苓桂术甘汤合泽泻汤对豚鼠膜迷路积水模型小肠AQP8表达影响的研究

论文摘要

研究目的：本研究将梅尼埃病内耳膜迷路积水的现代病理改变与中医脾阳不足,痰饮内停,导致饮邪上泛,蒙蔽清阳的病机相联系,寻求痰饮与梅尼埃病的关联性,初步探索中医痰饮形成与小肠AQP8表达的相关性,为进一步提高中医药治疗该病的临床疗效提供一定的客观依据。研究方法：将60只健康成年豚鼠按随机数字表法分为3组,即积水治疗组、积水模型组、正常对照组。积水治疗组和积水模型组参考韩红蕾膜迷路积水造模方法,每日给予醋酸去氨加压素4μg／k/d,腹腔注射,共1周,建立梅尼埃病动物模型。积水治疗组用苓桂术甘汤合泽泻汤药液灌胃给药,每日1次,共1周。积水模型组和正常对照组自造模开始1周后,按等容积灌以生理盐水,每日1次,共1周。观察该方对豚鼠膜迷路积水及其小肠近端和远端绒毛上AQP8表达的影响。研究结果：积水模型组耳蜗Reissner膜较正常对照组向前庭阶方向不同程度膨隆,有显著性差异(P<0.01),符合梅尼埃病的病理特征。而经苓桂术甘汤合泽泻汤灌胃给药后,积水治疗组耳蜗Reissner膜向前庭阶方向膨隆程度较轻,有显著性差异(P<0.01),蜗管横截面积恢复正常,提示苓桂术甘汤合泽泻汤温阳健脾,利水化饮,良好地改善了膜迷路积水状况。积水模型组十二指肠和空肠绒毛上皮细胞平均灰度值明显高于各自正常对照组,有显著性差异(P<0.01)。与积水模型组相比,积水治疗组十二指肠绒毛上皮细胞平均灰度值降低,有统计学意义(P<0.05)；与积水模型组相比,积水治疗组空肠绒毛上皮细胞平均灰度值明显降低,有显著性差异(P<0.01)。提示通过苓桂术甘汤合泽泻汤温阳健脾,化饮利水,能有效增强梅尼埃病过程中十二指肠和空肠组织AQP8的表达,改善水液代谢失常,防止痰饮停聚,从而解除梅尼埃病内耳膜迷路积水出现眩晕、耳鸣、耳胀、呕恶的症状。结论：(1)通过苓桂术甘汤合泽泻汤温阳健脾,化饮利水,能有效改善豚鼠膜迷路积水模型内耳膜迷路积水程度。(2)苓桂术甘汤合泽泻汤增加了AQP8在小肠近端和远端——十二指肠和空肠绒毛上皮细胞胞浆内表达。从小肠绒毛AQP8的表达与痰饮的关系这一角度验证了苓桂术甘汤合泽泻汤对从痰饮论治梅尼埃病的可行性。(3)AQPs在人体组织、器官的广泛分布,是导致痰饮停留于身体各部的组织学基础之一；而AQPs分布、表达与调控的异常与中医痰饮形成相关。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 目录
• 英文缩略词
• 1.前言
• 2.实验研究
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 主要实验仪器及设备
• 2.1.3 实验药物
• 2.1.4 主要试剂
• 2.1.5 药液制备
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 实验分组
• 2.2.2 膜迷路积水模型的建立
• 2.2.3 给药方法
• 2.2.4 组织取材和切片制作
• 2.2.4.1 听泡取材
• 2.2.4.2 十二指肠和空肠组织取材
• 2.2.4.3 耳蜗、十二指肠和空肠HE切片制作
• 2.2.4.4 小肠免疫组织化学切片制作
• 2.2.5 观测内容
• 2.2.5.1 一般情况
• 2.2.5.2 光学显微镜观察耳蜗膜迷路的积水程度
• 2.2.5.3 光学显微镜观察十二指肠和空肠组织的病理形态学改变
• 2.2.5.4 光学显微镜结合图像分析软件观测十二指肠和空肠组织AQP8表达的强弱
• 2.2.6 统计方法
• 2.3 实验结果
• 2.3.1 一般情况观察
• 2.3.2 动物存活情况
• 2.3.3 耳蜗膜迷路积水程度统计结果
• 2.3.4 十二指肠和空肠组织病理形态学的变化
• 2.3.5 AQP8在十二指肠和空肠绒毛组织的表达统计结果
• 3.讨论
• 3.1 梅尼埃病与痰饮病的相关性探讨
• 3.2 AQPs与痰饮病的相关性探讨
• 3.3 梅尼埃病与肠道AQPs表达的相关性探讨
• 3.3.1 小肠在饮食物的消化、吸收过程中起着至关重要的作用
• 3.3.2 小肠亦参与水液代谢——生成、吸收、输布、调节津液
• 3.3.3 肠道AQPs表达与脾虚饮停于胃的相关性
• 3.4 苓桂术甘汤合泽泻汤治疗梅尼埃病的依据
• 3.5 豚鼠膜迷路积水模型耳蜗组织变化及苓桂术甘汤合泽泻汤的影响
• 3.6 豚鼠膜迷路积水模型十二指肠和空肠组织病理形态学的变化及苓桂术甘汤合泽泻汤的影响
• 3.7 AQP8在豚鼠膜迷路积水模型十二指肠和空肠绒毛的表达情况及苓桂术甘汤合泽泻汤的影响
• 3.8 结论
• 4.问题与展望
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果