针灸预处理对老年性痴呆模型大鼠Wnt信号转导通路影响的实验研究

论文摘要

目的建立AD大鼠模型,探讨针灸预处理对老年性痴呆模型大鼠Wnt1信号转导通路的影响,揭示针灸防治AD的机制。方法在大鼠双侧海马区注射Aβ25-35,建立AD大鼠模型,分别随机分为正常组、假手术组、模型组、预艾灸组、预电针组、预电针加灸组,一共6组,每组各20只。通过预电针和预艾灸大鼠的百会和肾俞穴28天后,观察各组大鼠wnt信号转导相关指标的变化。通过Morris水迷宫检测行为学,免疫组化和免疫印迹检测大鼠海马组织轴蛋白和β-连环蛋白,通过酶联免疫法检测蛋白质磷酸酶2A和糖原合酶激酶-3β的活性,通过实时定量PCR技术检测Wnt1基因表达,并通过超微电镜观察海马组织超微病理变化。结果1.水迷宫检测行为学发现模型组大鼠学习记忆能力有明显损害,其平均潜伏期、经过中心区域的比例、平均游过的路径距离与正常组和假手术组有显著差异（p<0.01）,而预电针和预艾灸对其有明显的预防和改善作用,其中以预电针加灸的疗效最好。2.通过免疫组化和免疫印迹观察到模型组大鼠海马组织轴蛋白表达明显上调,β-连环蛋白表达明显下调,而预艾灸、预电针、预电针加灸对此具有不同程度的调节作用。3.通过酶联免疫法观察到模型组GSK-3β的活性比正常组亦明显升高（p<0.01）,而PP2A的活性比正常组和假手术组明显降低。预电针和预艾灸均可起到调节作用。4.病理组织切片观察到AD大鼠脑组织海马区神经元均有不同程度的破坏,预电针和预艾灸对海马区神经元的损伤具有明显的保护作用。5.通过实时定量PCR技术检测Wnt1基因表达,观察到模型组大鼠海马Wnt1信号异常减弱,与正常组和假手术组比较有显著性差异（p<0.01）。而预艾灸组、预电针组、预电针加灸组大鼠海马Wnt1的信号均有不同程度的增强。结论1.老年性痴呆的基本病机为髓海不足、神机失用,针灸治疗的法则为益精填髓,醒神开窍。百会和肾俞可作为防治该病的首选要穴。2.预电针和预艾灸对于AD模型大鼠的神经功能具有明显的保护作用,有效改善AD模型大鼠学习和记忆功能,减少神经元的损伤,以预电针和预艾灸联合运用疗效最佳。3.预电针和预艾灸能明显下调AD模型大鼠海马组织Axin表达,上调β-连环蛋白表达,降低GSK-3β的活性,升高PP2A的活性,增强Wnt1基因表达。4.针灸防治老年性痴呆的作用机制可能是通过调节Wnt信号转导通路,影响了学习记忆相关酶及蛋白在海马区的表达而发挥作用的。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 缩略词表
• 前言
• 实验研究
• 实验一 针灸预处理对AD大鼠学习记忆行为的影响
• 实验二 针灸预处理对AD大鼠海马组织Axin和β-Catenin的影响
• 实验三 针灸预处理对AD大鼠海马组织GSK-3β和PP2A的影响
• 实验四 针灸预处理对AD大鼠wnt1表达的影响
• 实验五 针灸预处理对AD大鼠海马组织超微形态学的影响
• 讨论
• 1 中医对老年性痴呆的认识
• 1.1中医学对老年性痴呆认识的沿革
• 1.2 中医对老年性痴呆的发病机理的认识
• 1.3 历代针灸医家对老年性痴呆的治验
• 1.4 治疗法则
• 1.5 选穴依据
• 1.6 针灸刺激方法选择的依据
• 1.7 针灸"治未病"的理论基础及作用机制
• 2 现代医学对老年性痴呆的认识
• 2.1 现代医学老年性痴呆的发病机制的认识
• 2.2 AD模型大鼠造模方法的选择
• 3 针灸预处理对老年性痴呆的治疗作用及治疗机理
• 结语
• 参考文献
• 问题与展望
• 综述
• 综述（一）
• 综述（二）
• 综述（三）
• 参考文献
• 致谢