断奶仔猪胃肠道Ghrelin表达及其对胃功能的调节

论文摘要

生长素（Ghrelin）是主要由胃粘膜分泌的一种脑肠肽，参与许多生理功能的调节，但Ghrelin对胃酸分泌的作用目前仍然存在争议。新生仔猪断奶前后胃酸分泌不足是导致腹泻的主要原因之一。Ghrelin是否参与断奶前后仔猪胃酸分泌功能发育的调节?调节途径如何?体外构建的Ghrelin重组表达质粒是否可在体内表达，并发挥生物学功能?为回答以上这些问题，本研究以断奶前后的仔猪为动物模型，通过体内和体外两方面来研究Ghrelin对断奶前后仔猪胃酸分泌的调节，并在此基础上，以断奶小鼠为动物模型，肌肉注射体外构建的重组表达质粒pcDNA3-Ghrelin，检测Ghrelin在肌肉中的表达和其对动物生长、胃生长和胃功能发育的影响，并探索相关机制。 1 断奶仔猪胃肠道Ghrelin表达与胃功能发育的关系一体内研究 本实验旨在揭示断奶前后仔猪胃肠道粘膜Ghrelin mRNA表达的时间和空间特异性，探讨其与胃功能发育之间的关系，并通过日粮添加半胱胺耗竭内源性生长抑素，观察伴随胃肠道功能的改变胃肠道粘膜Ghrelin mRNA表达的变化，从而分析Ghrelin在调节断奶前后仔猪胃肠道生长和功能发育中的作用。 实验选取新生仔猪18窝，随机分为试验组和对照组。自12日龄起，对照组饲喂基础乳猪料，试验组在基础日粮中添加120mg／kg半胱胺，以耗竭内源性生长抑素。试验组和对照组均于35日龄断奶。分别在28、35、38、42和45日龄时从每组中各选取6头猪屠宰，称量胃重和体重，并采取胃粘膜和小肠黏膜（包括十二指肠和空肠）。采用RT-PCR方法，以18S rRNA作内标，定量分析胃底黏膜、十二指肠和空肠黏膜中Ghrelin mRNA的表达。结果显示：（1）仔猪胃的重量从28到45日龄呈逐渐升高趋势，38日龄以前胃的发育均较为缓慢，42日龄和45日龄期间胃的发育迅速增加，且此时胃的重量明显高于28、35和38日龄时胃的重量。胃的相对重量也呈逐渐升高趋势，45日龄时胃相对重量明显高于28和35日龄时胃相对重量；（2）胃底Ghrelin mRNA的表达丰度明显高于胃窦部；（3）仔猪胃底Ghrelin mRNA表达在28～42日龄期间较为稳定，然后在45日龄时Ghrelin mRNA

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 本文部分缩写字母的中英文对照
• 引言
• 第一篇 文献综述
• 第一章 Ghrelin及其受体研究概述
• 1.Ghrelin的发现
• 2.Ghrelin及其受体的结构
• 3.Ghrelin及其受体的分布
• 4.Ghrelin的生物学功能
• 第二章 Ghrelin表达的时空特异性与胃肠道的发育
• 1.Ghrelin表达的时空特异性
• 2.仔猪胃肠道的生长和功能发育
• 3.胃的外分泌与内分泌功能及其调节网络
• 第三章 Ghrelin对胃功能的调节及其机制
• 1.Ghrelin对胃功能的调节
• 2.Ghrelin调节胃功能的可能机制
• 3.Ghrelin的应用前景
• 第二篇 实验研究
• 第一部分 体内研究
• 第一章 断奶前后仔猪胃肠道Ghrelin表达及其与胃肠道生长和功能发育的关系
• 1.材料与方法
• 2.结果与分析
• 3.讨论
• 4 小结
• 第二部分 体外研究
• 第二章 Ghrelin对断奶仔猪胃粘膜上皮细胞生长和功能发育的影响
• 1.材料与方法
• 2.结果与分析
• 3.讨论
• 4 小结
• 第三部分 Ghrelin重组表达质粒的构建、表达及其生物学作用
• 第三章 Ghrelin的扩增、克隆和序列测定
• 1.材料与方法
• 2.结果与分析
• 3.讨论
• 4小结
• 第四章 重组质粒pcDNA3-Ghrelin对小鼠生长和胃功能发育的影响
• 1.材料与方法
• 2.结果与分析
• 3.讨论
• 4小结
• 总体讨论
• 全文结论
• 参考文献
• 致谢
• 附录（攻读博士期间发表的论文）