论文摘要
目的探讨Caveolin-1对血管吻合术后TNF-α、IL-6和IL-10表达的影响。方法本实验对家兔颈总动脉离断后行端端吻合手术,建立血管吻合的动物模型。40只成年家兔取自南华大学实验动物部,随机分为4组:正常组、手术组、空转染组、Caveolin-1转染组。分别于术后7d、14d处死家兔,取术后7d标本用于实时荧光定量PCR和Western Blot检测,14d的标本用于HE染色及免疫组化。采用苏木精-伊红染色,观察吻合口血管动脉内膜变化情况;分别应用实时荧光定量PCR、Western Blot和免疫组化检测家兔吻合术后血管组织中Caveolin-1、TNF-α、IL-6、IL-10的表达水平。结果1、组织切片HE染色形态学观察,手术组和空转染组术后14d血管内膜增生明显,血管壁增厚;而转染组血管内膜仅有局部增生,血管壁增厚不如手术组和空转染组明显。2、实时荧光定量PCR显示,Caveolin-1转染组TNF-α、IL-6mRNA表达水平明显低于手术组和空转染组,但高于对照组(P<0.05)。Caveolin-1转染组IL-10mRNA表达水平明显高于手术组、空转染组和对照组(P<0.05)。与正常组比较,手术组和空转染组中Caveolin-1mRNA表达明显降低(P<0.05),而转染组Caveolin-1mRNA表达明显高于手术组(P<0.05)。3、WesternBlot检测显示Caveolin-1在各组均有表达,与正常组比较,手术组和空转染组中Caveolin-1蛋白表达明显降低(P<0.05),而转染组Caveolin-1蛋白表达明显高于手术组(P<0.05)。与正常组比较,手术组和空转染组中TNF-α、IL-6蛋白表达明显增强(P<0.05),转染组TNF-α、IL-6蛋白表达较手术组明显降低(P<0.05)。与正常组比较,手术组和空转染组中IL-10蛋白表达增强(P<0.05),转染组IL-10蛋白表达较手术组明显增强(P<0.05)。4、免疫组化染色显示转染组TNF-α、IL-6表达较手术组和空转染组明显降低,IL-10的表达较手术组和空转染组明显增强。结论1、Caveolin-1能抑制家兔颈总动脉吻合口术后内膜的增殖。2、Caveolin-1可以抑制血管吻合口术后血管组织的TNF-α、IL-6的表达,同时上调IL-10的表达,调节炎症反应。
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