白介素-10对实验性肝纤维化大鼠生长因子和细胞外基质及其代谢酶表达的影响

论文摘要

目的:检测TGF-β1、EGF、HGF、PDGF、MMP-2、MMP-9、TIMP-1 及I、III 型胶原在HSC 及肝组织内的表达,探讨IL-10 干预及治疗后对其表达的影响,阐明外源性IL-10 的抗纤维化作用及可能机制。方法:实验分两阶段。第一阶段:60 只SD 大鼠随机分为正常对照组（N1组,8 只）、肝纤维化组（C 组,28 只）和IL-10 干预组（I 组,24 只）,分别于造模第7 周及11 周分离HSC,通过半定量RT-PCR 法和免疫细胞化学法检测各组HSC 中TGF-β1、EGF、HGF 和PDGF 的表达水平;并于上述两个时段将各组肝组织行HE 染色判断炎症和肝纤维化程度。第二阶段:47 只SD 大鼠随机分为生理盐水对照组（N2 组,6 只）和CCl4组（Z 组,41 只）。至造模第9 周,Z组随机分为模型组（M 组,9 只）,IL-10 治疗组（T 组,9 只）和自然恢复组（R组,9 只）,于12 周末处死各组动物。免疫组织化学法检测各组大鼠肝脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1 及I、III 型胶原含量,HE 染色后采用HAI 评分判断各组肝纤维化程度。结果:第一阶段,成功建立大鼠肝纤维化模型和分离HSC。在第7 周和11 周时,C 组TGF-β1、EGF、HGF 的mRNA 水平比N1 组和I 组高。TGF-β1mRNA水平N1 组和I 组无差别,EGF I 组高于N1 组,HGF I 组低于N1 组。在两个时段间,TGF-β1 第11 周时的表达量低于第7 周,EGF 与此相反。对PDGF 而言,组间及各时段间都无差别。免疫细胞化学法检测情况与上述mRNA 结果相平行。第二阶段,成功建立肝纤维化模型。病理组织学显示,T 组肝纤维化程度较M 组有明显改善,R 组纤维化未见明显好转。MMP-2、MMP-9、TIMP-1 及I、III型胶原在各组中的阳性表达如下,与N2组比较,M组表达明显升高,经IL-10治疗后表达显著降低;R 组表达比M 组有所降低,但阳性指数仍明显高于T 组。结论:TGF-β1、EGF、HGF、MMP-2、MMP-9、TIMP-1 及I、III 型胶原随肝纤维化进程逐渐升高,IL-10 可通过抑制其表达发挥抗纤维化作用。

论文目录

• 一、 英文缩略词释义表
• 二、 中文摘要
• 三、 英文摘要
• 四、 前言
• 五、 第一部分:大鼠肝星状细胞分离培养的方法学研究
• 1 材料与方法
• 2 结 果
• 3 讨 论
• 六、 第二部分:白介素10 对实验性肝纤维化大鼠肝星状细胞生长因子表达的影响
• 1 材料与方法
• 2 结 果
• 3 讨 论
• 七、 第三部分: 白介素10 对实验性肝纤维化大鼠细胞外基质及其代谢酶表达的影响
• 1 材料与方法
• 2 结 果
• 3 讨 论
• 八、 结论
• 九、 参考文献
• 十、 综述
• 十一、致谢