鼻咽癌细胞对紫杉醇的耐药性与FOLR1表达的相关性研究

论文摘要

目的为了探讨鼻咽癌抵抗化疗药物的机制,本研究试图建立人鼻咽癌细胞对紫杉醇（Taxel）耐药的细胞株HNE-2/Taxol,并且探讨FOLR1与鼻咽癌细胞对紫杉醇敏感性以及耐药性的关系;方法1.用紫杉醇为诱导剂,在体外以药物大剂量冲击和逐渐增加剂量相结合的方法作用于人鼻咽癌细胞株HNE-2细胞,试图建立耐紫杉醇鼻咽癌细胞株HNE-2/Taxol;2.采用集落形成试验（colony formation assay）分别检测鼻咽癌细胞株CNE-2,CNE-1,HNE-2及其耐药细胞株对紫杉醇的敏感性(IC50),并确定耐药细胞株的耐药指数（RI）;3.用半定量逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）测定FOLR1在鼻咽癌亲本细胞株CNE-1,CNE-2,HNE-2及其耐药细胞株的表达水平。结果1.成功地建立了抵抗紫杉醇的耐药细胞株HNE-2/Taxol,为研究紫杉醇的耐药机制提供了实验模型;将已建立的鼻咽癌耐药细胞株HNE-2/T5和HNE-2/T10进行集落形成实验3次,确定其IC50值分别为1.70 ng/ml和5.23ng/ml,耐药指数分别为1.42±0.15,4.36±0.21;2.鼻咽癌亲本细胞株CNE-2,CNE-1,HNE-2半数抑制量(IC50)分别为5.02 ng/ml,0.86ng/ml,1.20ng/ml;3.从RNA水平检测FOLR1在鼻咽癌细胞株CNE-1,CNE-2,HNE-2表达,发现FOLR1表达量与癌细胞株紫杉醇药物的敏感性呈负相关,相关系数R2=0.9923（p＜0.05）;4.半定量RT—PCR检测FOLR1在鼻咽癌耐药细胞株HNE-2/T5和HNE-2/T10中表达,发现FOLR1表达量与鼻咽癌耐药细胞的耐药指数呈正相关,相关系数R2=0.9944（P＜0.05）。结论1.本实验所建立的HNE-2/Taxol是一株对紫杉醇耐药的人鼻咽癌耐药细胞株,是临床上研究鼻咽癌化疗过程中获得性耐药及紫杉醇耐药产生机理的重要实验模型;2.FOLR1基因在野生型鼻咽癌亲本细胞株CNE-1,CNE-2,HNE-2中表达量与其对紫杉醇的敏感性呈负相关（p＜0.05）;3.FOLR1基因与鼻咽癌耐药细胞株HNE-2/Taxol抵抗紫杉醇的耐药表型呈正相关（p＜0.05）;4.FOLR1基因可能成为逆转鼻咽癌细胞抵抗紫杉醇耐药及肿瘤治疗的靶分子。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 第三章 结果
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间主要研究成果