论文摘要
研究目的观察儿宝颗粒工具药对胃肠激素VIP、MTL、Ghrelin信号通路的影响,进一步阐明厌食症胃肠动力紊乱发生机制及运脾开胃法疗效机理,为临床应用提供实验依据。研究方法用组织块培养法分离原代胃窦平滑肌细胞并经免疫组化法鉴定。血清药理学方法制备儿宝颗粒大鼠含药血清,将含药血清作用于胃窦平滑肌细胞,通过免疫印迹、实时荧光定量法比较含药血清与正常血清作用于细胞后胃肠肽及相应受体的表达变化,从而观察儿宝颗粒含药血清对胃肠肽VIP、MTL、Ghrelin信号通路的调节,明确儿宝颗粒是否对VIP和MTL及Ghrelin具有调节作用,以及处理后信号蛋白之间是否存在协同或拮抗的关系。结果实时荧光定量PCR结果显示：在儿宝颗粒含药血清作用24小时后,VIP及其受体1、VIP受体2, Ghrelin的mRNA表达量均较正常血清组显著升高,Ghrelin受体GHSR的mRNA表达也出现上调趋势,但在0.05水平上无显著性,而胃动素MTL的mRNA表达无显著变化。免疫印迹结果显示：经儿宝颗粒含药血清作用48小时之后,胃窦平滑肌细胞VIP受体1的表达量显著升高。结论经儿宝颗粒含药血清处理后,胃肠激素VIP、VIP受体以及Ghrelin的表达均增加,说明儿宝颗粒可调节胃窦平滑肌细胞VIP及Ghrelin信号通路,可能是其改善胃肠蠕动、恢复胃肠功能进而治疗小儿厌食症的分子生物学机理之一。
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