心室成纤维细胞向心肌样细胞转化用于心肌重建的实验研究

论文题目: 心室成纤维细胞向心肌样细胞转化用于心肌重建的实验研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 内科学

作者: 汤成春

导师: 黄峻,曹克将

关键词: 心室成纤维细胞,培养,消化,差速贴壁,氮胞苷,诱导,细胞移植,心肌梗死,心功能

文献来源: 南京医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: 第一部分 5-氮胞苷诱导体外培养大鼠心室成纤维细胞向心肌样细胞转化的研究第一节大鼠心室成纤维细胞的分离、培养目的:探讨大鼠心室成纤维细胞分离、培养的方法。方法:无菌条件下剪取SD大鼠乳鼠心室肌,采用胰酶消化的方法获取心室肌细胞,差速贴壁法分离心室成纤维细胞,进行体外培养、扩增,并观察所培养细胞的形态。结果:心室成纤维细胞在体外生长、增殖良好,刚分离出的心室成纤维细胞呈类圆形、三角形或多角形,生长缓慢;24h时细胞体积增大,呈三角形或多角形;48h-72h逐渐成梭形;消化传代后细胞生长速度加快,30min后开始贴壁,12h后贴壁完全,生长开始加速,细胞逐渐呈梭形平行排列,约3-4d即可传代一次。结论:胰酶消化、差速贴壁法是一种适合的心室成纤维细胞的培养方法。第二节 5-氮胞苷诱导体外培养大鼠心室成纤维细胞向心肌样细胞转化目的:研究5-氮胞苷诱导体外培养大鼠心室成纤维细胞的转归。方法:SD大鼠(清洁级)乳鼠10只,采用胰酶消化、差速贴壁法分离、培养心室成纤维细胞;取第3代细胞处于亚融合状态时用于实验,共分为7组:对照组、5-氮胞苷2.5,5,7.5,10,15,20μmol/L诱导组;实验前24h换为无血清培养基,并在培养基中加入不同浓度的5-氮胞苷,作用24h后洗去5-氮胞苷,继续完全培养基中培养2wk;相差显微镜及透视电镜观察对照组和诱导组细胞的形态;免疫组化、RT-PCR法检测细胞肌球蛋白重链β(β-MHC)、肌钙蛋白I(cTn I)及连接蛋白43的表达。结果:对照组心室成纤维细胞呈梭形均匀生长,平行排列,胞浆内线粒体少,粗面内质网丰富,可见微丝,未见

论文目录:

缩略语

中文摘要

英文摘要

前言

第一部分 5-氮胞苷诱导体外培养大鼠心室成纤维细胞向心肌样细胞转化的研究

第一节大鼠心室成纤维细胞的分离、培养

第二节 5-氮胞苷诱导体外培养大鼠心室成纤维细胞向心肌样细胞转化

第二部分 5-氮胞苷诱导的大鼠心室成纤维细胞移植治疗心肌梗死的实验研究

第一节大鼠心肌梗死模型的建立

第二节局部注射5-氮胞苷诱导的心室成纤维细胞修复心肌梗死后心肌损伤的研究

第三节 5-氮胞苷诱导的心室成纤维细胞对急性心肌梗死后心功能的影响

第三部分 5-氮胞苷治疗心肌梗死的实验研究

第一节猪心肌梗死模型的建立

第二节局部注射5-氮胞苷修复心肌梗死后心肌损伤的研究

第三节 5-氮胞苷对心肌梗死后心功能的影响

致谢

综述细胞移植修复心肌损伤研究进展

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论文独创性声明；论文使用授权声明

发布时间: 2005-07-22

参考文献

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