毛细管电泳电化学发光在药物检测方面的应用研究

论文摘要

毛细管电泳（Capillary electrophoresis, CE）是在在施加电场的作用下,根据具有不同荷质比的带电物质在毛细管内的迁移速度的不同,从而实现样品中各组分分离的一种液相分离技术。它具有样品消耗少、分离效率高、分析时间短的特点,能够快速有效的对生物样品和药物进行分离,因而作为高效液相色谱的有益补充广泛地应用于日常分析。电化学发光（Electmchemiluminescence, ECL）分析是电化学手段与化学发光方法相互结合的一门技术。它保留了化学发光方法所具有的灵敏度高、线性范围宽和仪器简单等特点,而且还具有控制性强、选择性好、可进行原位发光分析等优点。ECL检测技术由于其所用的仪器便宜、灵敏度高而且操作简单,被认为是跟毛细管电泳联用的合宜检测手段。联吡啶钌（Ru（bpy）32+）体系是研究得比较成熟的电化学发光体系,它在水溶液和有机溶液中发光效率高、溶解度好,在电化学发光的基础理论和分析应用中占有重要的地位。在一定电压施加下,Ru（bpy）32+在工作电极表面能被氧化成Ru（bpy）33+,而后通过和叔胺官能团的辅助作用生成激发态的Ru（bpy）32+?,该激发态通过返回到基态可以释放出光子。基于以上技术,本文开展了以下几个方面的工作:1.提出了基于CE分离和柱后Ru（bpy）32+ ECL检测的一种简单、灵敏度高、选择性好的绿色方法用于氯喹（CQ）的检测分析和与其它药物的分离。该体系也被用于蛋白和药物的相互作用研究中,测定了CQ和人血清白蛋白（HSA）的结合位点数目和作用常数。2.把CE和末端Ru（bpy）32+ ECL检测器有机地结合起来,用于盐酸美沙酮的检测。将该CE-ECL方法进一步的用于美沙酮和人血清白蛋白的结合作用的研究之中,测得37°C时的结合位点数目和结合常数分别为25.8和5.8×10-3 M-1。3.将纳米金修饰的铂电极用作CE-ECL的工作电极,对盐酸地芬尼多进行了测定,该方法重现性好、灵敏度高,与采用裸铂电极作为工作电极所获得的结果相比,该方法在对地芬尼多的测定上具有更高的灵敏度和更宽的线性范围。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 毛细管电泳（capillary electrophoresis, CE）及其特点
• 1.1.1 毛细管电泳的原理
• 1.1.2 毛细管电泳的分离模式
• 1.1.3 毛细管电泳检测方式
• 1.1.4 毛细管电泳的应用
• 1.2 电化学发光（ECL）
• 1.2.1 ECL 的研究进展
• 1.2.2 ECL 的发光机理
• 1.2.3 常见的ECL 发光体系及其应用
• 1.2.4 CE-ECL 的应用
• 1.3 纳米粒子在 ECL 中的应用
• 1.4 本文构思
• 第2章 磷酸氯喹（CQ）的毛细管电泳电化学发光测定及其与人血清白蛋白作用的研究
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 试剂和仪器
• 2.2.2 标准浓度曲线的绘制
• 2.3 结果与讨论
• 3²⁺和 CQ 可能的反应机理'>2.3.1 循环伏安行为及Ru（bpy）₃²⁺和 CQ 可能的反应机理
• 2.3.2 电化学发光相关参数及其优化
• 2.3.3 对氯喹检测的分析应用及它与其它药物的分离
• 2.3.4 CQ 与HSA 的结合作用研究
• 2.4 本章小结
• 第3章 毛细管电泳柱后电化学发光技术联用测定美沙酮（MD）并研究其与人血清白蛋白的相互作用
• 3.1 前言
• 3.2 试剂和方法
• 3.2.1 化学试剂
• 3.2.2 仪器
• 3.2.3 样品配制
• 3.2.4 测定MD 和 HSA 的结合常数和结合位点
• 3.3 结果和讨论
• 3²⁺ 和 MD 的电化学行为'>3.3.1 Ru（bpy）₃²⁺ 和 MD 的电化学行为
• 3.3.2 分析条件的优化
• 3.3.3 CE-ECL 对 MD 的定量分析
• 3.3.4 干扰
• 3.3.5 与其它药物的分离
• 3.3.6 对MD 与HSA 相互作用的研究
• 3.4 本章小结
• 第4章 纳米金修饰铂电极用于毛细管电泳-电化学发光检测地芬尼多
• 4.1 前言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 实验药品
• 4.2.2 实验仪器
• 4.2.3 Pt/Nanogold（纳米金）修饰电极的制备
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 Pt/Nanogold 修饰电极的电化学行为
• 4.3.2 pH 值的优化
• 4.3.3 线性范围及检测限
• 4.3.4 稳定性及精密度
• 4.3.5 药片的测定
• 4.4 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录
• 致谢