论文摘要
背景：周围神经损伤是常见的骨科疾病，多发生于外力创伤，无论在战时和平时都较常见。如果治疗不当，将严重影响患者的四肢活动。目前治疗方法应用较广泛的是自体神经移植术，然而神经供体有限，手术的开展受到限制。随着近年来组织工程学的发展，Schwann细胞与生物材料复合修复周围神经缺损是一种被广泛应用的实验手段。Schwann细胞是外周神经的主要结构和功能细胞，并且在周围神经的再生修复中起重要作用。但由于取材和体外培养的困难，也限制了其应用。人脐血间充质干细胞的分离纯化、扩增培养，以及向神经样细胞诱导分化的成功，为修复周围神经损伤提供了一种新的组织工程学种子细胞来源。目的：探讨将脐血间充质干细胞应用于组织工程化人工神经，修复大鼠10mm坐骨神经缺损的治疗效果，为脐血间充质干细胞修复周围神经损伤的临床应用提供实验依据。方法：1．无菌条件下收集正常足月产胎儿的脐带血，经肝素抗凝，用淋巴细胞分离液分离脐血的单个核细胞，以偏酸性的MesencultTM作为培养基进行培养、纯化和扩增，获得MSCs；2．30只SD大鼠随机分为3组，每组10只。A组：将脐血MSCs与生物蛋白胶混合，种植于羊膜管中修复10 mm坐骨神经缺损；B组：仅将生物蛋白胶种植于羊膜管中；C组：坐骨神经切下10 mm后再缝合。9周后，行大体观察、坐骨神经功能指数、腓肠肌湿重测定、组织学染色，S100免疫组化染色等检查。结果：来源于脐血的单个核细胞种植于特定的培养基中后，可产生贴壁细胞，主要表现为破骨样和间充质样细胞；传3代后，这些细胞可得到纯化、扩增。细胞植入手术后9周检查结果显示，A组的各项检测指标明显优于B组，差异显著（P＜0.05）。结论：1、人脐血中含有间充质干细胞并且能够分离培养扩增；2、人脐血MSCs能够促进大鼠坐骨神经缺损性损伤的神经再生；3、本实验组织工程化人工神经构建中的HUCBMSCs作为种子细胞，为周围神经损伤修复提供了一种新的选择。