肝素钠和低分子肝素钠的黏膜离子电渗给药研究

论文摘要

本文选择肝素钠(Unfractionated Heparin,UFH)和低分子肝素钠(Low Molecular Weight Heparin,LMWH)为模型药物,探讨通过黏膜给药途径在离子电渗和促渗剂的作用下增加大分子药物生物利用度的可能。两种模型药物多用于预防或治疗深部静脉血栓和肺栓塞等疾病,通常经注射给药,以钠盐形式存在,在水性介质中呈离子化状态。其中,UFH是一类糖胺聚糖,分子量为14000左右(范围3000～30000),由糖醛酸和葡萄糖胺以1, 4键连接的重复二糖单位组成的多糖链混合物,LMWH由UFH经降解或解聚获得,分子量为5000左右(范围3000～8000)。本研究以活化部分凝血活酶时间(Activated Partial Thromboplastin Time,APTT)法测定黏膜透过液和动物血浆中的LMWH和UFH,方法学研究表明,标准曲线的相关系数分别为0.9951和0.9967。回收率考察发现,在试验条件下,水溶液、黏膜匀浆液和电场作用均不干扰APTT测定。LMWH和UFH对不同黏膜的渗透系数为鸡嗉囊膜>犬舌下黏膜>大鼠肠黏膜。研究结果表明,聚乙二醇辛酸/癸酸甘油酯(Labrasol)有明显促吸收作用,其促渗效果随用量的增加而增加。考察不同电流对LMWH和UFH透过大鼠直肠黏膜的影响发现,药物在正极和负极下,电场对其均有促渗作用。电流密度相同时,负极下的促渗效果优于正极下,脉冲方波电流优于恒直流电流。药物的黏膜渗透系数随直流和脉冲电流电流强度的增加而增大。其中占空比1?1、60次/分钟的脉冲电流促渗效果最好,对2000 IU/ml LMWH溶液和4000 IU/ml UFH溶液透大鼠直肠黏膜的增渗比分别可达37.45和38.66。采用生物黏附材料卡波普(Carbopol)和海藻酸钠(Alginate Sodium)制备了LMWH和UFH的口腔给药膜剂;采用高分子材料聚氧乙烯(PEO)制备了二者的直肠给药胶液。研究发现,在0.33mA/cm2、4.5V直流电流作用下,LMWH的PEO胶液家兔直肠给药的生物利用度为皮下注射的25%,与不加电场直肠给药相比可提高8倍。大鼠口服LMWH溶液生物利用度为皮下注射的7%左右,而UFH不到1%;加入吸收促进剂Labrasol后,LMWH口服生物利用度提高到约14%,而UFH依然在1%以下;在离子电渗(0.45mA/cm2)方波电流作用下,大鼠口腔给予LMWH和UFH膜剂,生物利用度分别提高到20%和6%左右,大鼠直肠给予PEO的胶液的生物利用度则分别提高到约35%(LMWH)和16%(UFH),电场对药物透过黏膜吸收进入体循环有明显促进作用。用低压直流电(4.5V)也有显著促进作用,该结果提示将来可制备简单的、低成本的离子电渗药器组合产品。

论文目录

• 英文缩写说明
• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 第2章 LMWH 和UFH 的体外分析方法
• 2.1 LMWH 和UFH 的效价测定
• 2.1.1 仪器和材料
• 2.1.2 实验方法
• 2.1.2.1 供试品和标准品溶液的配制
• 2.1.2.2 家兔血浆的取得
• 2.1.2.3 效价测定
• 2.1.2.4 数据处理
• 2.1.3 结果和讨论
• 2.1.3.1 LMWH 效价测定结果
• 2.1.3.2 UFH 效价测定结果
• 2.1.4 小结
• 2.2 APTT 法
• 2.2.1 仪器和材料
• 2.2.2 实验方法
• 2.2.2.1 APTT 测定方法
• 2.2.2.2 黏膜透过液中LMWH 的测定
• 2.2.2.3 黏膜透过液中UFH 的测定
• 2.2.3 结果和讨论
• 2.2.3.1 LMWH 的体外分析方法
• 2.2.3.2 UFH 的体外分析方法
• 2.2.4 小结
• 2.3 APTT 法在各种条件下的回收率
• 2.3.1 仪器和材料
• 2.3.2 实验方法
• 2.3.2.1 在不同pH 水溶液中的回收率
• 2.3.2.2 在各种动物黏膜匀浆液中的回收率
• 2.3.2.3 在电场作用下的回收率
• 2.3.3 结果和讨论
• 2.3.3.1 各种pH 溶液中LMWH 和UFH 的回收率
• 2.3.3.2 在各种动物黏膜匀浆液中的回收率
• 2.3.3.3 在电场作用下的回收率
• 2.3.4 小结
• 2.3.5 本章小结
• 第3章 LMWH 和UFH 对黏膜的透过性研究
• 3.1 LMWH 的鸡嗉囊膜透过性
• 3.1.1 仪器和材料
• 3.1.2 实验方法
• 3.1.2.1 LMWH 透鸡嗉囊膜试验方法
• 3.1.2.2 各种LMWH 溶液的鸡嗉囊膜透过性
• 3.1.2.3 吸收促进剂对LMWH 透鸡嗉囊膜的影响
• 3.1.2.4 渗透系数和增渗比的计算
• 3.1.3 结果与讨论
• 3.1.3.1 各种LMWH 溶液的鸡嗉囊膜透过性
• 3.1.3.2 吸收促进剂对LMWH 透鸡嗉囊膜的影响
• 3.1.4 小结
• 3.2 LMWH 和UFH 的大鼠肠黏膜透过性
• 3.2.1 仪器和材料
• 3.2.2 实验方法
• 3.2.2.1 LMWH 透肠黏膜试验方法
• 3.2.2.2 LMWH 肠黏膜的透过性
• 3.2.2.3 UFH 肠黏膜透过性考察
• 3.2.2.4 渗透系数和增渗比的计算
• 3.2.3 结果与讨论
• 3.2.3.1 LMWH 的肠黏膜透过性
• 3.2.3.2 UFH 的肠黏膜透过性
• 3.2.3.3 LMWH 和UFH 大鼠肠黏膜透过性比较
• 3.2.4 小结
• 3.3 LMWH 和UFH 的犬舌下黏膜透过性
• 3.3.1 仪器和材料
• 3.3.2 实验方法
• 3.3.2.1 溶液配制
• 3.3.2.2 犬舌下黏膜
• 3.3.2.3 试验方法
• 3.3.3 结果和讨论
• 3.3.3.1 LMWH 的犬舌下黏膜透过性
• 3.3.3.2 UFH 的犬舌下黏膜透过性
• 3.3.3.3 LMWH 和UFH 犬舌下黏膜透过性比较
• 3.3.4 小结
• 3.4 乳酸脱氢酶的测定以评价Labrasol 对黏膜的毒性
• 3.4.1 仪器和材料
• 3.4.2 实验方法
• 3.4.3 结果和讨论
• 3.4.4 小结
• 3.4.5 本章小结
• 第4章 离子电渗仪的设计及LMWH 和UFH 离子电渗透大鼠肠黏膜研究
• 4.1 离子电渗仪的研制
• 4.1.1 离子电渗仪的线路图
• 4.1.2 离子电渗的理论模型
• 4.2 LMWH 和UFH 的离子电渗透大鼠直肠黏膜研究
• 4.2.1 仪器和材料
• 4.2.2 实验方法
• 4.2.2.1 LMWH 离子电渗透大鼠直肠黏膜
• 4.2.2.2 UFH 离子电渗透大鼠直肠黏膜
• 4.2.3 结果与讨论
• 4.2.3.1 直流电流对LMWH 大鼠直肠黏膜透过性的影响
• 4.2.3.2 不同电流强度的脉冲电流对LMWH 大鼠直肠黏膜透过性的影响
• 4.2.3.3 脉冲电流对UFH 大鼠直肠黏膜透过性的影响
• 4.2.3.4 脉冲电流对不同浓度UFH 大鼠直肠黏膜透过性的影响
• 4.2.4 小结
• 4.2.5 本章小结
• 第5章 LMWH 和UFH 大鼠口腔离子电渗给药药动学研究
• 5.1 大鼠血液中LMWH 和UFH 的检测方法
• 5.1.1 仪器和材料
• 5.1.2 实验方法
• 5.1.2.1 大鼠血浆中LMWH 测定方法的建立
• 5.1.2.2 大鼠血浆中UFH 测定方法的建立
• 5.1.3 结果和讨论
• 5.1.3.1 LMWH 体内分析方法
• 5.1.3.2 UFH 体内分析方法
• 5.1.4 小结
• 5.2 口腔给药膜剂的研制
• 5.2.1 仪器和材料
• 5.2.2 实验方法
• 5.2.2.1 LMWH 膜剂的制备方法
• 5.2.2.2 UFH 膜剂的制备方法
• 5.3 LMWH 和UFH 的大鼠离子电渗口腔给药研究
• 5.3.1 材料和仪器
• 5.3.2 实验方法
• 5.3.2.1 LMWH 和UFH 溶液的大鼠皮下注射给药
• 5.3.2.2 LMWH 和UFH 溶液的大鼠口服给药
• 5.3.2.3 LMWH 膜剂的脉冲离子电渗大鼠口腔给药
• 5.3.2.4 UFH 膜剂的脉冲离子电渗大鼠口腔给药
• 5.3.2.5 数据处理
• 5.3.3 结果和讨论
• 5.3.3.1 LMWH 膜剂的离子电渗大鼠口腔给药
• 5.3.3.2 UFH 膜剂的离子电渗大鼠口腔给药
• 5.3.4 小结
• 5.3.5 本章小结
• 第6章 LMWH 和UFH 直肠离子电渗给药药动学研究
• 6.1 直肠给药制剂的制备及其透大鼠直肠黏膜
• 6.1.1 仪器和材料
• 6.1.2 实验方法
• 6.1.2.1 LMWH 各种高分子材料溶液的制备
• 6.1.2.2 各种高分子材料的筛选
• 6.1.3 结果与讨论
• 6.1.3.1 不同LMWH 胶液大鼠直肠黏膜透过性
• 6.1.3.2 吸收促进剂对不同LMWH 胶液大鼠直肠黏膜透过性的影响
• 6.1.3.3 离子电渗对不同LMWH 含5% Labrasol 胶液大鼠直肠黏膜透过性的影响
• 6.1.4 小结
• 6.2 LMWH 和UFH 胶液的大鼠直肠离子电渗给药研究
• 6.2.1 仪器和材料
• 6.2.2 实验方法
• 6.2.2.1 LMWH 离子电渗大鼠直肠给药
• 6.2.2.2 脉冲离子电渗对LMWH 胶液的大鼠直肠吸收
• 6.2.2.3 脉冲离子电渗对UFH 胶液的大鼠直肠吸收
• 6.2.3 结果和讨论
• 6.2.3.1 LMWH 离子电渗大鼠直肠给药
• 6.2.3.2 LMWH 胶液的脉冲离子电渗大鼠直肠给药
• 6.2.3.3 UFH 脉冲离子电渗大鼠直肠给药
• 6.2.4 小结
• 6.3 LMWH 胶液的离子电渗家兔直肠给药研究
• 6.3.1 仪器和材料
• 6.3.2 实验方法
• 6.3.2.1 兔血浆中LMWH 的测定
• 6.3.2.2 家兔皮下注射给药
• 6.3.2.3 LMWH 胶液的家兔直肠给药方法
• 6.3.2.4 LMWH 胶液离子电渗家兔直肠给药
• 6.3.3 结果和讨论
• 6.3.3.1 兔血浆中LMWH 的测定
• 6.3.3.2 直流电电渗（0.33 mA/cm2，4.5V）对LMWH 胶液的家兔直肠离子电渗给药
• 6.3.4 小结
• 6.3.5 本章小结
• 全文总结
• 攻读学位期间发表的学术论文与专利申请
• 参考文献
• 致谢