EGFR基因突变与非小细胞肺癌患者血清蛋白表达的相关性

论文摘要

目的:探讨表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor ,EGFR）基因突变与非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者血清蛋白表达的相关性,筛选EGFR基因突变型与野生型非小细胞肺癌患者差异表达蛋白,以期对非小细胞肺癌患者酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor,TKI）敏感性预测的研究提供帮助。方法:应用变性高效液相色谱（Denaturing High Performance Liquid Chromatography,DHPLC）技术检测49例非小细胞肺癌患者EGFR基因突变情况;并应用表面加强激光解析电离化飞行时间质谱（surface enhanced laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS）技术,以弱阳离子芯片捕获血清蛋白质,分析49例NSCLC患者EGFR基因突变组与野生组血清蛋白表达相关性。结果:①应用DHPLC技术检测49例NSCLC患者EGFR基因突变情况,共发现13例突变;其中第19外显子缺失突变10例,占76.92%;第21外显子替代突变3例,占23.10%。检测灵敏度为100%。②应用弱阳离子芯片检测此49例NSCLC患者术前与术后10天的血清蛋白谱:发现EGFR基因突变组NSCLC患者（19与21外显子突变型NSCLC患者）术前外周血在分子量为4597Da的蛋白峰较野生组增高（P<0.05）;灵敏度、特异度分别为76.92%和75%。EGFR基因19外显子突变型NSCLC患者术前外周血在分子量为4597Da的蛋白峰较野生型增高（P<0.05）,灵敏度和特异度分别为80%和75%。21外显子突变型与野生型NSCLC患者术前外周血蛋白谱比较除上述改变外,还发现在分子量为8694Da的蛋白峰较野生型增高（P<0.05）;灵敏度分别为66.67%和100%,特异度分别为75%和72.22%。19外显子突变型NSCLC患者术前外周血在分子量为13752Da的蛋白峰较21外显子突变型降低（P<0.05）;灵敏度、特异度分别为70%和100%。上述峰值差异在各组NSCLC患者术后10天血清蛋白谱检测中亦发现,灵敏度和特异度同上。对NSCLC患者肺癌根治术后10天与术前血清蛋白谱经BioMarker Wizard与SPSS统计学软件分析,发现NSCLC患者术后血清蛋白谱在分子量为3812Da、4791Da、6189Da、6430Da的蛋白峰较术前降低（P<0.05）,而在分子量为16080Da、16138Da的蛋白峰较术前增高（P<0.05）。未发现这6个血清蛋白峰术后变化值在EGFR基因突变组与野生组NSCLC患者中存在明显差异（P>0.05）。结论:DHPLC是一种新的高通量筛选DNA序列变异的技术,可以快速、准确筛选NSCLC患者EGFR基因突变。NSCLC患者EGFR基因突变型与野生型外周血蛋白表达存在显著性差异,应用全新的蛋白质组学研究技术平台------SELDI-TOF-MS技术有望通过血清蛋白的差异表达预测非小细胞肺癌患者TKI敏感性,为TKI治疗选择合适的患者提供依据。

论文目录

• 英文缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 实验一:非小细胞肺癌患者组织中 EGFR 基因突变分析
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 实验二:EGFR 基因突变与非小细胞肺癌患者血清 蛋白表达的相关性
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 综述