异丙酚和氯胺酮对大鼠内侧膝状体腹侧神经元中潜伏期听觉诱发电位的影响及机制探讨

论文摘要

第一部分异丙酚和氯胺酮对大鼠内侧膝状体腹侧神经元中潜伏期听觉诱发电位的影响【目的】研究异丙酚和氯胺酮对大鼠内侧膝状体腹侧神经元（MGBv）中潜伏期听觉诱发电位（MLAEP）的影响。【方法】72只SD大鼠,随机分为生理盐水组（NS组）、异丙酚溶媒组（I组）、异丙酚组（P组）和氯胺酮组（K组）,其中异丙酚组（P组）分为5.6μmol/L（P1组）、16.8μmol/L（P2组）、56μmol/L（P3组）、168μmol/L（P4组）和560μmol/L（P5组）。氯胺酮组（K组）分为18μmol/L（K1组）、54μmol/L（K2组）、180μmol/L（K3组）、540μmol/L（K4组）和1800μmol/L（K5组）。采用中枢核团内微量药物注射的方法,在大鼠内侧膝状体腹侧神经元分别注射5.6μmol/L（P1组）、16.8μmol/L（P2组）、56μmol/L（P3组）、168μmol/L（P4组）、560μmol/L（P5组）异丙酚、18μmol/L（K1组）、54μmol/L（K2组）、180μmol/L（K3组）、540μmol/L（K4组）、1800μmol/L（K5组）氯胺酮或相应的溶媒脂肪乳剂或生理盐水0.2μl,通过耳塞及空心耳棒给予声音刺激,记录MGBv核团内的MLAEP。【结果】异丙酚组（P组）中的5.6μmol/L（P1组）、16.8μmol/L（P2组）异丙酚对MLAEP没有影响,而异丙酚组（P组）中56μmol/L（P3组）、168μmol/L（P4组）、560μmol/L（P5组）异丙酚均引起MLAEP中Na、Pa、Nb波潜伏期延长,Na-Pa波幅明显下降（P＜0.05）,氯胺酮组（K组）中18μmol/L（K1组）、54μmol/L（K2组）、180μmol/L（K3组）、540μmol/L（K4组）、1800μmol/L（K5组）氯胺酮对MLAEP没有影响。生理盐水组（NS组）和异丙酚溶媒组（I组）对MLAEP也没有影响。【结论】56μmol/L以上的异丙酚抑制大鼠MGBv内的MLAEP并呈一定的浓度依赖性,而氯胺酮对大鼠MGBv内的MLAEP则没有影响。第二部分异丙酚和氯胺酮对大鼠内侧膝状体腹侧神经元离子通道的影响【目的】研究异丙酚和氯胺酮对大鼠内侧膝状体腹侧神经元离子通道的影响,并探讨其可能的作用机制。【方法】48只SD大鼠随机分成8组,分别为T型Ca2+电流的阻断剂Ni2++异丙酚组（A1组）,高电压激活Ca2+电流的阻断剂Cd2++异丙酚组（B1组）,A型K+电流的阻断剂4-AP+异丙酚组（C1组）,阈下Na+电流的阻断剂TTX+异丙酚组（D1组）和T型Ca2+电流的阻断剂Ni2++氯胺酮组（A2组）,高电压激活Ca2+电流的阻断剂Cd2++氯胺酮组（B2组）,A型K+电流的阻断剂4-AP+氯胺酮组（C2组）,阈下Na+电流的阻断剂TTX+氯胺酮组（D2组）。采用中枢核团内微量药物注射的方法,在大鼠内侧膝状体腹侧神经元（MGBv）先分别给予T型Ca2+电流、高电压激活Ca2+电流、A型K+电流以及阈下Na+电流的阻断剂Ni2+)（600μM）、Cd2+（50μM）、4-AP（100μM）和TTX（300nM）各0.2μl,观察各阻断剂对中潜伏期听觉诱发电位（MLAEP）的波幅和潜伏期的影响。再依次给予56μmol/L的异丙酚或180μmol/L的氯胺酮0.2μl,记录大鼠内侧膝状体腹侧核团（MGBv）内的MLAEP的变化。【结果】T型Ca2+电流阻断剂Ni2+（A1组）和A型K+电流阻断剂4-AP（C1组）使用后,大鼠的MLAEP没有明显的变化,再使用异丙酚后,则两组MLAEP的Na、Pa、Nb波潜伏期延长,Na-Pa波幅下降（P＜0.05）;高电压激活Ca2+电流阻断剂CdCl2（B1组）使用后,MLAEP的Na、Pa、Nb波潜伏期有较明显延长（P＜0.05）,再使用异丙酚后则Na、Nb、Pa波潜伏期不变,同时伴有Na-Pa波幅的下降（P＜0.05）;阈下Na+电流阻断剂TTX（D1组）用后,MLAEP的Na-Pa波幅有较明显下降（P＜0.05）,再使用异丙酚后则Na-Pa波幅不变,同时伴有Na、Pa、Nb波潜伏期的延长（P＜0.05）;T型Ca2+电流阻断剂Ni2+（A2组）和A型K+电流阻断剂4-AP（C2组）使用后,大鼠的MLAEP没有明显的变化,再使用氯胺酮后,大鼠的MLAEP仍没有明显的变化;高电压激活Ca2+电流阻断剂CdCl2（B2组）使用后,MLAEP的Na、Pa、Nb波潜伏期有较明显延长（P＜0.05）,再使用氯胺酮后,大鼠的MLAEP没有明显的变化;阈下Na+电流阻断剂TTX（D2组）用后,MLAEP的Na-Pa波幅有较明显下降（P＜0.05）,再使用氯胺酮后,大鼠的MLAEP没有明显的变化。【结论】异丙酚可能主要是通过作用于大鼠内侧膝状体腹侧神经元的Na+、Ca2+通道,进而影响中潜伏期听觉诱发电位。其次,离子通道中Na+通道的阻滞对MLAEP的影响主要表现在Na-Pa波幅下降,高电压激活Ca2+通道的阻滞对MLAEP的影响主要表现在Na、Pa和Nb波潜伏期的延长。第三部分异丙酚和氯胺酮对大鼠内侧膝状体腹侧神经元细胞持续钠电流和高电压激活钙电流的影响【目的】验证异丙酚和氯胺酮对大鼠内侧膝状体腹侧神经元细胞持续钠电流和高电压激活钙电流的影响。【方法】健康SD大鼠,鼠龄2～3周,随机分为4组:生理盐水组（对照组）、异丙酚组、氯胺酮组和脂肪乳剂组（异丙酚溶媒组）。异丙酚组分为5.6μmol、16.8μmol、56μmol、168μmol、560μmol/L5种不同浓度,氯胺酮组分为18μmol、54μmol、180μmol、540μmol、1800μmol/L5种不同浓度。采用脑片膜片钳全细胞记录技术,观察并记录不同浓度的异丙酚和氯胺酮对大鼠内侧膝状体腹侧神经元细胞持续钠电流和高电压激活钙电流的影响。[结果】16.8μmol、56μmol、168μmol、560μmol浓度的异丙酚和1800μmol氯胺酮能够抑制大鼠内侧膝状体腹侧神经元持续钠电流和高电压激活的钙电流（P＜0.05）,5.6μmol的异丙酚、18μmol、54μmol、180μmol、540μmol氯胺酮、生理盐水和异丙酚溶媒（脂肪乳剂）对大鼠内侧膝状体腹侧神经元持续钠电流和高电压激活的钙电流则没有影响。【结论】异丙酚对大鼠内侧膝状体腹侧神经元细胞持续钠电流和高电压激活钙电流有抑制作用,并呈一定的浓度依赖性;氯胺酮只在极高的浓度下对大鼠内侧膝状体腹侧神经元细胞持续钠电流和高电压激活钙电流有一定的抑制作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 异丙酚和氯胺酮对大鼠内侧膝状体腹侧神经元中潜伏期听觉诱发电位的影响
• 引言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 异丙酚和氯胺酮对大鼠内侧膝状体腹侧神经元离子通道的影响
• 引言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 第三部分 异丙酚和氯胺酮对大鼠内侧膝状体腹侧神经元细胞持续钠电流和高电压激活钙电流的影响
• 引言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• 致谢
• 综述1 异丙酚对中枢神经递质作用机制的研究及相关进展
• 综述2 氯胺酮中枢神经系统作用机制的研究进展