中草药醇提物抑菌活性筛选及其在青椒保鲜上的应用

论文摘要

果蔬农药残留是影响食品安全的重要因素之一。为减少化学杀菌剂的使用,探索果蔬采后病害防治新途径,寻找安全、高效植物源抗菌物质,本文以青椒采后4种常见病害致病菌（灰葡萄孢菌（Botrytis spp.）、链格孢菌（Alternaria spp.）、黑根霉菌（Rhizopus spp.）、疫霉菌（Phytophthora spp.））为供试菌,用菌丝生长法和孢子萌发法对21种中草药乙醇提取物进行了抑菌活性筛选及复配,并对青椒接种4种病原菌来测试复配物在青椒活体上的抗病效果,最后用复配提取物处理青椒,初步探索了其对青椒的保鲜效果,主要试验结果如下:1)丁香、五味子、高良姜、细辛、苦参对供试病菌的综合抑菌效果较好,在提取物浓度为0.02 g·ml-1时(根霉菌为0.005 g·ml-1),它们对3种以上的供试病菌菌丝生长抑制率在60%以上。其中丁香的抑菌活性最强,对4种供试病菌的抑制率均为100%。浓度为0.01 g·ml-1时,乌梅、丁香、五味子对链格孢菌、灰霉菌孢子萌发有较强抑制作用,抑制率均达到70%以上。2)对综合抑菌效果最好的植物—丁香进行了不同提取溶剂浓度试验,结果发现85%、95%的乙醇提取物抑菌效果较好,在浓度为0.005 g·ml-1时对四种供试病菌的抑菌率都为100%。进一步稀释提取物浓度为0.001 g·ml-1表明,95%的乙醇提取物抑菌能力要优于85%的提取物。3)考察了抑菌效果较好的丁香、高良姜、五味子等提取物浓度对其抑菌效果的影响,结果发现0.008 g·ml-1的浓度为敏感点,低于此浓度的植物提取物抑菌效果出现近似线性下降。4)将综合抑菌效果优良的中草药提取物进行了复配试验,在浓度为0.005 g·ml-1时,丁香与黄连、细辛、苦参、五味子、高良姜和五味子与高良姜的复配提取物有很强的抑菌效果,它们对4种供试病菌中至少3种的菌丝生长抑制率在60%以上。丁香与高良姜、丁香与乌梅、乌梅与高良姜的复配物对链格孢菌、灰霉菌菌的孢子萌发抑制效果较好,抑制率在80%以上。其中丁香与高良姜、丁香与乌梅的复配物分别对链格孢菌、灰霉菌的孢子萌发抑制效果达到极显著水平,抑制率分别为99.24%,96.67%。5)筛选出抑菌效果好的复配物应用在青椒活体接种上,发现丁香与高良姜、丁香与五味子、丁香与乌梅的复配物对青椒病害的防效较好。6)将活体接种效果好的提取物进一步复配得到DWUG（丁香、高良姜、五味子、乌梅按等质量比例混合的醇提物）复配物,考察其稳定性,发现持续时间、温度对DWUG药效稳定性影响较大,光照对其无明显影响,DWUG复配物的稳定性显著优于丁香单剂。7)用DWUG复配提取物处理青椒,可以显著地降低青椒在贮藏过程中的腐烂,降低青椒的呼吸强度,维持青椒较高的Vc含量,能够有效地延长青椒的贮藏时间。但是在贮藏过程中果实转红严重,叶绿素的含量也较低,其原因有待进一步研究。DWUG与壳聚糖复配涂膜青椒,可显著降低果实呼吸强度,还有缓解单独使用DWUG时青椒果实叶绿素分解过快的作用。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• 1 文献综述
• 1.1 化学农药使用现状及局限性
• 1.2 植物源杀菌剂的研究概况
• 1.2.1 抑菌植物资源筛选
• 1.2.2 植物源杀菌剂抗菌成分研究
• 1.2.3 植物源杀菌剂的作用机理
• 1.2.3.1 抑制孢子萌发和生长
• 1.2.3.2 破坏微生物细胞膜
• 1.2.3.3 影响能量代谢途
• 1.2.3.4 提高植物自身的抗性
• 1.2.4 植物抑菌有效成分的提取
• 1.2.5 复配植物源杀菌剂的研究进展
• 1.2.6 植物源杀菌剂在果蔬保鲜上应用研究
• 1.2.7 抗菌物质的检测方法
• 1.2.8 植物源杀菌剂研究存在的问题
• 1.2.8.1 扩大植物资源调查，建立杀菌植物资源数据库
• 1.2.8.2 植物资源抑菌、杀菌成分提取研究
• 1.2.8.3 确定各有效成分间构效关系、深入抗菌机理研究
• 1.2.8.4 进行植物源杀菌剂的助剂研究，开发植物源杀菌剂新剂型
• 1.2.9 植物源杀菌剂及其与壳聚糖复配保鲜果蔬应用研究
• 1.3 青椒生产与贮藏现状
• 1.3.1 青椒栽培现状及营养价值
• 1.3.2 河南省青椒的生产供应状况及存在问题
• 1.3.3 青椒采后主要病害
• 1.3.3.1 青椒果腐病
• 1.3.3.2 青椒根霉腐烂病
• 1.3.3.3 青椒灰霉病
• 1.3.3.4 青椒疫病
• 2 引言
• 3 材料与方法
• 3.1 供试材料与仪器
• 3.1.1 供试材料
• 3.1.1.1 供试中草药
• 3.1.1.2 供试青椒
• 3.1.1.3 供试菌种
• 3.1.2 主要仪器
• 3.2 试验处理与方法
• 3.2.1 中草药及其复配物离体抑菌活性测定
• 3.2.1.1 中草药提取母液制备
• 3.2.1.2 中草药及其复配物抑菌活性测定
• 3.2.1.3 菌丝生长法与孢子萌发法抑菌率计算
• 3.2.1.4 提取物浓度与抑菌活性关系
• 3.2.1.5 提取溶剂浓度与抑菌活性关系
• 3.2.1.6 中草药复配提取物抑菌活性测定
• 3.2.1.7 中草药复配提取物稳定性测定
• 3.2.2 中草药复配提取物对青椒病害的抗病效果
• 3.2.2.1 供试中草药复配物
• 3.3.2.2 供试病原菌孢子的获得
• 3.3.2.3 供试青椒处理
• 3.3.2.4 活体接种抗菌活性测定
• 3.3.2.5 青椒病情指数分级标准
• 3.3.2.6 发病率与防治效果计算
• 3.2.3 复配中草药提取物 DWUG 在青椒保鲜中的应用
• 3.2.3.1 处理方法
• 3.2.3.2 测定指标和方法
• 4 结果与分析
• 4.1 中草药醇提物抑菌活性测定
• 4.1.1 中草药醇提物对供试病菌菌丝生长抑制作用
• 4.1.2 中草药醇提物对供试病菌孢子萌发抑制作用
• 4.1.3 提取物使用浓度对抑菌效果的影响
• 4.1.4 中草药复配提取物对供试病菌抑制效果
• 4.1.4.1 复配提取物对供试病菌菌丝生长的抑制作用
• 4.1.4.2 复配提取物对供试病菌孢子萌发的抑制作用
• 4.1.5 不同提取溶剂浓度对中草药提取物抑菌活性的影响
• 4.1.6 中草药复配提取物稳定性测定
• 4.1.6.1 复配提取物药效持效性测定
• 4.1.6.2 温度对复配提取物抑菌活性影响
• 4.1.6.3 光照对复配提取物抑菌活性影响
• 4.1.7 小结
• 4.2 中草药复配提取物对青椒病害的抗病效果
• 4.2.1 复配提取物对青椒果实的保护作用
• 4.2.2 复配提取物对青椒果实的治疗作用
• 4.2.3 小结与讨论
• 4.3 中草药复配提取物 DWUG 处理对青椒的保鲜效果影响
• 4.3.1 对青椒呼吸强度的影响
• 4.3.2 对青椒叶绿素含量的影响
• 4.3.3 对青椒Vc 含量的影响
• 4.3.4 对青椒果实后熟转红的影响
• 4.3.5 对青椒腐烂的影响
• 4.4 小结
• 5 结论与讨论
• 5.1 结论
• 5.2 讨论
• 参考文献
• ABSTRACT