已酮可可碱对体外培养的眶成纤维细胞增殖和透明质酸合成的影响

论文摘要

目的: 体外培养人眼眶成纤维细胞,以培养的眶成纤维细胞为研究对象,观察己酮可可碱(PTX)对眶成纤维细胞增殖及分泌透明质酸(HA)的作用。 方法: 1.组织块法培养人眶成纤维细胞,观察细胞的生长状况及特性、HE染色了解其形态学特点,免疫组化染色鉴定细胞来源。 2.将培养的细胞以1×10~3/孔接种于细胞培养板中,10%胎牛血清的培养液培养48h,无血清培养液培养24h后,随机分组,设空白对照组及不同浓度(0.001、0.01、0.1、0.5、1mg/ml)PTX组,每组6个复孔。分别作用24、48、72小时后,观察细胞形态的变化,应用MTT比色法、放射免疫分析法观察不同浓度PTX对眶成纤维细胞增殖及分泌透明质酸的作用。 结果: 1.体外培养的眶成纤维细胞生长良好,传代稳定。细胞呈梭形或星形,免疫组化鉴定波形蛋白阳性。 2.不同浓度(0.001～1mg/ml)的PTX作用于眶成纤维细胞24、48、72小时,均可不同程度地抑制细胞的增殖。其中高浓度组(0.1、0.5、1mg/ml)作用各时间点对细胞的抑制作用与对照组比较,差异均有显著性(P<0.05)。作用时间达72小时,各浓度药物对细胞的抑制作用与对照组比较,都有显著的差异性(P<0.05),抑制率分别为8.03%、19.31%、42.60%、63.01%、72.7%。同一浓度的药物随着作用时间的延长,抑制作用逐渐加强。而同一作用时间点,随着药物浓度的增加抑制率也增大。 3.PTX在较低浓度(0.001、0.01mg/ml)作用于眶成纤维细胞24小时

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