论文摘要
本研究通过分析喉鳞癌组织中BNIP3蛋白的表达,以及BNIP3基因启动子区域的甲基化状态,探讨BNIP3基因与喉鳞癌发生发展的关系以及BNIP3基因对喉鳞癌细胞增殖的影响和可能机制。采用免疫组化方法分析BNIP3蛋白及其调节蛋白HIF在喉鳞癌组织中的表达及定位,比较其在正常喉粘膜、声带息肉和喉鳞癌前病变的中的表达情况。采用MTT法检测不同浓度的DNA甲基化去除剂5-氮杂脱氧胞苷对喉鳞癌Hep-2细胞增殖的影响,表明去除某些基因的甲基化可以抑制喉鳞癌Hep-2细胞增殖和BNIP3基因表达增强。进一步采用基因甲基化特异性PCR扩增的方法分析BNIP3基因启动子甲基化,发现5-氮杂脱氧胞苷能够消除BNIP3基因启动子上的甲基化状态。采用实时RT-PCR方法检测细胞内BNIP3mRNA水平,结果发现5-氮杂脱氧胞苷产生的去甲基化作用与BNIP3基因的转录增强一致。进一步研究喉鳞癌组织中BNIP3基因甲基化与肿瘤浸润、淋巴结转移等临床病理因素的相关性,结果是喉鳞癌组织中BNIP3基因甲基化与该基因的表达一致,说明BNIP3基因甲基化与肿瘤的分化程度、淋巴结转移有关。BNIP3基因可能成为预测喉鳞癌发生早期的重要指征,另外作为能促进肿瘤细胞凋亡的良性因素,它在一定程度上可以延缓肿瘤的进展。
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