盐敏感性高血压大鼠eNOS、iNOS表达与心、肾细胞凋亡的关系

论文摘要

实验目的对感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠的心肌、肾脏组织中的eNOS、iNOS在mRNA和蛋白水平的表达进行检测,分析eNOS的表达与盐敏感性高血压发生的关系,以及iNOS的表达与心肌、肾脏细胞凋亡的关系,探讨盐敏感性高血压形成和心肌、肾脏细胞损害产生的机制。实验方法Wistar大鼠,雄性,初生体重6-7g。将幼鼠分为2大组:第一组:新生Wistar大鼠在第1d和第2d分别皮下注射辣椒辣素50mg/kg;第二组:对照组新生大鼠皮下注射同容积的含10%乙醇和10%吐温80的生理盐水。哺乳期（三周龄）后,将每一大组再分为2组,共4个组（每组7只）进行四周饲喂正常或高盐饲料的处理:①对照组+正常（含0.5%NaCl）饲料（CON-NS）②对照组+高盐（含4%NaCl）饲料（CON-HS）③辣椒辣素+正常（含0.5%NaCl）饲料（CAP-NS）④辣椒辣素+高盐（含4%NaCl）饲料（CAP-HS）。分组后每周测量大鼠血压、称重。苏木素—伊红染色观察大鼠组织病理学改变;分光光度法检测心肾组织iNOS活性、NO含量;免疫组织化学方法检测肾脏、心肌eNOS、iNOS蛋白表达;RT-PCR检测大鼠肾脏、心肌eNOS、iNOS mRNA的表达。单细胞凝胶电泳检测心肌、肾脏细胞凋亡。实验结果在再次分组后的第4周时,CAP-NS、CAP-HS、CON-HS三个组与CON-NS组比较,体重无显著性差异（P>0.05）。在第2、3、4周时,CAP-HS组鼠尾收缩压与CON-NS组相比差异显著,有统计学意义（P<0.05）。苏木素—伊红染色光学显微镜下观察可见CON-NS组表现正常,肾小球结构完整,分布均匀。CAP-HS组肾脏肾小管扩张,有明显增多的出血点,肾小球毛细血管基底膜增厚。CON-NS组心肌组织表现正常,心肌细胞排列整齐,细胞核排列整齐,大小均一。CAP-HS组心肌细胞排列紊乱、细胞间隙明显增大,细胞核排列不整齐。分光光度法结果显示,CAP-HS组大鼠心肌、肾脏iNOS水平升高,与CON-NS组相比差别显著,有统计学意义（P<0.05）。CAP-HS组大鼠心肌、肾脏NO水平明显升高,与CON-NS组相比差别有统计学意义（P<0.01）。免疫组织化学结果显示,大鼠肾脏组织中,eNOS蛋白表达主要分布于肾小管内皮细胞CAP-HS组eNOS蛋白表达显著减少,与CON-NS组比较差别有统计学意义（P<0.01）。在心肌组织中,CAP-HS组eNOS蛋白表达减少,与CON-NS组比较差别有统计学意义（P<0.05）。大鼠心肌、肾脏组织中, CAP-HS组iNOS蛋白表达显著增高,与CON-NS组比较差别有统计学意义（P<0.01）。RT-PCR结果显示,大鼠心肌组织CAP-HS组iNOSmRNA表达增高,和CON-NS组比较差异有统计学意义（P<0.01）。在肾脏组织中,CAP-HS组iNOS mRNA表达增高,与CON-NS组比较差异有统计学意义（P<0.05）。大鼠心肌组织CAP-HS组eNOS mRNA表达减少,和CON-NS组比较差异有统计学意义（P<0.01）。在肾脏组织中,CAP-HS组eNOS mRNA表达减少,与CON-NS组比较差异有统计学意义（P<0.05）。单细胞凝胶电泳检测结果显示,在心肌组织中,CAP-HS组凋亡细胞数增高,与CON-NS组比较差别显著,有统计学意义（P<0.05）。大鼠肾脏组织中,CAP-HS组凋亡细胞显著增高,与CON-NS组比较有显著差别,有统计学意义（P<0.01）。结论成功复制感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠模型,CAP-HS组大鼠血压升高,eNOS mRNA和蛋白的低表达与感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠形成相关。iNOS mRNA和蛋白的高表达及iNOS活性升高可以使心肌和肾脏组织局部产生大量NO。NO可以使感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠靶器官心肌和肾脏细胞凋亡增加从而加重心肌和肾脏的损伤。

论文目录

• 英文缩略词
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 展望
• 参考文献
• 实验附图
• 综述
• 参考文献
• 个人简介
• 致谢