伴大豆球蛋白促双歧杆菌增殖肽的分离和鉴定及其对肠道细菌区系的影响

论文题目: 伴大豆球蛋白促双歧杆菌增殖肽的分离和鉴定及其对肠道细菌区系的影响

论文类型: 博士论文

论文专业: 基础兽医学

作者: 左伟勇

导师: 陈伟华

关键词: 伴大豆球蛋白,胃蛋白酶,双歧杆菌,免疫功能,细菌区系

文献来源: 南京农业大学

发表年度: 2005

论文摘要: 大豆种子中贮藏有丰富的蛋白质,其中绝大部分是球蛋白,主要包括大豆球蛋白（Glycinin）和伴大豆球蛋白（Conglycinin）。有研究表明,伴大豆球蛋白水解肽具有特殊的生理活性,能够降低血压,提高免疫力,抗氧化等作用。人和动物肠道内栖息着数量巨大的微生物群体,它们对宿主的健康具有深远的意义,其中双歧杆菌是肠道中重要的生理性细菌之一,具有益生、营养和免疫等功能,对维持肠道菌群的结构及功能起主导作用。本实验通过对伴大豆球蛋白的制备,并模拟机体内环境,通过胃蛋白酶水解伴大豆球蛋白,以研究其水解肽对双歧杆菌增殖的影响,为进一步阐明食物源蛋白活性肽的生理功能,提供实验依据。同时对伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解产物中促双歧杆菌增殖肽进行分离,所得到的活性组分应用质谱等方法进行鉴定。分离得到促双歧杆菌增殖肽后,又通过体内研究,了解伴大豆球蛋白促双歧杆菌肽对机体免疫功能及肠道细菌区系的影响,特别是对肠道双歧杆菌的影响。 1.伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽对双歧杆菌增殖的影响系列1伴大豆球蛋白的分离纯化及其胃蛋白酶水解肽的制备大豆粉脱脂后,经过等电点沉淀,硫酸铵分级盐析（51%和100%）得到伴大豆球蛋白粗提品,采用Sepharose-CL-6B柱进一步纯化,洗脱液为磷酸盐缓冲液（2.6mmol/L KH2PO4,32.5mmol/L K2HPO4,0.4mol/L NaCl,10mmol/L 2-ME,pH7.6）,流速30mL/h,于280nm处进行检测,收集各组分,采用SDS-PAGE电泳鉴定提取物,得到伴大豆球蛋白纯品,应用半微量凯氏定氮法测定其蛋白含量,冻干后备用。取伴大豆球蛋白冻干粉,双蒸水溶解后,调溶液pH值至1.4,按酶底物比1∶30加入胃蛋白酶,37℃水浴条件下水解2h后,在70℃,30min灭活酶并终止反应,同时调pH=7.0,在4℃,以3000rpm,离心20min,取上清液,用半微量凯氏定氮法测定胃酶水解液的含氮量冻干后备用,胃蛋白酶水解物水解度的测定采用茚三酮法。同时取伴大豆球蛋白,加入过量6mol/L盐酸,110℃,水解24h,制得伴大豆球蛋白盐酸彻底水解物。结果表明,经过分离纯化的伴大豆球蛋白纯度为90.13%,可供生理功能的研究,应用

论文目录:

中文摘要

英文摘要

引言

第一篇文献综述

第一章大豆蛋白质

1．大豆蛋白质的分类

2．大豆蛋白质的组分及其特性

3．大豆蛋白质的营养保健功能

第二章生物活性肽研究概述

1．生物活性肽的分类

2．生物活性肽的吸收机制

3．生物活性肽的制备方法

第三章食物蛋白源活性肽

1．动物蛋白源活性肽

2．植物蛋白源活性肽

第四章消化道免疫与微生物

1．消化道免疫系统

2．肠道微生物菌群

参考文献

第二篇实验研究

第一章伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽对双歧杆菌增殖的影响

系列一伴大豆球蛋白的分离纯化及其胃蛋白酶水解肽的制备

系列二伴大豆球蛋白水解液对双歧杆菌增殖的影响

第二章伴大豆球蛋白促双歧杆菌增殖肽分离和鉴定

系列一伴大豆球蛋白促双歧杆菌增殖肽分离和生物活性鉴定

系列二伴大豆球蛋白促双歧杆菌增殖肽肽谱鉴定

第三章伴大豆球蛋白酶解肽对小鼠免疫功能及肠道内环境的影响

系列一伴大豆球蛋白酶解肽对小鼠体重及免疫脏器生长的影响

系列二伴大豆球蛋白酶解肽对小鼠几种血清激素和细胞因子的影响

系列三伴大豆球蛋白酶解肽对小鼠肠道内环境的影响

第四章伴大豆球蛋白酶解肽对大鼠肠道细菌区系的影响

系列一伴大豆球蛋白酶解肽对大鼠肠道细菌区系变化的影响

系列二伴大豆球蛋白酶解肽对大鼠肠道双歧杆菌数量的影响

总体讨论

全文结论

致谢

附录

博士期间发表论文

发布时间: 2005-07-19

参考文献

[1].大豆蛋白的结构特征与营养价值的关系[D]. 龙国徽.吉林农业大学2015

伴大豆球蛋白促双歧杆菌增殖肽的分离和鉴定及其对肠道细菌区系的影响

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