两个新的蛋白质结构域的鉴定暨生长分化因子3功能的初步探讨

论文摘要

本论文分为2个部分，第一部分是蛋白质结构域的鉴定，第二部分是关于GDF3的初步功能分析以及外源重组表达的研究。在第一部分中，通过生物信息学的方法鉴定了两个新的结构域。NCD3G[GPCRs家族3中的9个半胱氨酸结构域]，是一个在GPCRs（G蛋白耦联受体）家族3中鉴定到的新蛋白质结构域。它存在于除γ-氨基丁酸转氨酶受体以外的所有GPCRs家族3的成员（包括亲代谢性谷氨酸盐受体，钙敏受体，信息素受体和味觉受体）蛋白中。序列分析显示NCD3G含有9个高度保守的半胱氨酸残基，形成4个β折叠和3对二硫键。通过同源模建，我们获得了NCD3G的结构模型，它显示该结构域包含两个重复的A1模体，并提示NCD3G很可能在GPCRs跨膜信号传导过程中起到非常重要的作用，而且它位于细胞膜外，可成为潜在的药物作用靶点。CARDP是我们在多种细菌、古生菌的表面蛋白、膜蛋白和分泌蛋白中发现的一种新的蛋白质结构域，它包含有多个高度保守的甘氨酸、亮氨酸、酸性氨基酸残基和酰胺残基，具有六个β折叠区。CARDP可能在细胞基质粘附和底物结合的过程中发挥着重要作用。在第二部分中，我们运用RT-PCR，原位杂交和免疫组化等技术分析了GDF3在正常组织，肿瘤细胞株及肝癌样本，以及3T3-L1分化过程中的表达情况。结果表明GDF3在大鼠海马组织的各区中表达有差异，在小脑的浦肯野氏细胞中有大量表达。对16例人的肝癌样本的检测表明，癌组织中GDF3表达有上调趋势，特别在大多数第三期癌症样本中GDF3高表达。对15种细胞株的检测表明，肿瘤细胞株中的GDF3表达明显增加。我们检测了前脂肪细胞的分化过程中GDF3的表达，结果显示GDF3在处于分化过程中的前脂肪细胞中高表达，在分化前的前脂肪细胞和分化完成后的脂肪细胞中没有表达，我们的结果提示了GDF3对于中枢神经系统、肿瘤和脂肪细胞分化可能有重要的作用，但其具体机制需进一步研究。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 两个新的蛋白质结构域的鉴定
• 前言
• 材料与方法
• 结果与讨论
• 参考文献
• 第二章 生长分化因子3功能的初步探讨
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 小结
• 综述
• 博士期间发表的论文和参与的编著及获奖情况
• 致谢