Oct4、PLAP、VEGF、p53基因在睾丸精原细胞瘤中的表达及意义

论文摘要

目的:精原细胞瘤（seminoma）是一种起病隐匿、病情凶险的睾丸恶性肿瘤。它起源于原始生殖细胞,是睾丸最常见的恶性肿瘤,一旦发病,如不及时治疗,死亡率很高。因此早期发现和治疗是治愈精原细胞瘤的关键。与其他恶性肿瘤一样,精原细胞瘤的形成与发展是多步骤、多基因综合作用的结果。肿瘤发生学上认为,肿瘤的发生过程中的一个重要环节就是各类基因表达发生改变,即细胞内原癌基因的激活并过度表达以及抑癌基因的失活。因此,我们通过对Oct4、PLAP、VEGF、p53基因的研究,从分子水平上研究精原细胞瘤恶变过程中癌基因、抑癌基因表达的改变,从而为早期明确诊断精原细胞瘤和治疗精原细胞瘤提供分子生物学上的依据。方法:应用免疫组化SP法,检测Oct4、PLAP、VEGF、p53基因在38例精原细胞瘤中的表达,应用饱和酚-氯仿抽提11例石蜡组织DNA,应用PCR-SSCP法,检测p53在精原细胞瘤中的突变及缺失情况。结果:（1）Oct4在精原细胞瘤中的阳性表达率为100%,在正常睾丸组织中不表达;PLAP在精原细胞瘤中的阳性表达率为89.47%,在正常睾丸组织中同样不表达。同时根据显微镜下观察,Oct4表达的切片背景色非常低;而PLAP表达的许多切片上,背景色较重。（2）VEGF在精原细胞瘤临床分期Ⅰ期的阳性表达率为33.33%,Ⅱ期的阳性表达率为90.91%,Ⅲ期的阳性表达率为100%。Ⅰ期与Ⅱ期、Ⅰ期与Ⅲ期各组间比较有统计学差异（ p<0.01）,Ⅱ期与Ⅲ期之间比较无统计学差异（ p>0.05）;在10例正常睾丸组织中,2例弱阳性,8例阴性。p53在精原细胞瘤临床分期Ⅰ期的阳性表达率为93.33%,Ⅱ期与Ⅲ期的表达率分别为54.55%和50%。Ⅰ期与Ⅱ期、Ⅰ期与Ⅲ期两组间比较有统计学差异（ p<0.05）,Ⅱ期与Ⅲ期之间比较无统计学。差异（ p>0.05）;10例正常睾丸组织均阴性。（3）VEGF和p53基因在精原细胞瘤中的表达无相关性（r =0.183, p>0.05）。（4）p53在精原细胞瘤中存在突变,突变率为45.45%。结论:1、Oct4在精原细胞瘤中均呈阳性表达,是一个优秀的诊断精原细胞瘤的标记基因,与PLAP相比更加灵敏。2、随着精原细胞瘤的临床分期的进展,VEGF的阳性表达率越来越高,提示VEGF在精原细胞瘤的发生和发展中发挥着重要作用;p53在调控精原细胞瘤发展过程中,主要在临床分期的早期起重要作用;精原细胞瘤中,p53与VEGF不存在相关性。3、p53在精原细胞瘤的发生和发展过程中,存在着基因表达的异常。

论文目录

• 符号说明
• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一部分 比较Oct4 与PLAP 在精原细胞瘤中的表达及意义
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第二部分 VEGF 与p53 在精原细胞瘤中的表达及相关性分析
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第三部分 p53 在精原细胞瘤中表达的多态性研究
• 1 材料方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 读研期间完成论文
• 致谢