低聚木糖对草鱼非特异性免疫功能及免疫相关基因表达的影响

论文摘要

本研究以草鱼（Ctenopharyngodon idellus）为试验对象,研究不同含量的低聚木糖对草鱼非特异性免疫功能以及免疫相关基因表达的影响。1.在研究低聚木糖对草鱼非特异性免疫功能的实验中,选择规格、体重基本一致的健康草鱼,随机分为5组,每组设3个重复,每个重复35尾,在草鱼基础饲料中添加不同浓度的低聚木糖,分别为1（A1组）、2（A2组）、4（A3组）以及6 g/kg（A4组）,另外将基础饲料组设为对照组（Ao组）。每组分别投喂一种饲料。分别于试验的第0 d、7 d、14 d、28 d、56 d检测草鱼血清溶菌酶活性、血清超氧化物歧化酶活性和补体C3的含量。结果表明,在整个试验期内,与对照组相比,各试验组草鱼的免疫指标均有不同程度的提高。其中,A2组的血清溶菌酶活性与对照组相比无明显变化,超氧化物歧化酶（SOD）活性和补体C3的含量均显著高于A0组（P<0.05）,第14d时SOD活性达到最大值（127.09）,第28d时补体C3的含量达到最大值（0.683）。A3组的血清溶菌酶活力、超氧化物歧化酶活性和补体C3的含量均显著高于A0组（P<0.05）,且在第28d时血清溶菌酶活性达到最大值（0.165）,第7d时SOD活性达到最大值（128.73）,第28 d时补体C3的含量达到最大值（0.700）。结果显示,饲料中添加低聚木糖可提高草鱼非特异性免疫功能,最佳添加量为2-4 g/kg。2.在研究低聚木糖对草鱼免疫相关基因表达影响的实验中,在草鱼基础饲料中分别添加2（A2组）和4g/kg（A4组）的低聚木糖,另设基础饲料为对照组（A0组）。分别于试验第14 d、28 d、42 d、56 d用荧光定量PCR技术检测草鱼白介素-1p（IL-1β）、干扰素（IFN）以及肿瘤坏死因子α（TNFα）三种免疫基因在肝脏、肾脏和脾脏中的表达。检测发现IL-1p在肝脏中的表达表现为先下调而后升高,但在肾脏和脾脏中与对照组相比均有显著提高（P<0.05）。IFN的表达在肝脏和肾脏中先下降后上升,且A4组显著提高（P<0.05）,在脾脏中IFN表达发现,A2组与对照组相比无明显差异,A4组表达显著提高（P<0.05）。肝脏和脾脏中TNFα的表达均有上升,且在28 d显著提高（P<0.05）,肾脏中TNFα的表达在14d后显著提高（P<0.05）,之后有所下调,然后上升与对照组无明显差异。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 功能性低聚糖的研究概况
• 1.1.1 低聚糖的概念和种类
• 1.1.2 低聚糖的主要功能
• 1.1.2.1 优化肠道微生态体系
• 1.1.2.2 提高机体免疫力
• 1.1.2.3 促进动物对营养的吸收
• 1.1.2.4 促进动物生长,提高饲料利用率
• 1.1.2.5 改善饲料适口性
• 1.2 低聚木糖简介
• 1.2.1 低聚木糖
• 1.2.2 低聚木糖的特点及功能
• 1.2.2.1 稳定性
• 1.2.2.2 难消化性,低热量
• 1.2.2.3 增殖双歧杆菌,调整肠道菌群
• 1.2.2.4 预防龋齿发生
• 1.2.2.5 刺激钙的吸收
• 1.2.3 低聚木糖的应用
• 1.2.3.1 在食品中的应用
• 1.2.3.2 在饲料工业中的应用
• 1.3 鱼类免疫相关因子研究进展
• 1.3.1 鱼类免疫因子
• 1.3.2 影响鱼类免疫基因表达的因素
• 1.4 本研究的目的与意义
• 第二章 低聚木糖对草鱼非特异性免疫功能的影响
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 试验鱼及试验条件
• 2.1.2 试验设计
• 2.1.3 样品的采集
• 2.1.4 血清溶菌酶活性的测定
• 2.1.5 血清超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定
• 3含量测定'>2.1.6 血清补体C₃含量测定
• 2.1.7 数据统计与分析
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 低聚木糖对草鱼血清溶菌酶活性的影响
• 2.2.2 低聚木糖对血清超氧化物歧化酶活性的影响
• 3含量的影响'>2.2.3 低聚木糖对血清补体C₃含量的影响
• 2.3 讨论
• 第三章 低聚木糖对草鱼免疫相关基因表达的影响
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 试验鱼及试验条件
• 3.1.2 试验设计
• 3.1.3 样品采集
• 3.1.4 提取组织RNA
• 3.1.5 RNA的分析与定量
• 3.1.6 反转录制备cDNA
• 3.1.7 引物设计
• 3.1.8 荧光定量PCR
• 3.1.9 数据分析
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 RNA质量的检测
• 3.2.2 反转录效果的检测
• 3.2.3 低聚木糖对草鱼免疫相关基因表达的影响
• 3.2.3.1 低聚木糖对IL-1β表达的影响
• 3.2.3.2 低聚木糖对IFN表达的影响
• 3.2.3.3 低聚木糖对TNFα表达的影响
• 3.3 讨论
• 参考文献
• 硕士期间发表论文
• 致谢