杏鲍菇液体发酵多糖的提取及抗氧化研究

论文摘要

杏鲍菇[Pleurotus eryngii（DC.et Fr.）Qu（?）l.]又名刺芹侧耳,隶属于担子菌亚门（Basidiomycotina）,层菌纲（Hymenomycetes）,无隔担子菌亚纲（Homobasidiomycetidae）,伞菌目（Agaricales）,侧耳科（Pleurotaceae）,侧耳属（Pleurotus）。杏鲍菇菌肉肥厚,营养丰富,具有杏仁香味和鲍鱼味,故称杏仁鲍鱼菇。是一种品质优良的名贵珍稀食用菌,有较高的食用价值和药用价值,具有润肠、美容、抗肿瘤等作用,是联合国粮农组织向,世界各国推荐的食用菌新品。杏鲍菇营养成分丰富,其多糖含量在食用菌中位于前位。目前对杏鲍菇液体深层发酵菌丝体多糖抗氧化方面研究报道较少。因而液体深层发酵菌丝体多糖的提取及多糖药理功能试验研究对食品及药物开发具有指导意义。本试验针对杏鲍菇液体发酵多糖的抗氧化活性、液体发酵条件及菌丝体多糖的提取方法、提取条件、初步纯化方法做了较详细的试验研究,其主要内容如下:目前液体发酵技术因其周期短、成本低、产量大等优势被作为食用菌生产而应用且有工业化生产前景。本文的发酵培养试验结果证实:杏鲍菇菌丝体液体发酵适宜碳源为葡萄糖,氮源为蛋白胨。通过正交试验结果分析出最佳摇瓶培养条件:转速150r/min,温度26℃,装液量为100ml/250ml,起始pH值7.0,发酵时间为9d,按照以上条件培养得出杏鲍菇菌丝体的生物量14.30g/L。多糖提取的方法很多,本试验对四种提取多糖方法进行比较,得出粗多糖产率最高的提取方法为微波辅助提取法,比常规水提法的多糖提取率增加了5.9%,并且具有快速、溶剂用量少、提取率高、成本低、质量好等优点。通过单因素试验得到最佳提取工艺为:微波功率600w,微波照射时间3min,水浴温度80℃,水浴加热时间1h,乙醇终浓度为80%。在此条件下得出粗多糖提取率为15.7%,多糖含量为34.4%。多糖初步纯化采用Sevag法除蛋白,确定了除蛋白的最佳糖液与氯仿-正丁醇的体积比为5:1。通过测定蛋白含量,确定3次处理即可达到较好的效果。又经过脱色,透析等纯化过程,得到精制多糖,纯度为89.3%。本文对杏鲍菇多糖抗油脂氧化性能做了试验分析,并与姬松茸、灵芝、虫草、香菇等菌丝体多糖做了比较试验。得出结论:抗豆油氧化效果:杏鲍菇和姬松茸菌丝体多糖抗豆油氧化能力强于灵芝、香菇、虫草。抗猪油氧化效果:姬松茸菌丝体多糖强于杏鲍菇菌丝体多糖,其它三种多糖较低。虽然几种食用菌菌丝体多糖比对比组Vc的抗油脂氧化效果弱,但它们属于天然抗氧化产品并且具有较好抗氧化效果,这对食品及保健品的开发具有重要意义,这也是本试验的研究意义之一。自由基的研究多集中在活性氧自由基的研究上,超氧阴离子自由基(O2-·)和羟基自由基（OH·）是生物体内存在的主要活性氧自由基,活性氧自由基与生命现象的关系最为密切。因此,本试验选取测定OH·和O2-·的清除率两项指标来评价杏鲍菇多糖抗活性氧自由基的能力,并比较了以上几种食用菌菌丝体多糖的抗氧化性能。试验得出以下结果:杏鲍菇菌丝体精制多糖对活性氧自由基的清除作用均强于子实体多糖和菌丝体粗多糖。杏鲍菇菌丝体多糖和姬松茸菌丝体多糖的自由基清除能力均比灵芝菌丝体多糖、香菇菌丝体多糖、虫草菌丝体多糖强。通过各项指标结果显示杏鲍菇菌丝体多糖的抗氧化能力优于灵芝、虫草、香菇多糖,与姬松茸多糖抗氧化能力相当。最后对杏鲍菇复合多糖做了初步的试验研究,得出杏鲍菇-香菇和杏鲍菇-姬松茸复合抗氧化效果具有协同性。证实了复合多糖具有比单味多糖更好的抗氧化效果。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 杏鲍菇研究概况
• 1.1.1 杏鲍菇简述
• 1.1.2 杏鲍菇多糖生物活性研究
• 1.2 液体发酵技术概述
• 1.2.1 液体发酵技术优势
• 1.2.2 液体发酵食药用真菌的基本条件
• 1.3 食药用真菌多糖抗氧化概述
• 1.3.1 多糖简述
• 1.3.2 多糖提取纯化方法
• 1.3.3 多糖抗氧化作用机制
• 1.3.4 抗油脂氧化
• 1.3.5 食药用菌多糖抗氧化研究进展
• 1.3.6 复合多糖的研究进展
• 1.4 研究目的及意义
• 2 材料与方法
• 2.1 主要材料和试剂
• 2.1.1 供试材料
• 2.1.2 试剂
• 2.1.3 培养基
• 2.2 主要设备
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 杏鲍菇摇瓶发酵培养条件的确定
• 2.3.2 杏鲍菇菌丝体多糖提取条件的确定
• 2.3.3 多糖纯化方法
• 2.3.4 抗氧化活性测定
• 2.3.5 复合多糖抗氧化
• 3 结果与分析
• 3.1 摇瓶发酵条件的确定
• 3.1.1 不同碳源的影响
• 3.1.2 不同氮源的影响
• 3.1.3 发酵条件正交试验结果
• 3.1.4 发酵周期试验结果
• 3.2 多糖提取条件的确定
• 3.2.1 不同提取方法对粗多糖提取率的影响
• 3.2.2 单因素试验结果与分析
• 3.3 杏鲍菇菌丝体粗多糖初步纯化结果
• 3.3.1 Sevag法除蛋白单因素试验结果
• 3.4 抗氧化结果
• 3.4.1 几种多糖抗油脂氧化性能比较
• 3.4.2 清除羟基自由基试验结果
• 3.4.3 清除超氧阴离子的试验结果
• 3.4.4 复合多糖清除OH·结果
• 4 讨论
• 4.1 杏鲍菇液体发酵条件
• 4.2 多糖提取纯化条件
• 4.3 杏鲍菇抗氧化结果讨论
• 4.4 后续工作
• 5 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历