1 升压宁抑制iNOS的表达
• 6.5.2 升压宁抑制ET-1的合成释放
• 7 结论
• 8 问题与展望
• 8.1 药物剂型方面
• 8.2 血流变指标方面
• 8.3 升压宁对感染性休克时肠、肝、肺细胞因子及其网络调节研究展望
• 8.4 升压宁对肺动脉调节机制的研究展望
• 致谢
• 参考文献
• 附图
• 综述 生脉散对感染性休克的作用机制研究进展
• 附件1 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果