复合壳聚糖纳米微球PLGA/nHA缓释载体系统的制备及其对蛋白类药物缓释作用的实验研究

论文摘要

颌骨缺损可以由多种原因引起,如炎症,外伤,肿瘤等。但是如何对颌骨缺损进行有效的功能性修复是目前广泛关注而未能完全解决的问题。临床上常用的骨缺损修复重建手段主要有：自体骨移植、骨代用品植入、牵引成骨、骨诱导再生技术。近年来组织工程骨的研究一直是基础和临床医学研究的热点,如何解决构建较大体积的组织工程骨过程中的血管化问题成为了制约组织工程骨研究的瓶颈问题。本研究采用组织工程骨构建中“支架系统+细胞生长因子”的模式,将构建的“复合细胞生长因子的纳米缓释载体支架系统”植入动物模型骨缺损部位,以期诱导出符合生理功能和形态的骨组织。如何构建“复合细胞生长因子的纳米缓释载体系统”是本研究的关键步骤。目的：制备能够模拟生理状态下释放细胞生长因子的“复合细胞生长因子纳米缓释载体系统”。方法：以牛血清蛋白（BSA）为模型药物,以离子凝胶法制备壳聚糖微球（CMs）。将微球与纳米羟基磷灰石（nHA）和聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）按一定比例混合,以冰粒子为致孔剂,采用粒子沥虑-冷冻干燥复合工艺制备CMs/nHA/PLGA复合缓释支架。利用扫描电镜,透射电镜,压泵仪和力学性能测试仪检测复合支架的形态和性能,并考察其在体外对蛋白类药物释放规律。结果：所制备的壳聚糖纳米微球形态良好,呈规则球形或类球形,粒径分布在220-770nm,以380-650nm为多。微球对药物的载药量为39.2%,包封率为68.3%,两者均与BSA的初始量相关,载药量随BSA初始量的增加而增加,包封率则反之。复合支架呈白色多孔状,孔径为125-355μm,孔与孔之间联通良好,孔隙率达83.4%,压缩强度为1.4-2.1MPa,10周降解率为28.6%。PLGA/nHA支架对BSA的2天累积释放量为85%,而CMs和CMs/nHA/PLGA复合支架对BSA的9天累积释放量分别是为48.9%和35.7%。结论：本实验制作的CMs纳米微球和CMs/nHA/PLGA支架材料对BSA有良好的缓释作用,复合支架材料形态好,强度和降解速率复合构建组织工程骨的要求,可作为构建组织工程骨的生长因子载体和支架材料。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 主要设备和仪器
• 1.2 主要试剂
• 1.3 实验时间及地点
• 1.4 壳聚糖纳米微球的制备
• 1.5 CMs/nHA/PLGA复合支架的制备
• 1.6 产物检查
• 1.6.1 CMs和复合支架形态观察
• 1.6.2 微球粒度分析
• 1.6.3 微球载药量和包封率测定
• 1.6.4 支架机械强度测定
• 1.6.5 支架孔隙率测定
• 1.6.6 支架降解实验
• 1.6.7 蛋白体外释放试验
• 第二章 结果
• 2.1 微球形态的观察
• 2.2 支架的形态、空隙和强度
• 2.3 CS的包封率和载药率
• 2.4 微球、支架对BSA的缓释率和支架的降解速率
• 第三章 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 参考文献
• 攻读学位期间的研究成果
• 致谢