阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因的克隆与表达

论文摘要

研究背景及目的:阴道毛滴虫（Trichomonas vaginalis）是寄生在人体泌尿生殖道的一种常见病原体,可引起阴道毛滴虫病（Xrichomoniasis）。自1836年Donné首次描述该虫的特点及所致疾病的症状以来,至今仍是威胁人类健康的主要的性传播疾病之一。铁氧还蛋白（Ferredoxin Fd）是自然界分布很广的低分子量铁硫蛋白,最常见的是[2Fe-2S]Fd,在阴道毛滴虫中它是氢化酶体（Hydrogenosome）电子传递链的主要成分,它参与丙酮酸盐:铁氧还蛋白氧化还原酶（pyruvate:ferredoxin oxidoreductase PFOR）介导的丙酮酸盐氧化脱羧形成乙酰辅酶A和ATP反应,是此过程中的电子供体,通过电子传递参与了—线抗滴虫药物甲硝唑（metronidazole）在体内的活化。尽管应用甲硝唑已经数十年,其抗药性的发展还是较缓慢。然而,近年来临床上甲硝唑抗性株的发现和不断增加,使得对甲硝唑在体内的作用机制和抗药性的发展的研究就尤为重要。Quon和Johnson等发现滴虫抗性株细胞中Fd明显低于敏感株,Northern杂交分析,Fd的mRNA水平下降50-65%,基因转录下降40-65%,Land等通过实验发现药物高度抵抗的虫株内Fd mRNA的水平下降90%,免疫印记显示,在高度抵抗株内几乎检测不到PFOR和Fd,甲硝唑在抗药株内活化减少。本课题对Fd基因及蛋白质的研究将有助于阐明阴道毛滴虫抗药株抗性机制。 本研究分两个部分,第一部分:目的:Fd基因的克隆。方法:从我国四川地区临床分离阴道毛滴虫（阴道毛滴虫四川分离株—1）,应用螯合树脂

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 Fd基因的扩增与克隆
• 引言
• 材料方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 阴道毛滴虫Fd原核表达及真核表达质粒的构建
• 引言
• 材料方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 在读期间发表论文
• 致谢
• 声明