川乌、草乌炮制工艺及指纹图谱的研究

川乌、草乌炮制工艺及指纹图谱的研究

论文摘要

川乌、草乌是我国广泛使用的毒性药材,两者药效相似,中医认为其具有祛风除湿、温经止痛的功效。现代药理研究表明,川乌、草乌均具有抗炎、镇痛、心血管系统、免疫系统、抗癌、降血糖等作用。该类中药毒性剧烈,一般都要经过炮制后才能入药,目前川乌、草乌炮制工艺繁多,造成了市场上制川乌、制草乌的质量参差不齐,影响了临床用药的安全性与有效性。本实验对川乌、草乌进行了以下方面的研究:1川乌、草乌及其炮制品指标性成分的含量测定实验建立了川乌、草乌及其炮制品中指标性成分含量测定方法,采用HPLC法同时测定不同产地川乌、草乌及其炮制品中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的含量,采用紫外分光光度法测定川乌、草乌及其炮制品中总生物碱和酯型生物碱的含量。结果表明,不同产地川乌、草乌及其炮制品中6种生物碱含量、总生物碱、酯型生物碱的含量差异较大,应建立一套科学合理的质量控制方法来保证其质量。2川乌、草乌炮制工艺的研究实验采用HPLC色谱法测定川乌、草乌不同炮制品中6种生物碱的含量,采用紫外分光光度法测定其总生物碱的含量,并以其含量为指标,对川乌、草乌的软化方式、高压蒸制工艺、高温烘制工艺、微波炮制工艺进行了考察,与2010年版《中国药典》一部收录的炮制方法进行比较,综合评价其炮制工艺。实验结果提示,最佳高压蒸制工艺为:川乌、草乌经润湿法处理后,于1.5 kg·cm-2压力下炮制150min,即得;最佳高温烘制工艺为:川乌、草乌经润透法处理后,分别于110℃恒温烘制8h和10h,即得;最佳的微波炮制工艺为:川乌、草乌经润透法处理后,分别于60%的微波火力下炮制18-20 min和25 min;与药典收录的炮制法比较,以上3种炮制工艺均具有一定的优点及可行性,可作为川乌、草乌的炮制新工艺。3乌头属中药炮制原理的研究实验以新乌头碱、乌头碱、次乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱等6种生物碱对照品,进行恒温水解试验,并采用HPLC法测定其水解产物的含量,探索其水解规律,同时采用HPLC法测定川乌、草乌炮制前后主要成分含量的变化,探索其炮制原理。结果表明,双酯型生物碱在一定条件转化为单酯型生物碱,其过程中会产生一种中间产物,可能为焦乌头碱类生物碱。实验发现,乌头属生物碱的水解过程并不是简单的水解过程,其水解规律还有待进一步研究。4川乌、草乌及其炮制品指纹图谱的建立实验采用HPLC色谱法建立不同产地川乌、草乌指纹图谱,建立了川乌、草乌炮制品指纹图谱,并对其主要色谱峰进归属性鉴别,根据保留时间划分无酯型、单酯型、双酯型3个区域,为川乌、草乌及其炮制品的品种的鉴定及质量控制提供一定依据,为其质量标准提供一定的方法学依据。本实验建立了川乌、草乌及其炮制品的主要指标性成分含量测定方法,根据川乌、草乌文献研究的报道,结合工业饮片生产的需要,对川乌、草乌的炮制工艺进行了系统的考察,优选出更科学合理的炮制工艺。同时制定出川乌、草乌及其炮制品的HPLC指纹图谱,为川乌、草乌及其炮制品的品种的鉴定及质量控制提供一定依据。

论文目录

  • 中文摘要
  • Abstract
  • 引言
  • 第一章 文献研究
  • 1 乌头属中药的本草考证
  • 2 化学成分的研究
  • 3 乌头属中药的药理的研究
  • 4 炮制工艺的研究
  • 5 含量测定研究
  • 6 指纹图谱的研究
  • 第二章 实验研究
  • 第一节 川乌、草乌及其炮制品指标性成分的含量测定
  • 1 川乌、草乌及其炮制品6种生物碱HPLC含量测定
  • 1.1 仪器与试药
  • 1.2 方法与结果
  • 1.3 讨论
  • 2 总生物碱的含量测定
  • 2.1 仪器与试药
  • 2.2 方法与结果
  • 2.3 讨论
  • 3 酯型生物碱的含量测定
  • 3.1 仪器与试药
  • 3.2 方法与结果
  • 3.3 讨论
  • 第二节 川乌、草乌炮制工艺的研究
  • 1 仪器与试剂
  • 1.1 仪器
  • 1.2 试药
  • 2 方法与结果
  • 2.1 川乌、草乌软化方式的研究
  • 2.2 药典法炮制工艺的研究
  • 2.3 高压炮制工艺的研究
  • 2.4 高温烘制工艺的研究
  • 2.5 微波炮制工艺的研究
  • 2.6 川乌、草乌不同炮制工艺的比较
  • 3 讨论
  • 第三节 乌头属中药炮制原理的研究
  • 1 仪器与试药
  • 1.1 仪器
  • 1.2 试药
  • 2 方法与结果
  • 2.1 6种生物碱水解试验的研究
  • 2.2 川乌、草乌炮制前后化学成分含量变化
  • 3 讨论
  • 第四节 川乌、草乌及其炮制品指纹图谱的研究
  • 1 仪器与试药
  • 1.1 仪器
  • 1.2 试药
  • 2 方法与结果
  • 2.1 不同产地川乌指纹图谱的研究
  • 2.2 不同产地草乌指纹图谱的研究
  • 2.3 川乌炮制品指纹图谱的研究
  • 2.4 草乌炮制品指纹图谱的研究
  • 3 讨论
  • 3.1 提取溶剂及方法的考察
  • 3.2 色谱柱的考察
  • 3.3 流动相的优化
  • 3.4 检测波长的考察
  • 3.5 川乌、草乌HPLC指纹图谱建立
  • 结语
  • 参考文献
  • 附录
  • 研究生在学期间发表论文情况
  • 致谢
  • 相关论文文献

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