类风湿关节炎大鼠滑膜细胞类肿瘤样增生及加味木防己汤的调节机制研究

论文摘要

类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis, RA）是一种以多发性关节组织炎性病变为主要表现的自身免疫性疾病。病理特征为滑膜细胞增生、血管翳形成、单个核细胞浸润,进而软骨侵蚀和关节破坏。该病变呈持续性,反复发作过程,对人体损害大,致残率高。目前其发病机制尚未完全清楚,但RA的病情进展体现了炎症、自身免疫和滑膜增生这三种病理生理过程。RA的发病过程中,免疫网络失衡,加上成纤维样滑膜细胞（fibroblast-like synoviocytes,FLS）的类肿瘤样生长及所分泌的大量促炎性细胞因子、趋化因子和金属蛋白酶,是导致关节内炎性细胞聚集,滑膜细胞增生和向周围组织侵蚀及基质降解和破坏的主要因素。滑膜炎是最具特征性的病理改变,滑膜组织表现为增生性侵蚀性生长,其生长性质及病理学行为在许多方面类似于肿瘤组织的特性,对关节软骨组织造成进行性破坏,导致关节畸形和功能障碍。因此,调控FLS的增生和活化,将有利于控制RA的发生和发展。加味木防己汤是在传统经方基础上研制而成,具有祛风除湿、清热通络和温阳补虚之功效;其中医治则为清除外邪、益气养血,急则治标、扶正固本。我们在阐述RA滑膜细胞增生病变机制的同时,选用加味木防己汤作为调控RA滑膜细胞过度增生的有效方药,不仅有利于发掘和提高传统中药的配伍形式,而且有利于提高临床疗效。大鼠AIA动物模型在临床表现、实验室指标和病理免疫机制上,与人类RA有着相似或相近的特点,是研究RA筛选抗炎免疫药物的较理想模型。本实验研究在此模型的基础上,探讨大鼠滑膜细胞类肿瘤样增生相关机制及中药木防己汤的调控机制。1.本实验应用CFA诱发大鼠AIA模型,于致敏后2,5,10、17、28、39 d,测量非致炎侧踝关节的肿胀度。结果表明AIA模型组大鼠足跖的肿胀度均明显高于正常对照组。致炎39 d,病理片显示AIA组大鼠关节囊内滑膜增生,有新生血管翳形成,同时有大量炎性细胞浸润,软组织明显水肿,关节间隙增宽,骨及软骨被破坏。同时胸腺指数和脾脏指数均明显高于正常组。木防己汤能够减轻AIA大鼠足踝关节肿胀度,降低胸腺指数和脾脏指数,减轻关节滑膜增生和炎性病变,对RA具有明显的治疗作用。2.以AIA大鼠作为动物模型,经加味木防己汤治疗21天之后,检测各组大鼠血清IL-1和TNF-α水平的差异,同时检测Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4,IL-10水平的差异。结果AIA大鼠血清IL-1、TNF-α、IFN-γ的表达均明显高正常组,血清IL-4, IL-10的含量明显低于正常组大鼠,表明AIA大鼠血清中TH1/TH2细胞因子的平衡遭到破坏。木防己汤治疗组大鼠,血清中致炎性细胞因子TNF-α与IL-1的含量明显低于AIA模型组,与雷公藤组接近。血清中IFN-γ的生成量明显低于AIA模型组,而对于炎症抑制性细胞因子IL-4, IL-10的含量明显高于AIA模型组,与雷公藤组接近。提示木防己汤治疗AIA的机理可能与下调血清中异常升高的IL-1和TNF-α水平有关。加味木防己汤可能具有调节AIA大鼠血清中TH1/TH2细胞因子的平衡的趋势。3.应用大鼠滑膜细胞原代培养技术观察AIA大鼠滑膜细胞的类肿瘤样增生效应,结果发现:正常大鼠的关节滑膜细胞体外增殖率很低,而AIA组大鼠关节滑膜细胞的体

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略语
• 第一部分 文献综述
• 综述一 类风湿关节炎与滑膜细胞的研究进展
• 综述二 类风湿关节炎的中医药研究进展
• 第二部分 实验研究
• 前言
• 实验一 AIA大鼠模型的制备
• 实验二 木防己汤对AIA的治疗作用
• 实验三 AIA大鼠细胞因子异常及木防己汤调节作用机制
• 实验四 类风湿关节炎大鼠滑膜细胞的类肿瘤样增生与相关基因表达的关系
• 实验五 木防己汤对AIA大鼠滑膜细胞类肿瘤样增生及相关基因表达影响的研究
• 实验六 木防己汤对类风湿关节炎大鼠滑膜MMPs生成的影响
• 结语
• 图例
• 致谢
• 个人简历