不同价态砷对大鼠砷代谢相关酶及MRP2影响的研究

论文摘要

目的：分析亚砷酸钠（iAS3+）和砷酸氢钠（iAS5+）染毒后,对大鼠二氢尿嘧啶脱氢酶（NAD）、嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）、亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）、髓过氧化酶（MPO）活力及多药耐药相关蛋白2（MRP2）表达的影响,寻找不同价态砷体内代谢间的差异,为进一步阐明砷毒作用机制提供依据。方法：70只Wistar大鼠随机分成7组,第1组为正常对照组,给予饮用去离子水；第2-4组为染毒无机三价砷（iAS3+）高、中、低剂量组,分别给予20.0、6.7、2.2mg/kg体质量亚砷酸钠溶液；第5-7组为染毒无机五价砷（iAS5+）高、中、低剂量组,分别给予20.0、6.7、2.2mg/kg体质量砷酸氢钠溶液。各组大鼠于染毒90天后处死,采集血样,取肝脏组织,应用酶联免疫分析法（ELISA）测定大鼠血清NAD、肝脏中NAD、PNP、MTHFR、MPO活力的变化,用蛋白印记法（Western-blotting）测定MRP2表达的变化。结果：1.血清和肝脏中iAS3+和iAS5+高剂量组的NAD活力均低于对照组（P<0.05）,相同受试物与低剂量组比较,iAS3+的高、中剂量组的NAD活力均低于低剂量组（P<0.05）,iAS5+的高剂量组的NAD活力低于低剂量组（P<0.05）,中剂量组的NAD活力高于低剂量组（P<0.05）,iAS3+和iAS5+同一剂量组比较,iAS3+高剂量组的NAD活力高于iAS5+高剂量组（P<0.05）。2.iAS3+的低剂量组和iAS5+中剂量组PNP的活力高于对组照（P<0.05）,不同受试物同剂量组比较,iAS3+高、中剂量组的PNP活力低于iAS5+高、中剂量组,而iAS3+低剂量组的PNP活力高于iAS5+低剂量组（P<0.05）。3.与对照组相比,iAS3+的高、中、低剂量组和iAS5+高中剂量组MTHFR的活力均升高（P<0.05）；相同受试物与低剂量组比较,iAS3+的高剂量组和iAS5+的高、中剂量组MTHFR的活力均升高（P<0.05）；不同受试物同一剂量组比较,iAS3+高、中、低剂量组的MTHFR活力均高于iAS5+的（P<0.05）。4.与对照组相比,iAS3+和iAS5+的高、中、低剂量组MPO的活力均升高（P<0.05）；相同受试物与低剂量组比较,iAS3+和iAS5+的高、中剂量组MPO的活力均降低（P<0.05）；不同受试物同一剂量组比较,iAS3+高、中剂量组的MPO活力均比iAS5+的低（P<0.05）。5.与对照组相比,iAS3+的高、中、低剂量组和iAS5+高中剂量组MRP2蛋白表达均增加（P<0.05）；相同受试物与低剂量组比较,iAS3+和iAS5+的高剂量组MRP2蛋白表达均增加（P<0.05）；不同受试物同剂量组比较,iAS3+高、中、低剂量组的MRP2蛋白表达均强于iAS5+高、中、低剂量组（P<0.05）。结论：一定量的iAS5+可以使大鼠血、肝脏组织中NAD活力上升,剂量过高反面抑制其活性,iAS3+对NAD主要表现为抑制作用。砷可以影响肝脏组织中PNP、MTHFR、MPO的表达,导致其活性增加。随着砷染毒剂量的增加,MRP2农达逐渐上调,从面致使肝细胞膜上MRP2表达代偿性改变。iAS3+组MRP2表达量要大于iAS5+组,可能是由于两者有不同的外排或转运途径,导致在肝脏的代谢径路不同。肝脏中不同价态砷的代谢和毒性与NAD、PNP、MTHFR、MPO的活性和MRP2表达有密切关系。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 内容与方法
• 1. 实验材料
• 2. 实验方法
• 3. 统计学处理
• 4. 质量控制
• 5. 技术路线图
• 结果
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学位论文
• 导师评阅表