枇杷果实类胡萝卜素积累的初步研究

论文摘要

本文以“大红袍”、“青种”为红沙、白沙两类枇杷的代表品种,测定了枇杷果实着色过程中果肉类胡萝卜素组分及含量的变化;观察了果实色泽形成过程中质体的超微解剖结构变化;克隆了番茄红素β环化酶和β-胡萝卜素羟化酶等两个类胡萝卜素合成基因片段。结果如下:（1）果实进入着色期后,叶黄质含量迅速下降,至果实成熟时下降平缓或略有上升,而其它4种成分:α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、β-隐黄质和玉米黄素均呈上升趋势,早期上升缓慢,采收前7天上升迅速;α、β-胡萝卜素积累多少是造成“大红袍”、“青种”枇杷果肉色泽深浅的主要色素,而叶黄素类则对枇杷果肉类胡萝卜素的含量高低影响不大;（2）果实色泽形成过程中,质体的超微解剖结构发生了变化。早期绿色果皮的特点是叶绿体具有典型的基粒-基粒类囊体结构,叶绿体结构完好;在黄绿色时期叶绿体类囊体系统解体,质体已不具备叶绿体的典型结构;在黄色、橙黄色的果皮中,质体球数增加,脂类物质增多,从而为脂溶性色素-类胡萝卜素在果实成熟期的大量积累提供了基础。（3）根据蔷薇科植物番茄红素β环化酶（LYC）基因的保守区序列,设计1对PCR引物,以枇杷基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增长约300 bp的DNA片段,克隆入pMD-18T载体,测得该基因片段长310 bp,编码102个氨基酸,属于开放阅读框的一部分,不含内含子。在GenBank中进行同源性检索表明该序列与苹果番茄红素β环化酶基因同源性为97%,由此推测这个基因属于枇杷番茄红索β环化酶基因;（4）根据蔷薇科植物β-胡萝卜素羟化酶基因的保守区序列,设计一对PCR引物,以枇杷基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增长约450bp的DNA片段,克隆入pMD-18T载体,测得该基因片段长440 bp,编码145个氨基酸,属于开放阅读框的一部分,不含内含子。在GenBank中进行同源性检索表明该序列与苹果β-胡萝卜素羟化酶基因同源性为95%,推测它属于枇杷的β-胡萝卜素羟化酶基因。

论文目录

• 缩略语表
• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1 枇杷种质资源
• 1.1 起源与分布
• 1.2 枇杷近缘属种和分类
• 1.3 枇杷的主要品种资源
• 1.4 枇杷属的种质资源收集与保存
• 2 生产现状
• 2.1 栽培现状
• 2.2 世界枇杷产量与市场
• 2.3 栽培技术研究
• 3 枇杷栽培生理研究
• 3.1 抗逆性研究
• 3.2 果实类胡萝卜素的研究
• 3.3 果实采后生理及保鲜
• 4 枇杷生物技术的研究
• 4.1 组织培养
• 4.2 分子生物学研究
• 5 选题依据及意义
• 第二章 枇杷果色形成过程中质体超微结构的观察
• 1 材料与方法
• 2 结果与分析
• 2.1 果皮细胞的解剖结构
• 2.2 绿色果皮中质体的超微结构
• 2.3 黄绿色果皮中质体的超微结构
• 2.4 黄色果皮中质体的超微结构
• 2.5 橙黄色果皮中质体的超微结构
• 3 讨论
• 第三章 枇杷果实发育期间不同类胡萝卜素含量变化
• 1 材料和方法
• 1.1 材料和试剂
• 1.2 枇杷类胡萝卜素提取和纯化
• 1.3 枇杷类胡萝卜素HPLC 分析
• 2 结果与分析
• 2.1 类胡萝卜素总量的变化
• 2.2 类胡萝卜素各组分的变化
• 2.3 胡萝卜素与叶黄素类物质的变化
• 3 讨论
• 第四章 枇杷番茄红素β环化酶基因片段的克隆和序列分析
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 PCR 产物的扩增和克隆
• 2.2 基因序列与同源性分析
• 3 讨论
• 第五章 枇杷β-胡萝卜素羟化酶基因片段的克隆和序列分析
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 PCR 产物的扩增和克隆
• 2.2 基因序列与同源性分析
• 2.3 基因序列同源性分析
• 3 讨论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文目录