论文摘要
目的：评价定向中波高能紫外线（以下简称TH-UVB）与窄谱中波紫外线（NB-UVB）治疗白癜风的疗效与安全性。方法：采用自身对照的方法,对33名白癜风患者进行观察。取白癜风患者自身对称或相邻的皮损为靶皮损,随机选择试验侧和对照侧分别使用TH-UVB或NB-UVB进行照射。试验侧治疗前测定最小红斑量（MED）,初次照射选用2倍MED,根据前次治疗反应决定下一次剂量。如前次治疗后未出现清晰红斑,下次剂量增加10%；出现持续清晰可见的红斑后,每次维持原有剂量；如出现疼痛或水疱等,则暂停治疗,症状消退后下次照射剂量减少10%。对照侧初次剂量一般为70%的平均MED,根据前次治疗反应决定下一次剂量。如前次治疗后局部无红斑或红斑持续时间<24h,下次剂量增加10%；红斑持续24～72h,维持原照射剂量不变；如红斑超过72h或出现水疱,则暂停治疗,症状消退后下次照射剂量减少10%。每周治疗2次,共治疗12周。治疗前及治疗后每周拍照对比,记录患者皮损处色素再生面积与治疗前皮损面积的百分比,同时比较不同年龄、性别、发病年龄、病程、部位、临床类型的疗效。用SPSS统计软件分析数据,并记录不良反应。结果：3例患者未完成试验,最终纳入分析30例患者。其中男14例,女16例；年龄19～56岁,平均（34.3±8.9）岁。皮损位于面颈部5例,躯干部14例,四肢8例,手足3例。治疗12周后,试验侧有效率为56.7%,对照侧为20.0%,经卡方检验,差异有统计学意义（P<0.05）。试验侧开始色素再生的照射次数平均为（7.95±3.43）次。对照侧平均为（15.36±3.43）次,经配对样本t检验,差异有统计学意义（P<0.05）。经Logistic回归分析各临床特征与临床疗效的相关性,显示疗效与患者发病部位、临床类型、年龄、性别、发病年龄、病程等均无相关性（P均>0.05）。试验侧不良反应发生率较对照侧高（P<0.05）,但均轻微且不影响治疗。结论：TH-UVB与NB-UVB相比治疗白癜风疗效更好、起效更快,且安全性均较好。目的：探讨不同剂量TH-UVB与NB-UVB照射对豚鼠皮肤色素沉着及表达α-黑素细胞刺激素（α-MSH）、内皮素-1（ET-1）的影响。方法：以正常棕黄色豚鼠为实验模型,在其背部取五块相离的区域分为TH-UVB高、低剂量组、NB-UVB高、低剂量组及空白对照组进行照射。TH-UVB高、低剂量组起始剂量分别为270、90mJ/cm2,照射后发生持续24h以上红斑即每次维持原有剂量,如果初次治疗后未发生红斑,则下次剂量增加10%,发生红斑但24h内消退者下次增加5%,如出现水疱、脱屑等,暂停治疗至症状缓解,下次照射剂量减少10%。NB-UVB高、低剂量组起始剂量分别为200、100 mJ/cm2,每次剂量增加20%,出现轻微红斑则增加10%,出现清晰红斑暂停一次治疗,出现水疱、疼痛等,则暂停治疗,症状消退后下次照射剂量减少10%。每周照射2次,共照射8周。空白对照组不予处理。每2周对实验区域进行拍摄,并按时记录豚鼠皮肤色素沉着情况。全部实验结束后处死动物。分别取空白对照组与各实验组照射区域皮肤组织,采用肉眼评估及黑素颗粒染色（Fontana-Masson法）研究其致色素沉着作用；通过免疫组化法和逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR法）检测豚鼠皮肤中的a-MSH、ET-1蛋白及mRNA表达情况。结果：部分豚鼠皮肤照射后出现脱屑等不良反应,减少剂量或暂停照射即可缓解。各照射组均在照射1周后出现色素沉着,TH-UVB组较为均匀、清晰,NB-UVB组仅见散在色沉斑片。空白对照组未见明显变化。随着照射时间和累积剂量的增加,各组色素逐渐加深,分布逐渐均匀。各组的色素沉着评分、黑素颗粒含量差异均有统计学意义（P均<0.05）,TH-UVB高、低剂量组之间差异无统计学意义（P>0.05）,但均高于NB-UVB组（P<0.05）,且NB-UVB高剂量组高于低剂量组（P<0.05）；各组的α-MSH免疫组化计分差异有统计学意义（P<0.05）,TH-UVB组高于NB-UVB组（P<0.05）,但每种光源不同剂量组之间差异无统计学意义（P>0.05）；各组的a-MSH mRNA表达水平差异有统计学意义（P<0.05）TH-UVB高、低剂量组之间以及NB-UVB低剂量组与空白对照组之间差异无统计学意义（P>0.05）,余两两比较差异均有统计学意义（P均<0.05）；各组的ET-1免疫组化结果差异有统计学意义（P<0.05）, NB-UVB高、低剂量组之间差异无统计学意义（P>0.05）,其余各组两两比较,差异均有统计学意义（P均<0.05）；各组的ET-1mRNA表达水平差异有统计学意义（P<0.05）,NB-UVB高、低剂量组之间差异无统计学意义（P>0.05）,其余各组两两比较,差异均有统计学意义（P均<0.05）结论：TH-UVB在致豚鼠皮肤色素沉着作用上优于NB-UVB;该两种光源均可促进豚鼠表皮中α-MSH和ET-1蛋白及mRNA水平的表达,且TH-UVB作用更为显著。目的：1.探讨不同剂量TH-UVB照射对人角质形成细胞株（HaCaT细胞）a-MSH、ET-1蛋白水平及（?）nRNA水平的影响,并与NB-UVB进行比较,探讨两种光源的差别；2.探讨300mJ/cm2 TH-UVB照射后不同时间点HaCaT细胞a-MSH、ET-1蛋白水平与（?）nRNA水平的变化。方法：常规培养HaCaT细胞,6孔培养板中每孔接种106个细胞。当细胞生长至80%融合时进行照射,细胞与光源间的照射距离为15cm。实验设立两组：剂量组分别用0、100、200、300、400、500 mJ/cm2的TH-UVB和NB-UVB照射HaCaT细胞,24h后收集上清液及细胞。ELISA方法测定培养上清液中a-MSH、ET-1分泌量,RT-PCR法测定细胞a-MSH、ET-1mRNA的表达量。时间组用300 mJ/cm2TH-UVB照射HaCaT细胞,分别在0、6、12、24、48、72h后用ELISA方法测定上清液中a-MSH、ET-1分泌量,RT-PCR法测定细胞a-MSH、ET-1mRNA的表达量。每组实验重复3次。结果：不同剂量的TH-UVB和NB-UVB都可以促进HaCaT细胞α-MSH的表达、分泌。TH-UVB在剂量为300～400mJ/cm2时,上清液中α-MSH浓度最高,明显高于100～200mJ/cm2组（P均<0.05）；细胞a-MSH mRNA表达量亦最大,在0～300mJ/cm2范围内随照射剂量增加而增加。400mJ/cm2时,培养细胞出现明显皱缩、圆化,悬浮,α-MSH表达、分泌水平下降,剂量增至500mJ/cm2时更为显著。NB-UVB在剂量为500mJ/cm2时α-MSH浓度最高,细胞a-MSH mRNA表达量亦最大,200～300mJ/cm2范围内无差别（P均>0.05）。两种光源同一剂量对比,TH-UVB 100-400mJ/cm2照射后HaCaT细胞的α-MSH分泌量均高于同剂量NB-UVB组（P均<0.05）,500mJ/cm2组没有差别（P>0.05）；200～400mJ/cm2照射后细胞a-MSH mRNA表达量均高于同剂量NB-UVB组（P均<0.05）,而100、500mJ/cm2照射后没有差别（P均>0.05）。TH-UVB在200～500mJ/cm2剂量照射后,上清液中ET-1浓度均高于未照射组（P均<0.05）,但该照射梯度内ET-1分泌量无差异（P均>0.05）。分子水平上200mJ/cm2剂量时ET-1 mRNA表达开始增高,300mJ/cm2时达到高峰,400mJ/cm2时开始下降,500mJ/cm2时与未照射组无差异（P>0.05）NB-UVB 100～500mJ/cm2照射后上清液中ET-1浓度均高于未照射组（P均<0.05）,在该照射梯度内ET-1分泌量无差异（P均>0.05）。但分子水平上200-500mJ/cm2时ET-1 mRNA表达量高于未照射组且在该照射梯度内呈剂量依赖（P均<0.05）,照射剂量达500mJ/cm2时ET-1 mRNA表达量最高。两种光源同一剂量比较,TH-UVB500mJ/cm2照射后上清液中的ET-1浓度高于同剂量NB-UVB组（P<0.05）,100-400mJ/cm2照射后没有差别（P均>0.05）；200～500mJ/cm2照射后细胞ET-1mRNA表达量均高于同剂量NB-UVB组（P均<0.05）,100mJ/cm2照射后没有差别（P>0.05）300 mJ/cm2 TH-UVB照射后6h HaCaT细胞上清液中α-MSH浓度开始增高,24h达到高峰并维持在这一水平至72h；细胞α-MSH mRNA表达量也于6h开始增高,24h达到高峰,持续至48h,72h开始下降。300 mJ/cm2 TH-UVB照射后6h上清液ET-1浓度及细胞中ET-1 mRNA表达量均开始增高,并于48h达到高峰,72h开始下降。结论：1.不同剂量的TH-UVB和NB-UVB都可以促进HaCaT细胞α-MSH和ET-1蛋白及（?）nRNA水平的表达,该效应每种光源各自在一定范围内呈剂量依赖性,且TH-UVB效力更强。2.300 mJ/cm2 TH-UVB照射对HaCaT细胞α-MSH和ET-1蛋白及（?）nRNA水平的促进作用在48～72h时最为明显。
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