普罗布考对兔动脉粥样硬化模型中斑块稳定性及热休克蛋白60表达的影响

论文摘要

目的:冠心病和脑卒中是当今严重危害人类健康的常见病,动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）作为心脑血管疾病的共同病理基础,一个多世纪以来受到各国学者的普遍关注和高度重视。深入探讨AS的发病机制、诊断方法和治疗措施,已成为全球范围的重大课题。近年来研究认为炎症及免疫反应在动脉粥样硬化的发生发展中发挥了十分重要的作用。热休克蛋白60（heat shock protein,HSP60）作为自身抗原参与了自身免疫炎症的过程,可能在动脉粥样硬化的发生和发展中起重要作用。普罗布考具有调脂、抗炎、抗氧化和抗动脉粥样硬化的作用,但由于其可降低高密度脂蛋白胆固醇,使其在临床应用上受到影响。后期的研究证明,普罗布考虽然降低血高密度脂蛋白胆固醇浓度,但并不降低其转运胆固醇酯的作用,甚至增加其转运能力。有关普罗布考抗AS作用及机制的研究一直是人们关注的热点。本研究通过高脂喂养和球囊损伤建立动脉粥样硬化兔模型,观察动脉粥样硬化兔模型血清和髂动脉斑块中HSP60的表达及普罗布考对HSP60表达的影响,进而阐明HSP60在动脉粥样硬化发生发展中的作用机制及其与斑块稳定性的关系,并为诊治动脉粥样硬化提供一条新的思路。方法:将20只新西兰大白兔按不同处理方式随机分为3组:正常对照组（n=6）、高脂组（n=8）、普罗布考组（n=6）。对照组予以普食喂养。高脂组和普罗布考组高脂喂养（高脂饲料:1%胆固醇+5%猪油+10%蛋黄粉+84%普通饲料）,4周后高脂组和普罗布考组均于髂动脉处行球囊内膜剥脱术,对照组行假手术（仅分离出髂动脉不行球囊损伤）。术后高脂组和普罗布考组继以高脂喂养,普罗布考组每只加用普罗布考1000 mg/d口服。10周后气栓法处死动物,取损伤侧髂动脉组织固定,蜡块包埋,切片,行HE染色和免疫组化染色。显微镜下测量动脉斑块面积和血管面积,计算斑块与血管百分比,并测量斑块中HSP60阳性表达的面积。实验中定期测量动物的体重并于4周、7周、10周时抽血测量血脂,在4周和10周时抽血测量血清中的C反应蛋白、白介素6、氧化低密度脂蛋白、丙二醛、超氧化物歧化酶和热休克蛋白60的水平。采用SPSS11.5统计软件对数据进行组内和组间比较和相关分析。结果:①实验结束时三组各6只家兔进入统计学分析。实验结束时各组动物体重较实验前均显著增加（P＜0.05）,但同时期各组之间动物体重无统计学差异。②在连续喂养高脂饲料的4周、7周和10周时高脂组和普罗布考组兔血清血脂较对照组显著升高（P＜0.05）。③实验结束时取球囊损伤处动脉及正常对照组假手术处动脉HE染色可见高脂组和普罗布考组动脉粥样硬化模型建立成功,正常对照组内膜完整光滑,未见动脉粥样硬化病变,且普罗布考组斑块与血管面积比低于高脂组（P＜0.05）。④血清IL-6、CRP、ox-LDL、MDA、SOD、HSP60正常对照组无明显变化,高脂组和普罗布考组4周和10周时均高于同时期正常对照组（P＜0.05）,普罗布考组4周时（用药前）血清IL-6、CRP、ox-LDL、MDA、HSP60与高脂组无明显差别,10周时水平低于高脂组（P＜0.05）;而高脂组和普罗补考组同时期两组之间SOD均无差别。高脂组和普罗布考组两者分别组内与4周时相比,10周时血清IL-6、CRP、ox-LDL、MDA、HSP60水平明显升高（P＜0.05）:而SOD水平下降（P＜0.05）。⑤正常对照组可见动脉内膜低水平HSP60表达,高脂组和普罗布考组内膜及中膜均可见大量HSP60的表达,而普罗布考组内膜和中膜HSP60的表达较高脂组明显减少（P＜0.05）。结论1、普罗布考可延缓兔髂动脉球囊损伤后内膜增生和延缓AS进程,且该抗AS作用独立于降脂作用之外。2、普罗布考可降低血清中的IL-6、CRP、ox-LDL、MDA水平,具有抗炎、抗氧化作用。3、HSP60在兔AS模型中的表达水平明显增加,与斑块的稳定性有关,普罗布考抑制兔AS模型血清和斑块中HSP60的表达,可能具有稳定斑块的作用。普罗布考抑制HSP60表达可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 材料和方法
• 1 材料
• 2 方法
• 结果
• 1 实验动物情况
• 2 普罗布考对血脂的影响
• 3 各个血清指标的变化
• 4 病理形态学观察
• 4 免疫组织化学分析
• 5 相关性分析
• 讨论
• 1 IL-6、CRP与动脉粥样硬化
• 2 ox-LDL、MDA、SOD与动脉粥样硬化
• 3 HSP60与动脉粥样硬化
• 小结
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 综述
• 普罗布考抗动脉粥样硬化的研究进展
• 参考文献
• 致谢