论文摘要
马冠状病毒病是由冠状病毒科的马冠状病毒（Equine coronavirus，ECV）引起的新生幼驹水样腹泻、发烧等症状的疾病，本研究参考Genbank发表的马冠状病毒（Equine Coronavirus，ECV）的核蛋白基因序列，设计合成一对针对马冠状病毒基因片段特异的引物，对马冠状病毒基因组进行RT-PCR扩增。PCR产物经琼脂糖电泳分析，获得一条约425bp的阳性条带。通过退火温度、延长温度及时间等条件的优化，建立了RT-PCR检测马冠状病毒的方法。利用所建立的方法，对近年来保存的幼驹腹泻病料进行马冠状病毒感染进行RT-PCR检测。检测结果发现，在所检测的30份样品中，有3份呈阳性反应，进一步验证了该方法在临床应用的可行性。将获得到的Autrailia-1株的PCR产物克隆到pGEM-T载体中，并测序，与Gene Bank中公布的马冠状病毒（AF251144）序列进行比对，同源性为98％，证明所得到的cDNA确为马冠状病毒DNA。
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