论文摘要
葡萄风信子别名葡萄百合,为多年生草本球根花卉。其花期早,开放时间长,是良好的林下地被与园林花卉,且适于切花和与盆栽观赏。传统的育种方法时间长,效率低,且育成的品种花色单一。现栽培的葡萄风信子多为杂交种,以开紫色与白色为主,远不能满足人们对该花卉颜色多样性的需求。通过外源基因的转移可以提高育种效率并能得到具有目标性状的新品种。本研究主要将控制形成红花的Delila基因通过根癌农杆菌导入葡萄风信子体细胞中,以达到使白色品种的葡萄风信子开红色花的目的。本研究是在构建好的Delila基因基础上,以葡萄风信子“白葡萄”（Muscari botryoides Mill Album）为试验材料,建立起叶片和鳞茎离体再生体系以及遗传转化愈伤组织受体系统,利用农杆菌介导法进行金鱼草Delila基因转化研究,已获得转化的葡萄风信子Delila基因植株,为葡萄风信子遗传转化提供依据。主要研究结果如下:1.建立了葡萄风信子“白葡萄”叶片和鳞茎的再生体系以葡萄风信子“白葡萄”田间取材的叶片、鳞茎为外植体,通过不同植物激素种类组合和浓度配比诱导产生愈伤组织并且分化出不定芽。结果表明,叶片是葡萄风信子离体再生较合适的外植体类型。叶片和鳞茎在1-10号培养基中均能诱导出愈伤组织,但是诱导效果不同。以MS+2,4-D 0.6 mg/L+6-BA 0.1 mg/L诱导叶片形成愈伤组织效果较好,诱导频率可达100%;鳞茎诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+2,4-D 3.0 mg/L+6-BA 0.3 mg/L,诱导频率达91.2%;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,出芽频率可达97.4%;生根培养基为1/2 MS+IBA 1.0 mg/L+0.1% AC,根长势粗壮。2.建立了葡萄风信子“白葡萄”愈伤组织受体系统以葡萄风信子“白葡萄”再生形成的叶片为外植体,建立了愈伤组织受体系统,叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+2,4-D 0.6 mg/L+6-BA0.1 mg/L;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L;愈伤组织卡那霉素抗性质量浓度为60 mg/L;羧苄青霉素的抑菌浓度为300 mg/L。3.建立了根癌农杆菌介导的葡萄风信子遗传转化体系以愈伤组织受体系统作为遗传转化的受体系统进行试验,获得了葡萄风信子高效稳定的遗传转化体系。4.获得了葡萄风信子Delila基因转化植株对转化的卡那霉素抗性芽进行PCR检测,农杆菌EHA105介导遗传转化的64株抗性芽获得了1株阳性植株,转化率为1.56%。
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标签：葡萄风信子论文; 金鱼草基因论文; 愈伤组织受体系统论文; 根癌农杆菌论文; 遗传转化论文;