茯苓多糖的提取及生物活性研究

茯苓多糖的提取及生物活性研究

论文摘要

真菌多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎症、降血糖、降胆固醇、降血脂等多种生物活性,他们通过免疫调节作用抑制肿瘤或癌细胞的生长,并且对正常细胞无毒副作用。茯苓作为传统中药,其在提高免疫力、抗肿瘤、镇静、利尿消肿等多个方面扮演重要的角色,越来越被研究者所重视。茯苓含有多种成份主要有茯苓多糖、木聚糖、酸性多糖、甘露聚糖、茯苓酸等,其中茯苓多糖的成份最高。揭示茯苓多糖的性质是研究茯苓的重点。本论文从提取、纯化、生物活性等方面对茯苓多糖进行了探索。我们得到以下结论:(1)初步确定了超声波提取茯苓多糖的效果,超声波有助于茯苓多糖的提取;通过多级分离体系得到了生理盐水提取的多糖PC1、热水提取的多糖PC2、碱提取的多糖PC3-I和PC3-II,通过对分级提取的多糖的光谱扫描分析,其蛋白含量比较低,多糖的纯度高。去除茯苓多糖中的蛋白杂质以“酶-sevage”法为最为理想,“sevage”法反复提取7次和终溶度为15%TCA反复提取三次后都对PC2的蛋白去除有一定的效果,sevage反复提取7次后对PC3-I的蛋白去除有一定的效果, TCA法并不适用于PC3-I的蛋白去除。(2)从初步的实验结果中并未观察到茯苓多糖有明显的抗菌作用。(3)通过MTT法筛选,发现PC3-I对HepG2和乳腺癌细胞(MDA-MB-231)都有抑制作用,IC50分别达到了74.1 ug/ml、152.4 ug/ml。PC2对于乳腺癌细胞有抑制作用,IC50为897.4 ug/ml。PC3-I对HepG2的抑制在加药后的6个小时作用效果明显。通过粘度法初步测算具有抑癌活性的PC3-I平均分子量范围在1×104左右。通过透析分离获得的PC3-I不同组分对HepG2和乳腺癌的抑制存在差别。我们推测茯对于不同的癌细胞,茯苓多糖的抑制作用存在差别,其具体的作用机制也可能有所不同。综上,本文探索了茯苓多糖的提取、去蛋白纯化、抑菌作用以及抗肿瘤作用,进一步的加强了人们对茯苓多糖的认识和了解。其中茯苓多糖在抗肿瘤方面的作用和差异是一个重要的信息,值得我们进一步的探索和研究。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 1 绪论
  • 1.1 茯苓的鉴别
  • 1.2 茯苓的化学成分
  • 1.3 生物活性多糖与茯苓多糖
  • 1.4 抗肿瘤作用
  • 1.5 利尿消肿作用
  • 1.6 增强免疫力作用
  • 1.7 抗氧化作用
  • 1.8 防结石作用
  • 1.9 茯苓的诱生效应
  • 1.10 多糖的抗菌效应
  • 1.11 茯苓的安全性
  • 1.12 多糖及茯苓的其他作用
  • 1.13 本研究的背景、目的及其意义
  • 2 实验材料
  • 2.1 材料
  • 2.2 仪器
  • 2.3 试剂、培养基、缓冲液
  • 3 实验方法
  • 3.1 茯苓多糖提取方法
  • 3.2 茯苓多糖的分级提取
  • 3.3 茯苓多糖中总糖测定及蛋白去除研究
  • 3.4 茯苓多糖的生物活性研究
  • 3.5 多糖的简单仪器分析及结构
  • 3.6 茯苓多糖的化学结构研究进展
  • 4 实验结果及讨论分析
  • 4.1 采用超声波提取能够提高茯苓多糖的提取率
  • 4.2 去除茯苓多糖中蛋白的方法比较
  • 4.3 茯苓多糖对微生物的抑制作用
  • 4.4 茯苓多糖的对癌细胞的生长的影响
  • 5 总结与展望
  • 5.1 主要结论
  • 5.2 课题展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 相关论文文献

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