论文摘要
1目的探讨汉防己甲素对氟康唑抗白念珠菌的体外增效活性,并从转录水平探讨其分子机制。2方法以来源于同一亲本且对氟康唑敏感性不同的16株白念珠菌为研究对象,参照美国国家临床实验室标准委员会（CLSI）推荐的M27-A抗真菌药物敏感性实验方案及时间杀菌曲线法,评价非细胞毒性剂量的汉防己甲素对氟康唑抗白念珠菌酵相的体外增效活性;对其作用机制的研究采用RT-PCR方法,测定并比较汉防己甲素作用前后,药物外排泵基因MDR1、FLU1、CDR1、CDR2及靶酶基因ERG11的mRNA表达情况。3结果汉防己甲素对白念珠菌酵母相的最大非毒性剂量是30μg/mL,在该浓度时白念珠菌酵母相的存活率＞95%;氟康唑单独及其联合汉防己甲素（30μg/mL）时对16株白念珠菌酵母相的MIC范围分别为0.250～64μg/mL和0.125～16μg/mL;时间杀菌曲线结果显示,至药物24 h及48 h时,FCZ、FCZ+TET对白念珠菌均呈抑菌作用,但FCZ+TET组的活菌浓度均比单用等剂量的FCZ组降低了＞2 log10 CFU/mL,FCZ与TET间有明显的协同作用,经重复测量设计方差分析,差异有统计学意义（P=0.000）;汉防己甲素作用前,MDR1、FLU1、CDR1、CDR2的表达水平在氟康唑敏感/剂量依赖性敏感/耐药株间差异均有统计学意义（P＜0.05）,而ERG11在氟康唑敏感/剂量依赖性敏感/耐药株间差异无统计学意义（P＞0.05）;汉防己甲素作用24 h后与作用前相比,MDR1在氟康唑耐药株中、FLU1在氟康唑剂量依赖性敏感/耐药株中、CDR1和CDR2在氟康唑敏感/剂量依赖性敏感/耐药株中及ERG11在氟康唑敏感株中的表达水平差异均有统计学意义（P＜0.05）。4结论4.1汉防己甲素对氟康唑抗白念珠菌的增效活性具有时间依赖性,至药物作用24 h及48 h时,氟康唑与汉防己甲素间有明显的协同作用。4.2汉防己甲素在转录水平可抑制白念珠菌药物外排泵基因MDR1、FLU1、CDR1、CDR2的mRNA表达。4.3汉防己甲素在转录水平可抑制白念珠菌唑类药物作用靶酶基因ERG11的mRNA表达。