肉用绵羊主要生殖器官细胞凋亡特点的研究

论文摘要

雌性哺乳动物生殖周期中,生殖器官发生明显的周期性变化。细胞凋亡在这种周期性变化中发挥着重要的作用。本文采用DAPI原位荧光标记技术和免疫组织化学技术,对高繁殖力品种小尾寒羊和低繁殖力品种萨福克羊成年母羊主要生殖器官(卵巢、输卵管、子宫)进行细胞凋亡的确认与定位,并对细胞凋亡基因Bad表达情况进行了检测。目的在于对母羊生殖器官周期性变化过程的细胞凋亡机制进行探讨,为阐述细胞凋亡对母羊繁殖力的影响提供理论依据。DAPI原位荧光标记技术的研究结果表明:小尾寒羊和萨福克羊卵巢中卵泡上皮细胞、颗粒细胞、膜细胞和黄体细胞均有凋亡现象。在三级卵泡和成熟卵泡的颗粒细胞和膜细胞中,萨福克羊比小尾寒羊表达出较多数量的凋亡细胞。黄体后期萨福克羊的细胞凋亡较小尾寒羊明显。在萨福克羊黄体期输卵管各部位上皮中发现有极少数分泌细胞具有凋亡特征,而在小尾寒羊未检测到凋亡细胞。黄体期两品种羊输卵管上皮下结缔组织有少数凋亡细胞。两品种羊在卵泡期输卵管各部位均未检测到凋亡细胞。在黄体期,小尾寒羊和萨福克羊子宫内膜的基质与腺体内皮中均检测到大量凋亡细胞,而在卵泡期,两品种羊的腺体中未检测到细胞凋亡,子宫内膜基质中检测到少量细胞发生凋亡。运用免疫组织化学技术对Bad基因表达与定位的研究结果表明:Bad在小尾寒羊和萨福克羊生殖系统中的表达具有一定的规律,呈部位依赖性和周期依赖性的特点。Bad在这两种绵羊生殖器官中的表达规律大体相似:1.原始卵泡、初级卵泡与次级卵泡中卵母细胞的平均光密度显著高于三级卵泡卵母细胞(P＜0.01):2.次级卵泡卵泡上皮细胞Bad阳性细胞率和平均光密度均显著高于原始卵泡和初级卵泡卵泡上皮细胞(P＜0.01);3.后期黄体细胞Bad阳性细胞率和平均光密度均显著高于初期黄体(P＜0.01);4.黄体期Bad在输卵管上皮细胞表达的阳性细胞率和平均光密度均显著强于卵泡期(P＜0.01);5.黄体期Bad在子宫内膜腺体表达的平均光密度显著高于卵泡期(P＜0.01);6.黄体期Bad在子宫内膜基质中的表达的平均光密度和阳性细胞率均显著高于卵泡期(P＜0.01)。Bad在这两种绵羊生殖器官中的表达也存在一些明显的差异:1.萨福克羊三级卵泡颗粒细胞的Bad阳性细胞率显著高于小尾寒羊(P＜0.01);2.萨福克羊三级卵泡和成熟卵泡膜细胞Bad阳性细胞率和平均光密度均显著高于小尾寒羊(P＜0.01);3.Bad在两品种羊输卵管表达的平均光密度存在显著差异(P＜0.01),但无规律可循;4.萨福克羊子宫内膜腺体卵泡期Bad阳性细胞平均光密度显著高于小尾寒羊(P＜0.01);5.黄体期小尾寒羊子宫内膜子叶基质Bad阳性细胞率和平均光密度均显著高于萨福克(P＜0.01)。以上结果表明,细胞凋亡是母羊生殖器官周期性变化的重要调节机制,细胞凋亡基因Bad参与了这种周期性变化调控。小尾寒羊和萨福克羊生殖器官中的细胞凋亡的差异与Bad基因的表达的差异,可能是造成两者繁殖力高低差异的基础。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 绵羊繁殖性状研究进展
• 1.2 细胞凋亡研究进展
• 1.3 细胞凋亡在雌性动物生殖系统的作用
• 2 不同繁殖力母羊生殖器官细胞凋亡的原位荧光标记特征
• 2.1 材料和方法
• 2.2 结果与分析
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 3 不同繁殖力母羊生殖器官细胞中凋亡相关基因BAD的表达
• 3.1 材料与方法
• 3.2 结果与分析
• 3.3 讨论
• 3.4 小结
• 4 结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 作者简历