油松松针黄酮的分离提纯及其抗氧化活性研究

油松松针黄酮的分离提纯及其抗氧化活性研究

论文摘要

松树是松科,松属植物的统称,松针是松树类植物的主要副产物之一。现代研究表明,松叶具有镇静、抗炎、镇咳、抗氧化、减缓衰老、增强免疫力、抗疲劳、抗突变、降血脂、降血糖、抑菌等作用。本文以乙醇为提取剂从油松松针中提取松针黄酮类化合物,优化提取工艺,对其进行分离纯化,并对松针黄酮的抗氧化活性进行了研究。主要研究结果如下:(1)采用超声波辅助提取油松松针黄酮类化合物,通过单因素实验选取影响因素与水平,然后在单因素实验的基础上采用四因素三水平响应面分析法,根据回归分析确定最优提取工艺条件。结果表明最优提取工艺条件为:提取溶剂乙醇浓度55%,超声波功率为310W,提取温度52℃,料液比为1:42,提取时间30min,实际提取率达到3.66%。(2)选择四种大孔吸附树脂,比较其对油松松针黄酮的吸附率和解吸率,筛选出AB-8型大孔吸附树脂作为对油松松针黄酮进行纯化较为理想的树脂;最佳分离纯化工艺条件为:上样液初始质量浓度为0.50mg/mL,上样体积为50mL,以1.0mL/min的吸附流速上样,再用50mL 70%的乙醇溶液,以1.0 mL/min的洗脱速率进行洗脱。该工艺生产的松针黄酮纯度达到31.08%。(3)羟基自由基、超氧根阴离子、DPPH自由基的清除率随抗氧化剂浓度增加而上升,当抗氧化剂浓度达到一定范围时,清除率增幅减缓。(4)油松松针黄酮对羟基自由基、超氧根阴离子和DPPH自由基均有一定的抑制作用,但对羟基自由基和超氧根阴离子的清除效果低于同浓度的Vc。当抗氧化剂溶液质量浓度小于0.01mg/mL时,松针黄酮对DPPH自由基的清除能力大于Vc,而当抗氧化剂溶液质量浓度大于0.01mg/mL时,其对DPPH自由基的清除能力则小于Vc。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 目录
  • 1 引言
  • 1.1 松针
  • 1.2 黄酮类化合物
  • 1.2.1 黄酮类化合物的分布
  • 1.2.2 黄酮类化合物的分类
  • 1.2.3 黄酮类化合物的理化性质
  • 1.2.4 黄酮类化合物的生理活性
  • 1.2.5 黄酮类化合物的提取
  • 1.2.6 黄酮类化合物的分离纯化
  • 1.2.7 黄酮类化合物的定性定量检测
  • 1.3 本学位论文主要研究内容、技术路线和意义
  • 2 松针黄酮类化合物的提取及其含量测定研究
  • 2.1 实验材料和设备
  • 2.1.1 实验材料
  • 2.1.2 实验试剂
  • 2.1.3 仪器设备
  • 2.2 实验方法
  • 2.2.1 黄酮类化合物含量的测定
  • 2.2.2 超声波辅助提取松针黄酮类化合物的工艺优化
  • 2.3 结果与讨论
  • 2.3.1 标准曲线和线性回归方程
  • 2.3.2 松针黄酮类化合物提取单因素试验
  • 2.3.3 响应面分析法试验设计方案和回归模型的建立
  • 2.3.4 响应曲面分析与优化
  • 2.3.5 松针黄酮类化合物提取的优化与验证
  • 2.4 小结
  • 3 松针黄酮类化合物的分离纯化
  • 3.1 大孔吸附树脂概述
  • 3.1.1 大孔吸附树脂法的基本原理
  • 3.1.2 大孔吸附树脂的分类
  • 3.1.3 大孔吸附树脂的预处理及再生
  • 3.1.4 影响大孔吸附树脂柱分离效果的因素
  • 3.2 实验材料和设备
  • 3.2.1 实验材料
  • 3.2.2 实验试剂
  • 3.2.3 仪器设备
  • 3.3 实验方法
  • 3.3.1 大孔吸附树脂的筛选
  • 3.3.2 AB-8树脂对松针黄酮动态吸附试验
  • 3.3.3 AB-8树脂对松针黄酮富集能力研究
  • 3.4 结果与讨论
  • 3.4.1 大孔吸附树脂的筛选
  • 3.4.2 AB-8树脂吸附—解吸工艺条件的优化
  • 3.4.3 AB-8树脂的富集能力
  • 3.5 小结
  • 4 松针黄酮提取物的抗氧化活性研究
  • 4.1 实验材料与设备
  • 4.1.1 实验材料
  • 4.1.2 实验试剂
  • 4.1.3 仪器设备
  • 4.2 实验方法
  • 4.2.1 DPPH自由基清除率的测定
  • 4.2.2 羟基自由基清除率的测定
  • 4.2.3 超氧根阴离子清除率的测定
  • 4.2.4 与Vc的对照及协同作用
  • 4.3 结果与讨论
  • 4.3.1 DPPH自由基清除率的测定
  • 4.3.2 羟基自由基清除率的测定
  • 4.3.3 超氧根阴离子清除率的测定
  • 4.4 小结
  • 5 结论及展望
  • 5.1 结论
  • 5.2 展望
  • 参考文献
  • 作者简介
  • 导师简介
  • 致谢
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