论文摘要
本研究采用K-ras突变的反义寡核苷酸和胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（IGR-ⅠR）反义寡核苷酸对胰腺癌进行体外和体内治疗实验,以探讨这两种反义基因的联合治疗效果,实验中采用了大型高场强MRI并首次引入了显微镜线圈对荷瘤鼠进行了动态观测并对其影像学表现进行了深入探讨。一、PCR-SSP法检测人胰腺癌细胞株Patu8988 K-ras基因点突变及其形式1.目的:通过PCR-SSP法检测人胰腺癌Patu8988细胞株K-ras基因第12密码子的点突变及其形式。2.材料和方法:提取对数生长期的Patu8988细胞的基因组DNA。以基因组DNA为模板,分别加入针对K-ras第12密码子的三种主要突变方式设计的PCR上游引物R1、R2、R3和共同的下游引物R4,在Taq DNA聚合酶作用下扩增相应片段。经12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,溴化乙锭染色,紫外透射分析仪下观察并拍照。3.结果:在R2-R4（GTT突变）配对上出现明亮电泳条带,分子量约为88bp,扩增片段分子量大小与设计相符合,表明人胰腺癌细胞株Patu8988存在K-ras基因第12密码子点突变,且突变形式为GTT。4.结论:PCR-SSP法测出了人胰腺癌Patu8988 K-ras基因的12密码子的突变形式为GTT。
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