论文摘要
单倍体育种是加速育种进程、提高育种效率的有力手段之一。传统的单倍体育种技术多是采用花药或花粉培养的手段获得单倍体植株,继而通过染色体加倍技术获得纯合、稳定的加倍单体材料。但因花药或花粉培养过程较为复杂,且培养过程中易产生无性变异,因而制约了其大规模应用。而利用玉米花粉诱导小麦产生单倍体进而加倍培育双单倍体,因其技术简便可行,其应用逐渐增多。本研究拟探讨建立玉米花粉诱导小黑麦单倍体技术,并对其单倍体诱导率的遗传规律进行研究,旨在为小黑麦育种提供一种方便高效的育种技术提供理论依据。本文选用了不同基因型的春性小黑麦材料以及15个冬性小黑麦材料,分别采用四种不同的诱导方式,即玉米花粉诱导与化学诱导剂协同处理(玉米花粉诱导与二甲基亚砜40m1/L、秋水仙素4g/L、肌醇100mg/L、吲哚乙酸20mg/L和2,4-D 20mg/L刺激相结合)、单纯化学诱导剂处理(二甲基亚砜40m1/L、秋水仙素4g/L、肌醇100mg/L、吲哚乙酸20mg/L和2,4-D 20mg/L处理)、玉米花粉诱导与激素刺激相结合(玉米花粉诱导后经100mg/L 2,4-D与30 m1/L DMSO处理)和单纯激素刺激(仅用100mg/L 2,4-D+30ml/L DMSO处理),并对不同的单倍体胚拯救培养基、不同玉米基因型以及不同小黑麦基因型对小黑麦单倍体得胚率影响等进行分析,并以12个得胚率差异较大的春小黑麦基因型为材料,配置了6×6完全双列杂交,对其亲本及F1后代的得胚率的遗传力、遗传相关、配合力及后代的杂种优势进行了分析,为建立玉米诱导小黑麦单倍体技术及其遗传规律进行探索奠定了基础。主要研究结果如下:1.在供试的四种诱导方式中,其单倍体得胚率以玉米花粉授粉后再以100mg/L2,4-D与30ml/LDMSO处理为最高(6.65%),在玉米花粉授粉后再经二甲基亚砜40ml/L、秋水仙素4g/L、肌醇100mg/L、吲哚乙酸20mg/L和2,4-D 20mg/L协同处理的效果次之(4.42%)。2.不同基因型冬小黑麦经玉米花粉诱导与激素处理后均能产生小黑麦单倍体胚,但不同小黑麦基因型的得胚率存在差异,其中得胚率最高基因型的颖果率可达39.80%,而其最低基因型的得胚率仅为1.37%。除小黑麦基因型的影响外,不同玉米类型的花粉诱导效率也存在差异,其中以爆裂玉米花粉诱导效率最高(4.71%),其次为普通玉米(2.94%),甜玉米花粉的诱导效果最差(1.76%)。3.诱导所形成的单倍体胚在改良1/2MS和B5培养基上进行胚拯救时,尽管两种培养基整体上在不同基因型的单倍体胚成苗率间未检测到显著差异,但不同小黑麦基因型的单倍体胚拯救效率在两种培养基间还存在差异,可见不同基因型小黑麦单倍体胚应选择不同类型最适拯救培养基。4.小黑麦单倍体诱导效果的遗传效应分析表明,各单倍体诱导性状均符合加性-显性遗传模型,且多数性状表现部分显性,其中得胚率的遗传以基因加性效应为主,颖果率、颖果得胚率以及出苗率的遗传同时受基因加性效应和显性效应的影响。诱导率的杂种优势较强,且亲本遗传力较高,可以根据亲本的配合力高低来选择优良F1代进行杂交实验。本研究建立了玉米花粉诱导小黑麦单倍体育种技术;初步明确了玉米花粉诱导小黑麦产生单倍体的遗传规律。该研究将对指导小黑麦单倍体育种技术提供了坚实的理论依据。
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