甘草酸差向异构体分离分析与稳定性研究

论文摘要

甘草酸（glycyrrhizic acid，GL）是豆科（leguminosae）植物甘草（Radix Er Rhizoma Glycyrrhizae ）的主要活性成分，为差向异构体。甘草中甘草酸以α体和β体两种构型存在，在一定条件下相互转化。本文对α-甘草酸和β-甘草酸的同时含量测定方法和稳定性进行了研究。本研究采用半制备液相色谱分离技术，对α，β-甘草酸二铵原料药和β-甘草酸铵原料药进行分离纯化，制备得到α-甘草酸和β-甘草酸的对照品，为进一步研究提供了物质基础。本研究首次建立了α-甘草酸和β-甘草酸在甘草药材中同时含量测定的高效液相色谱法。采用Hypersil C18柱（250 mm×4．6 mm i．d，5μm），流动相为甲醇-1％醋酸水（66：34，v／v），检测波长为250 nm，流速为1．0 mL·min-1，柱温为35℃。α-甘草酸和β-甘草酸的线性范围分别为0．010 44～0．208 8mg·mL-1（r=0．999 5）和0．05 1 88～1．038 mg·mL-1（r=0．999 6）。平均回收率（n=9）分别为99．7％和99．4％，RSD（n=9）分别为2．1％和2．3％。采用本研究方法，对19批样品中的甘草酸差向异构体进行了含量测定，除河北Ⅰ产地外其他产地α-甘草酸和β-甘草酸的含量总和都大于2％。β-甘草酸与α-甘草酸的比值都在13：1左右。本研究首次建立了α-甘草酸二铵和β-甘草酸二铵在甘草酸二铵注射剂中同时含量测定的高效液相色谱法。采用Ultimate XB-C18柱（250 min×4．6 mm i．d，5μm），流动相为甲醇-1％醋酸水（60：40v／v），流速为1．0 mL·min-1，柱温为35℃。α-甘草酸和β-甘草酸的线性范围分别为0．010 92～0．218 4mg·mL-1（r=0．999 8）和0．005 188～0．103 8mg·mL-1（r=0．999 8）。平均回收率（n=9）分别为98．5％和99．1％，RSD（n=9）分别为2．4％和2．1％。采用本方法，对3批样品进行了测定，结果表明甘草酸二铵注射剂中α-甘草酸和β-甘草酸的含量都较大。本方法简便，结果准确，重现性好。甘草酸在甘草中以α体和β体共存，在一定条件下相互转化。但转化条件并无报道。本研究考察了甘草提取、浓缩及干燥过程中的提取时间和加热温度对α-甘草酸和β-甘草酸稳定性的影响，同时还考察了放置时间和光照对α-甘草酸和β-甘草酸对照品稳定性的影响。结果表明，甘草药材提取过程中α体和β体不相互转化，但随着提取时间的增长，两者峰面积逐渐下降；不同温度下甘草提取液中α体和β体含量稳定不变。放置时间和光照使甘草酸差向异构体混合对照品（β体：α体=26：1）峰面积略有改变，存在α体向β体缓慢转化的趋势，在实验条件下两者达到33：1。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1.1 甘草酸的研究概况
• 1.2 甘草酸的药理作用
• 1.3 差向异构体简介
• 1.4 立题依据和研究思路
• 第二章 甘草酸差向异构体对照品的制备
• 2.1 α-甘草酸对照品的制备
• 2.2 β-甘草酸对照品的制备
• 2.4 小结
• 第三章 甘草酸差向异构体的含量测定方法研究
• 3.1 甘草药材中甘草酸差向异构体的同时含量测定
• 3.2 甘草酸二铵注射剂中甘草酸二铵差向异构体的同时含量测定
• 第四章 甘草酸差向异构体的稳定性研究
• 5.1 甘草药材中甘草酸差向异构体的稳定性
• 5.2 甘草酸差向异构体对照品的稳定性
• 第五章 结果与讨论
• 参考文献
• 发表文章
• 致谢