导读:本文包含了韧带成纤维细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:肿瘤坏死因子,膝后交叉韧带,成纤维细胞,基质金属蛋白酶
韧带成纤维细胞论文文献综述
陈荣富,陈诚,王春莉[1]（2019）在《TNF–α对兔膝后交叉韧带成纤维细胞MMPs及TIMPs表达的影响》一文中研究指出目的:探讨肿瘤坏死因子–α(TNF–α)对兔膝后交叉韧带(PCL)成纤维细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)表达的影响。方法:在2018年9月至2018年12月期间分别提取新西兰兔正常PCL和机械性损伤PCL成纤维细胞,采用不同浓度TNF–α进行处理,观察TNF–α对兔PCL成纤维细胞中MMPs、TIMPs表达的影响。结果:TNF–α会使正常组兔PCL成纤维细胞MMP1和损伤组的MMP1活性形式表达升高,而会使损伤组的MMP1表达降低;TNF–α能增加正常组和损伤组兔PCL成纤细胞MMP2表达,且在TNF–α同等浓度水平下,正常组兔PCL成纤细胞MMP2表达显着低于损伤组;TNF–α使正常组PCL成纤维细胞的TIMP1表达升高,使损伤组PCL成纤维细胞中TIMP1表达量下降;在未使用TNF–α处理时,损伤组PCL成纤维细胞TIMP1表达显着高于正常组;在使用TNF–α浓度为10 ng·mL~(-1)及100 ng·mL~(-1)处理时,损伤组PCL成纤维细胞TIMP1表达明显低于正常组。正常组和损伤组在行TNF–α处理后的TIMP2表达均明显下降。结论:TNF–α可能通过调节MMPs和TIMPs的表达在兔PCL损伤发展中起重要的作用,从而抑制其修复和愈合。(本文来源于《深圳中西医结合杂志》期刊2019年17期）
桑鹏,刘毅[2]（2019）在《Scleraxis联合碱性成纤维细胞生长因子体外促进人羊膜间充质干细胞向人韧带成纤维细胞的定向分化》一文中研究指出背景:人羊膜间充质干细胞具有多向分化能力,相关研究表明Scleraxis和碱性成纤维细胞生长因子均能够促进人羊膜间充质干细胞向人韧带成纤维细胞定向分化。目的:探讨Scleraxis联合碱性成纤维细胞生长因子促进人羊膜间充质干细胞向人韧带成纤维细胞分化的效果。方法:经遵义医学院附属医院伦理委员会批准,术前签署知情同意书,取足月产胎盘羊膜组织,两步酶消化法分离人羊膜间充质干细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态;苏木精-伊红染色观察新鲜人羊膜结构;取第3代人羊膜间充质干细胞分4组进行培养:①单纯人羊膜间充质干细胞培养组;②人羊膜间充质干细胞经Slclerxis基因慢病毒感染组;③人羊膜间充质干细胞经碱性成纤维细胞生长因子诱导组;④人羊膜间充质干细胞经Scleraxis和碱性成纤维细胞生长因子联合诱导组。细胞培养3d开始采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力;细胞培养14 d后,实时荧光定量PCR评价各组细胞向人韧带成纤维细胞定向分化的效果。结果与结论:①第3代人羊膜间充质干细胞呈长梭形、涡旋状贴壁生长;②新鲜人羊膜呈明显的分层结构,共分为5层:上皮层、基底层、致密层、纤维母细胞层和海绵层;③人羊膜间充质干细胞经Scleraxis基因慢病毒感染24h后表达绿色荧光,荧光表达量较强且稳定;经过碱性成纤维细胞生长因子诱导后14d的形态近似于人韧带成纤维细胞;④CCK-8实验结果显示:4组细胞均呈S型生长,其中Scleraxis基因慢病毒感染组、碱性成纤维细胞生长因子诱导组、联合诱导组较单纯培养组增殖能力强(P <0.05),但这3组间的增殖能力差异无显着性意义(P> 0.05);⑤实时荧光定量PCR显示:Scleraxis基因慢病毒感染组、碱性成纤维细胞生长因子诱导组、联合诱导组韧带相关基因Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Fibronectin、Tenascin-C、TNMD的m RNA表达量均高于单纯培养组(P <0.05),联合诱导组上述韧带相关基因的mRNA表达量高于Scleraxis基因慢病毒感染组和碱性成纤维细胞生长因子诱导组(P <0.05);⑥结果表明,Scleraxis基因和碱性成纤维细胞生长因子联合促进人羊膜间充质干细胞向人韧带成纤维细胞分化,为韧带损伤修复治疗提供了新的思路。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年29期）
韩晓瑾[3]（2019）在《人子宫内膜间充质干细胞的分离、鉴定及生长因子对其向韧带成纤维细胞分化作用研究》一文中研究指出目的:1.体外分离人子宫内膜间充质干细胞(human endometrial mesenchymal stem cell,hEMSCs),探讨其是否具有MSCs特性。2.研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)与转化生长因子-β_1(Transforming growth factors-β_1,TGF-β_1)对体外培养hEMSCs向韧带成纤维细胞分化作用影响。方法:1.hEMSCs的体外分离、鉴定:采用酶消法结合反复贴壁法分离纯化获得的hEMSCs。倒置显微镜下观察细胞形态。流式细胞仪检测细胞表面特异抗原阳性率。采用特定的诱导培养基体外诱导hEMSCs向成脂细胞、成骨细胞及成软骨细胞的分化,并分别使油红0染色、茜素红染色及阿利新蓝染色法检测hEMSCs向成脂、成骨及成软骨细胞分化效果。MTS检测细胞增殖活性并绘制细胞的生长曲线。2.使用第四代hEMSCs,按照在培养基中分别添加bFGF、TGF-β_1以及bFGF+TGF-β_1联合处理为实验组,加入正常培养基为对照组。培养3天后倒置相差显微镜下观察各组细胞形态变化情况;培养12、24、36、48、60h MTS检测各组细胞增殖活性情况;培养3天后采用实时荧光定量PCR检测各组细胞Ⅰ型胶原mRNA表达情况及免疫荧光检测各组细胞Ⅰ型胶原蛋白表达情况。3.应用graphpad prism 7软件包进行数据处理。所有数据结果均采用平均数±标准差(?±)表示。两组间差异比较采用t检验,以α=0.05作为检验水准,P<0.05表示差异具有统计学意义。结果:1.采用酶消法结合反复贴壁法可体外分离纯化hEMSCs。倒置显微镜下观察hEMSCs经多次传代后其细胞形态均一,呈成纤维样,呈旋涡状或平行排列生长。流式细胞仪检测第四代hEMSCs表面特异抗原表现出CD73、CD90、CD105阳性,分别为99.9%、97.3%、99.7%;CD34、CD45、CD11b、CD19及HLA-DR阴性,为1.7%。油红O染色显示:成脂诱导后,细胞浆内可见脂滴;茜素红染色显示:成骨诱导后细胞外存在多个矿化结节;阿利新蓝染色显示:成软骨诱导后,大量的糖胺聚糖被分泌到细胞基质中。细胞生长曲线显示细胞增殖能力强。以上结果证实获得的细胞符合间充质干细胞的特征。2.分别经bFGF、TGF-β_1及bFGF+TGF-β_1联合干预后:(1)培养3天后倒置相差显微镜下观察示细胞形态结果显示:与对照组比较,bFGF组、bFGF+TGF-β_1组细胞形态更加细长,呈“树突”状,更趋向于成纤维细胞特性,而TGF-β_1组细胞形态增宽,呈扩散趋势。(2)MTS检测培养12、24、36、48、60h各组细胞细胞增殖速率结果显示:bFGF组、TGF-β_1组、bFGF+TGF-β_1组细胞增殖速率较对照组均明显增快,差异具有统计学意义(P<0.05);与bFGF组、TGF-β_1组相比较,bFGF+TGF-β_1组细胞增殖速率增快更加明显,差异具有统计学意义(P<0.05);提示bFGF与TGF-β_1均可以促进细胞增殖,且两者联合后促进细胞增殖作用更加显着。(3)培养3天后实时荧光定量PCR结果显示:与对照组比较,bFGF组Ⅰ型胶原mRNA表达明显下调,TGF-β_1组及bFGF+TGF-β_1组Ⅰ型胶原mRNA表达均上调,差异均具有统计学意义(P<0.05),但bFGF+TGF-β_1组Ⅰ型胶原mRNA表达上调趋势小,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)免疫荧光染色结果显示:I型胶原蛋白主要分布在细胞质内。与对照组比较,bFGF组Ⅰ型胶原蛋白表达明显降低,TGF-β_1组及bFGF+TGF-β_1组Ⅰ型胶原蛋白表达均有所增加,但bFGF+TGF-β_1组Ⅰ型胶原蛋白表达增加程度小。结论:1.hEMSCs具有MSCs特征,可作为韧带组织工程种子细胞来源。2.bFGF可促使hEMSCs细胞形态更趋向成纤维细胞特性。bFGF与TGF-β_1联合促进hEMSCs增殖的效果更加明显。bFGF、TGF-β_1对I型胶原合成具有一定的拮抗作用,bFGF具有抑制I型胶原合成的效应,而TGF-β_1则具有促进I型胶原合成的效应,bFGF与TGF-β_1联合使I型胶原的合成和降解的处于动态平衡的状态,总体增加了I型胶原的表达量,对hEMSCs向韧带成纤维细胞分化具有促进作用。(本文来源于《山西医科大学》期刊2019-06-03）
舒莉,柴浩,巨啸晨,张磊[4]（2019）在《鞘内保残重建术与牵张保残重建术对兔前交叉韧带残端成纤维细胞增殖、凋亡的影响》一文中研究指出目的探讨鞘内保留残端(保残)重建术与牵张保残重建术对兔前交叉韧带(ACL)残端成纤维细胞增殖、凋亡的影响。方法将43只新西兰兔随机分为A组3只、B组8只、C组16只、D组16只。B组单纯切断双侧ACL,C组切断ACL后给予残端鞘内重建术,D组切断ACL后给予牵张保残重建术,术后3、6周,取其ACL残端标本。A组作为正常对照选两侧后肢正常ACL标本(胫骨端4 mm)。各标本HE染色观察残端内成纤维细胞数量,免疫组化法检测残端内成纤维细胞中增殖细胞相关核抗原(Ki-67)蛋白表达,TUNEL法检测残端内成纤维细胞凋亡。结果术后3、6周,B、C、D组ACL残端内成纤维细胞数量均多于A组(P均<0. 05),B、C、D组比较差异无统计意义(P> 0. 05);术后6周,B、C、D组成纤维细胞数量较术后3周减少,但仍高于A组(P <0. 05),B、C、D组比较差异无统计意义(P> 0. 05)。术后3、6周,B、C、D组残端成纤维细胞内Ki-67蛋白表达、凋亡率比较差异无统计学意义(P均> 0. 05)。结论残端鞘内重建、牵张保残重建两种术式均未促进兔ACL残端成纤维细胞生长,二者对成纤维细胞增殖和凋亡的影响无差异。(本文来源于《山东医药》期刊2019年13期）
蔡林奕,皮彩霞,谢静[5]（2019）在《前交叉韧带成纤维细胞与滑膜细胞共培养条件下前列腺素E_2的作用》一文中研究指出背景:滑膜细胞与前交叉韧带成纤维细胞共培养体系的建立能在较大程度上模拟韧带损伤后的微环境变化。在前列腺素E_2等炎症因子的刺激下,基质金属蛋白酶家族与基质金属蛋白酶组织抑制剂家族(tissue inhibitorsof metalloproteinases,TIMPs)表达量的严重失衡可在一定程度上解释前交叉韧带的不可自我修复特性。目的:在前交叉韧带成纤维细胞与滑膜细胞共培养的条件下,研究前列腺素E_2对滑膜细胞迁移和TIMPs基因表达的影响。方法:体外分别进行人滑膜细胞的单培养以及前交叉韧带成纤维细胞与滑膜细胞的Transwell共培养,用前列腺素E_2干预后,细胞划痕实验检测24 h时的滑膜细胞迁移率;半定量PCR分析滑膜细胞中TIMPs基因表达的变化。结果与结论:①前列腺素E_2处理单培养的滑膜细胞后,细胞迁移率显着下降(P <0.05);与共培养滑膜细胞比较,前列腺素E_2对单培养滑膜细胞迁移的抑制作用更为显着(P <0.05);②在单培养滑膜细胞中,前列腺素E_2呈浓度依赖性地抑制TIMPs基因的表达(P <0.05);对TIMP2和TIMP4而言,这种抑制作用具有时间依赖性;对TIMP1和TIMP3而言,随时间增加,基因表达上调;③共培养滑膜细胞TIMPs基因表达的变化幅度不如单培养细胞显着,且各个时间点的TIMPs基因表达量均高于单培养处理组(P <0.05);④结果提示,前列腺素E_2能显着抑制滑膜细胞的迁移和TIMPs的基因表达,而共培养的旁分泌作用可在一定程度上解除这种抑制。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年13期）
朱喜忠,刘子铭,吴术红,熊华章,金瑛[6]（2018）在《骨形态发生蛋白9基因修饰人羊膜间充质干细胞体外向韧带成纤维细胞分化研究》一文中研究指出目的:探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)基因修饰对人羊膜间充质干细胞(h AMSCs)在体外向韧带成纤维细胞(LFs)分化是否有促进作用,并研究其分子机制。方法:体外分离培养h AMSCs及LFs,观察并比较两种细胞形态学差异。经Ad MAX系统体外构建BMP9基因腺病毒载体,经提纯及荧光法病毒滴度测定后转染P3代h AMSCs。实验分为叁组,A组:携带绿色荧光蛋白(GFP)的空腺病毒载体转染h AMSCs(h AMSCs-GFP);B组:携带BMP9基因的腺病毒载体转染h AMSCs(h AMSCs-BMP9);C组:韧带成纤维细胞组(LFs)。于体外分别培养7天后使用荧光定量PCR检测并比较各组韧带相关基因Scleraxis(Scx)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、细胞连接素(TNC)、纤维连接蛋白(Fib)及腱调蛋白(Tnmd)m RNA的表达量。使用免疫荧光检测并比较叁组细胞体外培养7天后ColⅠ的表达量。结果:在倒置相差显微镜下,h AMSCs原代呈多角形贴壁生长,传代后呈长梭状漩涡状生长。LFs原代呈长梭状贴壁生长,传代后呈漩涡状集落样生长。A、B组细胞转染8 h、24 h后,生长增殖缓慢,轮廓清晰,细胞形态未发生变化。荧光显微镜观察显示A组在转染8 h后可见GFP荧光表达,24 h后表达荧光的数量和强度均增多。实时荧光定量PCR显示,转染7天时B组SCX、Tnmd、ColⅠ、Fib及TNC的表达量均高于A组(P<0.05),而SCX、Fib、TNC及Tnmd的表达量低于C组(P<0.05),ColⅠ的表达量高于C组(P<0.05)。荧光免疫组化显示,转染7天后,B组ColⅠ的表达量均高于A组和C组。结论:BMP9基因可促进h AMSCs向LFs定向分化,并促进韧带特异性基因的表达和细胞外基质的产生,为h AMSCs作为韧带组织工程种子细胞提供了实验基础。(本文来源于《中国运动医学杂志》期刊2018年06期）
夏萍[7]（2018）在《强直性脊柱炎Andersson病局部韧带成纤维细胞成骨能力的研究》一文中研究指出目的:通过对强直性脊柱炎及腰椎间盘突出症患者棘上韧带组织成纤维细胞进行细胞培养观察其成骨分化能力,分别在培养基中加入强直性脊柱炎患者血清及正常人血清,进行对照实验,观察两种成纤维细胞分化成成骨细胞的能力,探究强直性脊柱炎患者成骨能力强大的原因。方法:实验所需标本分别来源于强直性脊柱炎Andersson病假关节处及棘上韧带组织(A成纤维细胞),腰椎间盘突出症患者棘上韧带组织(B成纤维细胞),强直性脊柱炎病人的血清和腰椎间盘突出症病人的血清(A血清、B血清)制作成两组培养基,将两组韧带成纤维细胞在不同血清培养基中培养,分为4个处理组即AA、AB、BA、BB,每日在相差显微镜中观察各组的成纤维细胞在培养过程中的具体演变,同时在培养之后的第20天,使用定量以及定性的检测方法来计算碱性磷酸酶活力参数,使用ELISA检测方法来计算骨钙素的具体表达参数,对比相关的成骨表达信息,评价四个组的成骨表达能力。结果:通过相差显微镜观察各组成纤维细胞培养情况,发现成纤维细胞分化形态具有相似的变化,各组碱性磷酸酶的活力以及骨钙素的表达状况,会伴随诱导时间的增加而提升,比较四个组成纤维细胞的成骨诱导及成骨标志物的表达情况,发现碱性磷酸酶活力及骨钙素表达量均为AA组>AB组>BA组>BB组,四个组之间两两相比较具有统计学意义(P<0.05)。结论:强直性脊柱炎以及腰椎间盘突出症病患的成纤维细胞在体外培养条件下存在着向成骨细胞分化的能力,同时强直性脊柱炎的成纤维细胞成骨趋势更为显着。在成纤维细胞分化过程中,强直性脊柱炎病患的血清促成骨分化效应相对更为突出,代表着AS病患的血清内有着含量更高的成骨诱导因子。通过比较AB组与BA组成骨表达程度,提出两个猜想:一是遗传条件下的成纤维细胞自身特性在成骨分化过程中发挥的成骨表达作用强于血清对成纤维细胞的促成骨作用,二是AS病患韧带局部存在比血清中含量更多的促成骨细胞因子。意义:通过对强直性脊柱炎成纤维细胞的体外培养,证实了成纤维细胞在强直性脊柱炎脊柱关节融合过程中发挥重要作用。成纤维细胞在体内大环境下,在成骨诱导因子的趋动下,强化成骨能力,致使脊柱关节融合。实验中AB组成骨强于BA组,由此我们提出两个猜想,强直性脊柱炎局部韧带成纤维细胞成骨能力的强大,究竟是成纤维细胞的本身属性还是局部韧带中存在更多的促成骨细胞因子在局部发挥关键作用,这值得我们去更进一步探索,可能会为强直性脊柱炎成骨机制的研究提供依据。(本文来源于《青岛大学》期刊2018-05-19）
朱喜忠[8]（2018）在《Scleraxis慢病毒载体介导hAMSCs向韧带成纤维细胞分化的体外研究》一文中研究指出目的:探讨Scleraxis慢病毒载体介导hAMSCs后体外向人韧带成纤维细胞分化的潜能与效果。方法:1)取人羊膜经胰酶和胶原酶消化分离hAMSCs,反复贴壁纯化后进行表型鉴定;透射电镜观察细胞内部结构;CCK-8法检测hAMSCs增殖活性;定向分化21d后,分别使用不同染色方法检测hAMSCs向骨细胞、软骨细胞及脂肪细胞的分化效果。2)取人交叉韧带残端经酶消化法分离培养h LFs,使用倒置相差显微镜观察细胞形态;CCK-8法检测细胞增殖能力,并与hAMSCs相比较;实时荧光定量PCR检测并比较两种细胞I型胶原、腱调蛋白(Tenomodulin),Mohawk及Scleraxis相对表达量。3)构建人Scleraxis基因质粒,经293T细胞对病毒进行收集、滴度测定及MOI测定后转染hAMSCs,RT-PCR和Westen Blot对Scx在hAMSCs中表达验证后,筛选持续分泌Scx的hAMSCs,测定韧带相关基因和蛋白的表达程度,并与Matrigel水凝胶混合后移植裸鼠皮下观察分化效果。结果:1)酶消化法获得大量可稳定增殖的hAMSCs,成长梭形、漩涡状生长贴长;透射电镜显示hAMSCs呈椭圆形,结构清晰,细胞表面有少量微绒毛,染色质分布均匀,胞浆内可见丰富的内质网及排列规则的线粒体;流式表型鉴定示hAMSCs符合MSCs表型。成骨定向诱导后出现多个钙化结节;甲苯胺蓝染色呈示细胞合成多量糖胺聚糖;油红O染色显示胞浆内出现淡黄色脂滴。倒置相差显微镜观察显示,hLFs原代时多以长梭形贴壁生长,细胞核圆形,原代细胞数量较少;传代后呈长梭状并可见漩涡样集落;CCK-8显示hlFs呈“S”形生长曲线,但增殖能力明显低于hAMSCs(P<0.05);PCR结果显示,h LFs表达I型胶原、腱调蛋白(Tenomodulin),Mohawk及Scleraxis的mRNA水平均高于hAMSCs(P<0.05)。2)酶切产物、菌液PCR检测均显示条带大小为600bp,梯度法转染293T细胞后筛选出滴度为1×10~8TU/μL的病毒原液。以6.5μL病毒原液转染hAMSCs 96h后荧光表达量示转染良好,并以3.5μg/m L浓度的puromycin对细胞进行筛选。RT-PCR显示过表达组Scx表达量在3天、7天均高于空质粒组(P<0.05),7天时Scx表达量高于3天(P<0.05)。Westen Blot显示转染组Scx蛋白表达量高于空质粒组。3)PCR显示hAMSCs转染Scx后Ⅲ型胶原、赖氨酰氧化酶-1(LOX-1)、纤维连接蛋白(Fibronectin)、腱调蛋白(Tenomodulin,Tnmd)核心蛋白聚糖(Dceorin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、和细胞连接素(Tenascin-C)的mRNA表达水平于3d、5d和7d时高于空质粒组(P<0.05),但仍低于h LFs组(P>0.05);而I型胶原荧光5天时强于各组,但7天时与hLFs组表达量无明显差异。Western blot结果显示各组I、Ⅲ型胶原,纤维连接蛋白和细胞连接素的分泌水平随时间的延长而增强,实验组和hLFs组表达量均高于空质粒组(P<0.05)。免疫荧光染色发现每组的I型胶原及Fibeonectin表达量随时间增长,h LFs组表达量在3d和7d时分泌量均高于过表达组和空质粒组。过表达组细胞与Matrigel水凝胶混合并移植裸鼠皮下28d后未见明显炎症反应,HE染色示细胞排列更为紧密与规则,形态趋近于正常韧带组织。结论:1)酶消化和贴壁法体外培养的hAMSCs具有MSC的表型和特性。hLFs体外增殖能力hAMSCs较弱但韧带相关基因表达水平较强高,证实Scleraxis为hAMSCs和hLFs的差异性基因。2)构建的Scleraxis基因慢病毒载体在体外转染hAMSCs后能稳定表达且不影响细胞的增殖能力,成功建立了稳转细胞系。3)慢病毒介导Scx转染hAMSCs后能够提高韧带相关基因和蛋白的表达水平,分化形态更趋向成纤维细胞,体内移植后无明显炎症反应。(本文来源于《遵义医学院》期刊2018-05-01）
聂明朝,王小花,叶文娇[9]（2018）在《氧化应激对宫旁韧带成纤维细胞细胞弹性蛋白及转录因子NF-E2相关因子2表达的影响》一文中研究指出目的用H_2O_2诱导人宫旁韧带成纤维细胞活性氧簇(ROS)产生,建立氧化应激细胞模型,检测氧化应激对细胞弹性蛋白(elastin)及转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)表达的影响。方法根据H_2O_2造模结果,选取导致细胞ROS产生的最小和最大有效浓度的H_2O_2,即0.2 mmol/L H_2O_2和0.8 mmol/L H_2O_2来模拟细胞较低、较高水平的氧化应激,以正常培养的人宫旁韧带成纤维细胞作为对照组。观察不同程度氧化应激对细胞elastin及Nrf2蛋白表达的影响。结果根据造模结果显示0.2 mmol/L和0.8 mmol/L H_2O_2可造成细胞较低和较高水平的氧化应激,Western blot检测不同程度氧化应激作用下细胞elastin及Nrf2的表达结果显示低水平氧化应激组elastin的表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),高氧化应激组elastin的表达较对照组下降,差异有统计学意义(P<0.01);而低、高氧化应激组中Nrf2表达均下降,且高氧化应激组下降更明显(P<0.01)。结论氧化应激可导致细胞Nrf2表达下降,且一定程度的氧化应激可抑制细胞elastinde表达,为后期探讨氧化应激在盆腔器官脱垂发病中的作用机制提供实验基础和新的思路。(本文来源于《广东医学》期刊2018年07期）
逯代锋,杨传东,董锋,周勇,严实[10]（2017）在《酸性成纤维细胞生长因子复合胶原蛋白对兔前交叉韧带重建后腱-骨愈合的影响》一文中研究指出目的观察酸性成纤维细胞生长因子(a FGF)复合胶原蛋白对兔前交叉韧带(ACL)重建后腱-骨界面愈合的影响。方法将30只新西兰白兔随机分为实验组与对照组,每组15只,均取趾长伸肌腱作为移植物。实验组将a FGF/胶原蛋白复合物植入到重建的ACL腱-骨界面,对照组单纯行ACL重建。于术后第4、8、12周分别处死动物取材,将股骨与胫骨端分别固定于生物力学试验机上,测试移植肌腱的腱-骨界面抗拉伸强度,取其绝对值作比较;同时,将股骨隧道和胫骨隧道纵向剖开,取下标本组织学观察移植物界面愈合情况。结果术后第4、8、12周抗拉力强度实验组强于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。两组动物均在第4周时移植物与骨隧道之间均形成了纤维结缔组织。术后第12周,实验组肌腱移植物在骨隧道内形成了纤维软骨移行带,类似于正常的纤维软骨连接,而对照组则形成了走向与骨隧道轴向垂直的Sharpey样纤维。结论a FGF复合胶原蛋白能促进兔ACL重建腱-骨界面的早期直接愈合。(本文来源于《临床骨科杂志》期刊2017年06期）
韧带成纤维细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景:人羊膜间充质干细胞具有多向分化能力,相关研究表明Scleraxis和碱性成纤维细胞生长因子均能够促进人羊膜间充质干细胞向人韧带成纤维细胞定向分化。目的:探讨Scleraxis联合碱性成纤维细胞生长因子促进人羊膜间充质干细胞向人韧带成纤维细胞分化的效果。方法:经遵义医学院附属医院伦理委员会批准,术前签署知情同意书,取足月产胎盘羊膜组织,两步酶消化法分离人羊膜间充质干细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态;苏木精-伊红染色观察新鲜人羊膜结构;取第3代人羊膜间充质干细胞分4组进行培养:①单纯人羊膜间充质干细胞培养组;②人羊膜间充质干细胞经Slclerxis基因慢病毒感染组;③人羊膜间充质干细胞经碱性成纤维细胞生长因子诱导组;④人羊膜间充质干细胞经Scleraxis和碱性成纤维细胞生长因子联合诱导组。细胞培养3d开始采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力;细胞培养14 d后,实时荧光定量PCR评价各组细胞向人韧带成纤维细胞定向分化的效果。结果与结论:①第3代人羊膜间充质干细胞呈长梭形、涡旋状贴壁生长;②新鲜人羊膜呈明显的分层结构,共分为5层:上皮层、基底层、致密层、纤维母细胞层和海绵层;③人羊膜间充质干细胞经Scleraxis基因慢病毒感染24h后表达绿色荧光,荧光表达量较强且稳定;经过碱性成纤维细胞生长因子诱导后14d的形态近似于人韧带成纤维细胞;④CCK-8实验结果显示:4组细胞均呈S型生长,其中Scleraxis基因慢病毒感染组、碱性成纤维细胞生长因子诱导组、联合诱导组较单纯培养组增殖能力强(P <0.05),但这3组间的增殖能力差异无显着性意义(P> 0.05);⑤实时荧光定量PCR显示:Scleraxis基因慢病毒感染组、碱性成纤维细胞生长因子诱导组、联合诱导组韧带相关基因Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Fibronectin、Tenascin-C、TNMD的m RNA表达量均高于单纯培养组(P <0.05),联合诱导组上述韧带相关基因的mRNA表达量高于Scleraxis基因慢病毒感染组和碱性成纤维细胞生长因子诱导组(P <0.05);⑥结果表明,Scleraxis基因和碱性成纤维细胞生长因子联合促进人羊膜间充质干细胞向人韧带成纤维细胞分化,为韧带损伤修复治疗提供了新的思路。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
韧带成纤维细胞论文参考文献
[1].陈荣富,陈诚,王春莉.TNF–α对兔膝后交叉韧带成纤维细胞MMPs及TIMPs表达的影响[J].深圳中西医结合杂志.2019
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