前列地尔脂微球载体制剂对脑死亡大鼠肝脏保护作用的实验研究

论文摘要

目的本课题使用大鼠脑死亡模型,探讨脑死亡大鼠肝脏的损伤机制,以及前列地尔脂微球载体制剂对大鼠脑死亡后肝脏损伤的保护作用。为临床利用脑死亡供体进行肝脏移植提供理论依据。方法健康清洁SD大鼠24只,雌雄不拘,体重220—280g,随机分为4组,每组6只,即脑死亡组（B）,应用颅内加压法建立脑死亡模型,通过呼吸、循环支持维持实验动物脑死亡状态6小时;假手术组（C）,除不进行硬脑膜外导管加压外,其余处理同脑死亡组;干预组（L1、L2）建立脑死亡模型,L1组泵入前列地尔脂微球载体制剂20ng·Kg-1·min-1,L2组泵入前列地尔脂微球载体制剂40ng·Kg-1·min-1。B组、L1和L2组于硬膜外加压前、加压过程中、脑死亡状态时记录平均动脉压;于硬膜外加压前（T1）,确认脑死亡时（T2）,脑死亡6h（T3）,于股静脉抽取血标本2ml,血清自动生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶（alanineaminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartatea minotransferase,AST）,放射免疫法测定血清内皮素-1（endothelin-1,ET-1）水平,ELISA法测定肿瘤坏死因子-α（tumomecrosis factor-α,TNF-α）水平。于脑死亡6小时取材,切取肝脏组织标本包埋固定,切片,HE染色观察肝细胞损伤情况。应用SPSS13.0软件包处理数据,统计数据用均数±标准差表示,多个样本间比较用单因素方差分析,显著性检验水准取a=0.05。结果1.平均动脉压（MAP）变化:颅内加压前,各组间MAP无显著性差异P＞0.05;加压过程中,B组、L1和L2组较C组明显增高,有显著性差异P＜0.05;但B组与L1、L2组间无显著性差异P＞0.05。脑死亡状态下B组、L1和L2组MAP较正常状态显著降低,但组间无显著性差异P＜0.05。2.ALT、AST、TNF-α、ET-1表达水平:在T1,T2,T3时间点,各试验组ALT、AST差异均有统计学意义,P＜0.05;在T3时间点,B组、L1和L2组与C组比较有明显差异P＜0.05,L1和L2组低于B组,差异有显著性P＜0.05,L2组与L1组无明显差异P＞0.05。3.肝脏形态学变化:C组各时间点光镜下肝细胞形态结构正常,染色均匀,未见肝细胞坏死、水肿;B组肝细胞染色较浅,胞浆松散,细胞体积增大,部分肝细胞出现较明显的水肿,空泡样改变;L1、L2组变化较小,基本形态结构正常,肝细胞轻度水肿,空泡样改变较B组减轻。结论1.应用改进的缓慢间断颅内加压法制作大鼠脑死亡模型,可以有效的模拟临床脑死亡状态。2.脑死亡状态可以引起脑死亡大鼠肝脏损伤性改变。大鼠脑死亡状态下血流动力血改变和炎症因子的释放可能是造成脑死亡大鼠供肝损伤的主要原因。3.脑死亡后血清中TNF-α、ET-1水平增高可能是导致肝脏损伤的主要原因之一。4.前列地尔脂微球载体制剂能明显减轻脑死亡状态下大鼠肝脏的损伤。可能与其保护肝窦内皮细胞,改善肝脏微循环,减少炎症因子释放有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 中英文缩写词简表
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 第三章 结果
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间主要的研究成果